可逆终止核苷酸及其在DNA合成测序及单分子测序中的应用

    公开(公告)号:CN118084996A

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410228897.7

    申请日:2024-02-29

    Abstract: 本发明公开了一种可逆终止核苷酸及其在DNA合成测序及单分子测序中的应用,所述荧光标记核苷酸典型结构#imgabs0#其中Base为U,C,A,G四个不同的碱基;R是将噻唑烷连接单元与核苷酸连接在一起的化学分子基团;Cleavable Linker为噻唑烷连接单元;R1是将噻唑烷连接单元与荧光素连接在一起的化学分子基团;Dye是荧光染料。该可逆终止核苷酸在参与DNA链延伸后,可快速发生断裂。断裂后,残留在碱基上的基团较小,有利于DNA合成测序的顺利进行。在DNA合成测序及单分子测序中,连接单元可快死断裂,反应干净彻底,几乎没有观察到副反应发生;且该类化合物合成简单方便,且可以大量合成,能够极大降低测序成本。

    基于多色荧光可逆终止核苷酸的DNA单分子测序系统与装置

    公开(公告)号:CN110343612B

    公开(公告)日:2021-07-13

    申请号:CN201810308292.3

    申请日:2018-04-08

    Abstract: 本发明提供了一种基于多色荧光可逆终止核苷酸的DNA单分子测序系统及装置,所述测序系统包括引物、待测DNA模板、多色荧光可逆终止核苷酸测序试剂;所述引物固定在流通池反应器表面;将待测DNA模板与测序引物进行杂交,然后用多色荧光可逆终止核苷酸延伸引物后,检测延伸引物的荧光信号即可得到待测DNA序列信息;所述待测DNA模板的3’端不需要标记定位荧光。本发明通过利用测序循环过程中,延伸反应物的荧光作为下一次延伸的定位荧光,或采用固定在流通池反应器表面的定位荧光标记物作为定位荧光,无需对待测DNA模板的3’端标记定位荧光,从而有效避免了由于淬灭而导致定位信息丢失的问题,可进一步大幅延长测序读长并降低错误率。

    一种核苷四磷酸的合成方法

    公开(公告)号:CN109232693A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811143066.0

    申请日:2018-09-28

    Abstract: 本发明公开了一种核苷四磷酸的合成方法。所述方法包括以下步骤:将核苷与环状磷酸化试剂发生选择性磷酸化反应,再经氧化、水解开环,即得所述核苷四磷酸。所述环状磷酸化试剂的结构如式I所示:式I。本方法将核苷在该高选择性磷酸化试剂作用下,选择性地生成5'-核苷四磷酸,在此过程中并不需要将3'-OH(以及2'-OH)保护起来,即能有效抑制3'(以及2'-)四磷酸的生成。本发明合成的核苷四磷酸在DNA测序、标记、延伸等生物学领域具有广泛用途,目前其销售价格昂贵,合成方法复杂,反应选择性差;而本发明提供的合成方法选择性好,容易分离纯化,且所需实验条件简单,合成过程均为常规化学反应,可用于大规模推广使用。

    一种单分子测序芯片及其制备方法

    公开(公告)号:CN108424844A

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201810307850.4

    申请日:2018-04-08

    Abstract: 本发明提供了一种单分子测序芯片及其制备方法,所述芯片包括流道板、基板和盖板,所述流道板设置在基板和盖板之间;所述流道板上设置流通池,所述流通池包括多个平行设置的流道;所述流通池的上方设置盖板、流通池的下方设置基板;所述流道的底部与基板表面连通;与流道板接触的所述基板的表面固定测序引物和定位用荧光标记物。该芯片表面负载有荧光寿命长、荧光强度高,荧光性能稳定的量子点或荧光微球,可以在测序过程中对目标DNA单分子进行定位。由于量子点或荧光微球在经过很多次的激发光照后仍然能够保持较高的荧光强度,解决了定位荧光信号无法长时间保持的问题,显著提高单分子测序读长,降低测序的错误率,并有效降低测序成本。

Patent Agency Ranking