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公开(公告)号：CN115969965A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202310063300.3
申请日：2020-09-29
申请人： 复旦大学
摘要： 本发明公开了一种结核分枝杆菌的重组DNA疫苗及其制备方法。本发明的重组DNA疫苗通过将基因Ag85B、Rv2029c和Rv1738重组入真核表达载体获得。本发明研究发现，免疫6～8周龄C57BL/6雌性小鼠后，DNA疫苗Ag85B‑Rv2029c‑Rv1738‑pVAX1可以显著提高小鼠外周血中CD4+，CD8+T淋巴细胞的比例，增加小鼠脾淋巴细胞抗原特异性Th1型细胞因子IL‑2，IFN‑γ，TNF‑α的分泌，降低小鼠肺、脾的BCG细菌计数，提示该重组DNA疫苗可以有效控制分枝杆菌在小鼠体内的生长繁殖。因此，本发明的重组DNA疫苗可用于结核分枝杆菌感染的预防和治疗。
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公开(公告)号：CN104107427B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201410283903.5
申请日：2014-06-24
申请人： 复旦大学
摘要： 本发明属于遗传工程和结核病疫苗研究技术领域，具体为一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法。其通过在大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒pMV261中依次插入结核保护性抗原Ag85B的信号肽ASP和促细胞凋亡基因BAX先得到重组质粒，再将重组质粒电转入BCG而获得。与BCG相比，本发明所构建的重组卡介苗rBCG:: ASP—BAX具有较强的诱导巨噬细胞发生凋亡的能力，有望提高机体对结核分枝杆菌的免疫力。另一方面，本发明重组卡介苗诱导机体产生的细胞免疫以Th1为主导，更利于形成抗结核分枝杆菌的免疫保护力。因此，本发明的重组卡介苗rBCG::ASP—BAX有望成为新的有效抗结核疫苗,具有较大的研发潜力。
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公开(公告)号：CN104107426A
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201410283901.6
申请日：2014-06-24
申请人： 复旦大学
摘要： 本发明属于遗传工程和结核病疫苗研究技术领域，具体为一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法。其通过在大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒pMV261中依次插入结核保护性抗原Ag85B和促细胞凋亡基因BAX先得到重组质粒，再将重组质粒电转入BCG而获得。与BCG相比，本发明所构建的重组卡介苗rBCG::Ag85B—BAX具有较强的诱导巨噬细胞发生凋亡的能力，有望提高机体对结核分枝杆菌的免疫力。另一方面，与BCG相比，本发明重组卡介苗诱导机体产生的细胞免疫以Th1为主导，更利于形成抗结核分枝杆菌的免疫保护力。因此，本发明的重组卡介苗rBCG::Ag85B—BAX有望成为新的有效抗结核疫苗，具有较大的研发潜力。
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公开(公告)号：CN102161695A
公开(公告)日：2011-08-24
申请号：CN201110054374.8
申请日：2011-03-08
申请人： 复旦大学
IPC分类号： C07K14/35 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/569
摘要： 本发明属于结核病诊断技术领域，具体为一种用于多耐药结核杆菌血清学诊断的重组蛋白。该重组蛋白为Rv1793重组蛋白，由如下步骤获得：将Rv1793插入到pET28aEcoRI和HindIII酶切位点之间形成重组质粒，然后转化到E.coliBL21中形成重组E.coli，表达该蛋白。这种新的重组蛋白用于耐药血清学诊断的敏感性可以达到75%，远远大于对照CFP-10重组蛋白的耐药诊断率53.3%。Rv1793重组蛋白将成为一种有效的应用于耐药结核血清学诊断的生物标志物。
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公开(公告)号：CN101054375B
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN200710040765.8
申请日：2007-05-17
申请人： 复旦大学
IPC分类号： C07D453/02 , A61K31/49 , A61P31/06
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体为一种N-苯基-6-哌啶基-N′-奎宁-8-并哒嗪-1，3，5-三嗪-2，4-二胺(N′-[1-(2-hydroxyphenyl)ethylidene]-4，5-dihydro-1H-benzo[g]indazole-3-carbohydrazide)化合物及其应用，该化合物在对结核杆菌生长的体外抑制试验中，能够显著的抑制结核杆菌的生长。其中，化合物对结核杆菌H37Ra的最小抑菌浓度(MIC)为0.625μg/ml；化合物对标准有毒株H37Rv的最小抑菌浓度(MIC)为0.1μg/ml；化合物对结核杆菌临床耐药菌株的最小抑菌浓度(MIC)为0.1μg/ml。该化合物可以用于制备治疗结核病及其他微生物引起的疾病的药物。
