公开(公告)号：CN118910329A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411075408.5

申请日：2024-08-07

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 陈思璇 ,  王瀚 ,  陈瑞爱 ,  李佳慧 ,  冯海霞

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本申请属于生物领域，公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的体系，体系中包含有分别针对禽腺病毒FAdV‑4的Fiber2基因和Hexon基因设计得到的第一RPA引物对和第二RPA引物对、Cas12a蛋白、crRNA‑Fiber2、crRNA‑Hexon、ssDNA‑reporter；此外，本申请还公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的试剂盒，包含有上述体系外，还包含有Buffer、RNase‑free H2O、Rnase Inhibitor以及DNA质粒。

公开(公告)号：CN118356484A

公开(公告)日：2024-07-19

申请号：CN202410472407.8

申请日：2024-04-19

Applicant: 华南农业大学 ,  广东温氏大华农生物科技有限公司 ,  肇庆大华农生物药品有限公司 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 罗琼 ,  陈瑞爱 ,  冯金牛 ,  陈振伟 ,  温良海 ,  熊挺 ,  黄水洪 ,  莫秋女 ,  李小静

IPC: A61K39/255 ,  C12N7/00 ,  C12N5/077 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: 本申请属于生物制药技术领域，公开了一种MD疫苗的制备方法，该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞，随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存，其中冻存时使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃；再以8～12℃/min的速率将苗温降至‑100℃，移入液氮保存，本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法，该方法具有制备速度快，疫苗数量大等优点，更加适合MD疫苗的大规模制备，此外，本申请还公开了一种MD疫苗。

公开(公告)号：CN118048322A

公开(公告)日：2024-05-17

申请号：CN202410256623.9

申请日：2024-03-06

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 熊挺 ,  陈瑞爱 ,  梁雪静 ,  赵希雅 ,  朱凌云

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag，所述鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag是通过先将野生型鸡传染性支气管炎病毒毒株IBV‑p65分段扩增，得到1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、5E片段后，将Flag标签插入5E片段，再将1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、插有Flag标签的5E片段体外拼接得到插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA，最后将插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA经体外转录、电转得到的，此外，本申请还公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的构建方法及一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的应用。

公开(公告)号：CN119265137A

公开(公告)日：2025-01-07

申请号：CN202411275864.4

申请日：2024-09-12

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 李佳慧 ,  陈瑞爱 ,  熊挺 ,  陈思璇 ,  冯海霞

IPC: C12N5/10 ,  C12N5/02 ,  C07K14/165 ,  C07K16/10 ,  C12N15/50 ,  C12N15/85 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及生物领域，公开了一株稳定表达IBV JS‑96S1蛋白的CHO‑K1细胞株，该细胞株能够被较好的驯化，进而得到悬浮CHO‑K1细胞株，具有驯化时间短，细胞状态好的优势。同时，本发明还公开了采用该细胞株进行悬浮驯化得到悬浮CHO‑K1细胞株的方法以及该细胞株的用途；此外本发明还公开了IBV S1蛋白和用途。

公开(公告)号：CN119220506A

公开(公告)日：2024-12-31

申请号：CN202411243968.7

申请日：2024-09-05

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  华南农业大学

Inventor： 刘定祥 ,  古倩儿 ,  胡梓弘 ,  杨蓓 ,  何佳文 ,  陈瑞爱

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/50 ,  A61K39/17 ,  A61K39/215 ,  A61K39/295 ,  A61P31/22 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种表达IBV S蛋白的基因VII型NDV重组病毒及其制备方法和应用，该方法包括：在pBR322‑DHN3mF病毒基因组的P基因和M基因之间插入经修饰的S基因，得到重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2、rDHN3mF‑H120‑S6P、rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS中的任一种。本发明通过将适应细胞株的IBV‑P65的S2区域与QX型IBV MH20的S2区域进行替换，拯救出重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2；通过将H120‑S蛋白上的第692位、第768位、第772位、第815位、第862位、第863位疏水性氨基酸均突变为脯氨酸拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P；在突变6个疏水性氨基酸为脯氨酸的基础上，将第533位‑第537位的氨基酸依次突变为甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、丝氨酸后拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS。将拯救出的三株重组病毒分别感染BHK‑21细胞，经WB验证能检测到S蛋白以及NDV全蛋白的高效表达。

