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公开(公告)号：CN103409500B
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201310173307.7
申请日：2013-05-10
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定烟草抗性基因的有效方法，本发明所用的农杆菌株系为GV3101(pMP90),属根癌农杆菌，在烟草的遗传转化中效果比较好。采用的转化方法是电击转化法，而不是常用的冻融法或热激法，使用伯乐公司的电转化仪，其转化参数为0.1cm电击杯、输出25mF、电压1.8kV和抗性200W，提高了转化效率；本发明所用的培养基是最常用的LB培养基，而不是较复杂的YEP或YEB培养基，且所加抗生素分别为25mg/mL卡那霉素和50mg/mL利福平，可以有效的杀死没有转化成功的农杆菌，节省了筛选时间。
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公开(公告)号：CN104535667A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410605969.1
申请日：2014-10-30
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用高效液相色谱法分离检测松柏醇和芥子醇含量的方法。打破了常规用高相气相色谱测定松柏醇的方法，并且此方法可以同时检测松柏醇和芥子醇。另外可以实现和酸类物质在同一种条件下测定的方法，使实验数据更能说明问题。该方法采用C18柱，流动相为水和甲醇，体积流量为0.4-0.7mL/min，柱温为25-30℃，分析时间为70min，检测波长为275nm，进样量为20uL，能够有效的检测分离松柏醇和芥子醇，并且峰形较好，能够用来分离测定样品中松柏醇和芥子醇。
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公开(公告)号：CN103030466B
公开(公告)日：2014-06-18
申请号：CN201210591523.9
申请日：2012-12-29
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了促进石斛移栽试管苗速生优质的石斛营养液配方及其应用。该营养液以体积比含有如下组分：Knudson？C培养基大量元素70-75%、微量元素8-15%；200mg/mL生长激素NAA？0.75-1.25%、质量分数0.6-0.7%的多菌灵抗菌剂15-20%。本发明通过对移栽前试管苗进行浸根处理，在移栽后每天喷雾水1次，每周喷石斛营养液1次，以促进栽培苗速生优质。本发明解决了试管苗移栽成活率低和生长缓慢两大难题，既提高了石斛试管苗移栽成活率，又促进石斛栽培苗速生、高产、稳产、优质，为建立石斛人工大面积栽培基地，实现石斛产业化生产提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN103604877A
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201310526400.1
申请日：2013-10-29
Applicant: 安徽农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明公开了一种石斛生物碱类成分指纹图谱测定方法，是通过恒温水浴回流萃取技术，利用氨水浸渍石斛粉末，再经氯仿萃取，过滤浓缩干燥得石斛总生物碱粗品，粗品用甲醇溶解得储备液用于高效液相色谱分析，得到石斛生物碱类指纹图谱。本发明优点：所得色谱指纹图谱能较全面反映石斛所含生物碱类成分，体现石斛生物碱类的复杂性，能为不同品种石斛鉴别提供科学依据；所建立的HPLC指纹图谱具有较大的稳定性和重现性，该研究为石斛品种质量控制提供科学参考。
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公开(公告)号：CN103114097A
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201210525391.X
申请日：2012-12-07
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种β微管蛋白-8基因片段的构建获得方法，步骤包括：对棉花雄性花药的总DNA的提取，设计引物对靶序列进行PCR扩增，目的片段的回收；上述引物与靶序列间的Tm值在63.6~65.4℃，上述引物无发夹结构，上述引物内部链无二级结构。本发明的优点在于，提出了棉花核雄性不育系花药中高质量的总DNA提取方法以及β微管蛋白-8基因片段引物的设计，首次在棉花核雄性不育系中克隆了β微管蛋白-8基因片段，首次通过比较一个不育相关基因的片段在不育株与可育株中的DNA序列差异，从而进一步探讨其与不育性状的关系。
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公开(公告)号：CN109156359B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201811244722.6
申请日：2018-10-24
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明提供了一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法，步骤如下：(1)外植体的获取：来源两种，一种为叶龄在20～50d的砀山酥梨组培苗叶片；另一种，先利用梨种无菌播种，再采用无菌实生苗的叶片作为外植体；(2)外植体的预处理：在梨叶片中脉横切2～4个刀口，再置于预培养培养基暗培养；(3)不定芽的诱导及增殖：将叶片接种至诱导培养基上暗培养，再转至光周期培养室诱导不定芽；剪下不定芽，接种至增殖培养基。本发明首次建立了遗传稳定的砀山酥梨叶片直接再生体系，叶片再生率达78.6％，平均每叶产生不定芽数3.8，褐化率0；此方法不仅可由梨叶片器官直接产生大量不定芽，还具有遗传稳定、周期短、成本低等优势。
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公开(公告)号：CN107815459B
公开(公告)日：2021-06-18
申请号：CN201711276928.2
申请日：2017-12-06
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种糙皮侧耳锰过氧化物酶基因，包括糙皮侧耳gpd启动子，其DNA序列如SEQ ID NO:1所示,所述糙皮侧耳锰过氧化物酶基因包括mnp6和vp3基因，其DNA序列分别如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:4所示，mnp6的蛋白质氨基酸序列如Seq ID NO：3所示，vp3的蛋白质氨基酸序列如Seq ID NO：5所示。本发明将成功转化的过表达菌株接种到棉花固体培养基上培养30d，测定木质素含量，结果发现Pomnp6和Povp3过表达菌株的木质素降解率较未转化菌株分别提高了8.62％和7.46％。
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公开(公告)号：CN109207493A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201811170973.4
申请日：2018-10-09
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域，提供了一种梨漆酶基因PbLAC1，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体，所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD-18T-PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞，所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据，对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义，同时，还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。
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公开(公告)号：CN108344814A
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201810063847.2
申请日：2018-01-23
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明提供了一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法，首先，采用高效液相色谱法测定待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度和5-羟基松柏醇的吸光度，其中，检测波长为243nm；所述高效液相色谱法采用梯度洗脱，所述梯度洗脱中洗脱剂包括甲醇和水；然后根据5-羟基松柏醛的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度，得到所述待测样品中5-羟基松柏醛的浓度；根据5-羟基松柏醇的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醇的吸光度，得到所述待测样品中5-羟基松柏醇的浓度。本发明提供的方法能够有效地分离5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇，而且能够分别检测5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的浓度。
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