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公开(公告)号：CN101054375A
公开(公告)日：2007-10-17
申请号：CN200710040765.8
申请日：2007-05-17
申请人： 复旦大学
IPC分类号： C07D453/02 , A61K31/49 , A61P31/06
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体为一种N－苯基－6－哌啶基－N′－奎宁－8－并哒嗪－1，3，5－三嗪－2，4－二胺(N′－[1－(2－hydroxyphenyl)ethylidene]－4，5－dihydro－1H－benzo[g]indazole－3－carbohydrazide)化合物及其应用，该化合物在对结核杆菌生长的体外抑制试验中，能够显著的抑制结核杆菌的生长。其中，化合物对结核杆菌H37Ra的最小抑菌浓度(MIC)为0.625μg/ml；化合物对标准有毒株H37Rv的最小抑菌浓度(MIC)为0.1μg/ml；化合物对结核杆菌临床耐药菌株的最小抑菌浓度(MIC)为0.1μg/ml。该化合物可以用于制备治疗结核病及其他微生物引起的疾病的药物。
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公开(公告)号：CN1884552A
公开(公告)日：2006-12-27
申请号：CN200610028022.4
申请日：2006-06-22
申请人： 复旦大学
摘要： 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和结核分枝杆菌与HIV的共感染，导致结核病发病率增高，成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因和BCG中缺失的结核分枝杆菌基因插入大肠杆菌—结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒，并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明，和BCG疫苗相比，保护性抗原得到了更高效的表达，原来缺失的Rv3425抗原也得到了表达，并且所诱导的小鼠脾细胞IFN－γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的细胞免疫水平。
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公开(公告)号：CN1274835C
公开(公告)日：2006-09-13
申请号：CN200410067343.6
申请日：2004-10-21
申请人： 复旦大学
摘要： 本发明属生物技术领域，具体为一种结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的融合表达方法。它将esat-6基因和人α-2a干扰素基因串联起来，两者间的linker为人肠激酶识别序列，将重组融合基因的DNA片段插入表达载体p PIC9K，电击导入毕赤氏酵母菌株SMD1168中，实现ESAT-6融合蛋白的高效分泌表达。经疏水层析和离子交换获得纯的ESAT-6蛋白。
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公开(公告)号：CN1737152A
公开(公告)日：2006-02-22
申请号：CN200510027966.5
申请日：2005-07-21
申请人： 复旦大学
摘要： 本发明涉及基因工程领域和结核疫苗领域。近十几年来由于结核耐药株增多和HIV/AIDS的蔓延，结核病发病率增高，成为继HIV之后人类的第二大杀手。目前全球广泛使用的唯一的结核病疫苗是BCG。本发明将结核分枝杆菌最重要的保护性抗原基因插入大肠杆菌－结核分枝杆菌穿梭质粒的多克隆位点形成重组质粒，并将其转化入BCG中形成重组结核疫苗。实验结果表明，和BCG组相比，该保护性抗原得到了更高效的表达，并且所诱导的脾细胞IFN－γ表达也有显著的增高。这说明本发明的重组结核疫苗可以诱导较BCG高的体液和细胞免疫水平。
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公开(公告)号：CN116732165A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310767612.2
申请日：2023-06-27
申请人： 复旦大学
IPC分类号： C12Q1/6883 , C12N15/113 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种结核诊断circRNA标志物、引物及其应用。本发明筛选到两条在活动性肺结核患者PBMC中显著高表达的circRNA，即：hsa_circ_0002371，其转录区域位于10号染色体，由CCAR1基因的外显子20和21的反向剪接形成；hsa_circ_0007460，其转录区域位于1号染色体，由GOSR1基因的外显子6~9的反向剪接形成。本发明还公开了基于circRNA标志物的结核诊断试剂盒中的引物；利用本发明的circRNA标志物能够有效区分未感染人群与活动性肺结核患者，为研究活动性肺结核的发病机制提供新的思路，也为活动性肺结核的早期诊断提供了新的靶标。
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