公开(公告)号：CN118496325A

公开(公告)日：2024-08-16

申请号：CN202410623114.5

申请日：2024-05-20

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  肇庆大华农生物药品有限公司

Inventor： 陈瑞爱 ,  熊挺 ,  刘定祥 ,  李小静 ,  董国初

IPC: C07K14/165 ,  C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中，抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗，该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点，有利于PEDV防控和净化。

公开(公告)号：CN117969830A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202311862123.1

申请日：2023-12-29

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  肇庆大华农生物药品有限公司

Inventor： 陈瑞爱 ,  熊挺 ,  庄婷婷 ,  马光明 ,  张淑琼 ,  赵希雅 ,  梁雪静 ,  钟伟峰

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  G01N33/531 ,  G01N33/535 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒IgA抗体检测试剂盒，所述的试剂盒包括：抗原包被板、样品稀释液、浓缩洗涤液、酶标试剂、显色液、终止液、阳性对照和阴性对照。本发明提供的猪流行性腹泻病毒IgA抗体检测试剂盒，可同时检测血清和乳汁样品，灵敏度高，特异性强。

公开(公告)号：CN117384860A

公开(公告)日：2024-01-12

申请号：CN202310188666.3

申请日：2023-02-28

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

Inventor： 陈瑞爱 ,  鑫婷 ,  丁家波 ,  张广智 ,  沈青春 ,  熊挺 ,  刘郁夫 ,  梁琳 ,  杨洁

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/24 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及药及动物病检测技术领域，具体而言，本发明涉及一种用于结核菌素效价标定的单克隆抗体，其与IFN‑γ的结合特异性强，为采用其进行IFN‑γ的测定提供了良好的基础，进而也为结核菌素效价标定提供了良好的基础。相应的，本发明还公开了分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株GIFN‑5G2。本发明还公开了包括该单克隆抗体的药物、试剂盒。

公开(公告)号：CN116479045A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310232502.6

申请日：2023-03-13

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  肇庆大华农生物药品有限公司 ,  华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司

Inventor： 容芳 ,  李作生 ,  陈瑞爱 ,  陈桂娥 ,  孙荣航 ,  冯夏宁 ,  刘郁夫 ,  郝文茜

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/65 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明属于基因工程及生物检测技术领域，公开了一种禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系的构建与应用。所述构建方法为：根据禽白血病病毒p27蛋白基因序列信息，在起始密码子ATG之前添加Kozac序列，在序列N端连接小鼠IgGκ链信号肽序列，在序列C端设计组氨酸标签与Flag标签，得到改造后的p27序列；然后将改造后的p27序列克隆至pCMV‑EGFP载体，构建得到重组表达质粒pCMV‑EGFP‑p27；将重组表达质粒经转化后转染CHO‑K1细胞，然后通过G418加压筛选，得到单克隆细胞，扩大培养，得到禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系。该基因工程细胞系可用于禽白血病病毒的检测。

公开(公告)号：CN116286885A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202210900601.2

申请日：2022-07-28

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司

Inventor： 陈瑞爱 ,  熊挺 ,  刘定祥

IPC: C12N15/50 ,  C12N15/11 ,  C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N7/00 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎KC疫苗毒株及其制备方法、疫苗，涉及生物工程技术领域。具体的，本发明基于特定的引物，以Beaudette‑p65为骨架，将Beaudette(S1)编码区的第297‑532位氨基酸替换成QX型流行毒KC毒株的S1，其他序列保持不变。成功拯救出重组病毒rIBV‑Beau‑KC(S1)。通过连续在SPF鸡胚和Vero细胞上传代，获得1株具有Vero细胞适应性的重组毒株rIBV‑Beau‑KC(S1)‑p10V9，EID50和TCID50分别为106.78/mL和105.23/mL，与母本毒相似增殖能力。