一种茶树组培再生体系建立的方法

    公开(公告)号:CN102726296A

    公开(公告)日:2012-10-17

    申请号:CN201210227942.4

    申请日:2012-07-04

    Abstract: 本发明涉及一种茶树组培再生体系建立的方法。具体操作步骤如下:1.愈伤组织的诱导,2.愈伤组织的继代和增殖,3.不定芽的诱导,4.不定芽的增殖,5.壮苗,6生根和移栽。本发明具有两步增殖阶段,即愈伤组织增殖和不定芽增殖。愈伤组织增殖方式,具有增殖方式简单、遗传稳定的特点,实验发现在继代4年后,细胞的活力和分化能力没有明显变化;而且愈伤组织由于酚类物质含量较低,可以成为遗传转化的对象。因此本技术为茶树遗传转化体系的建立奠定了坚实的实验基础。

    茶树儿茶素组织细胞化学定位方法

    公开(公告)号:CN101482520A

    公开(公告)日:2009-07-15

    申请号:CN200910116108.6

    申请日:2009-01-21

    Abstract: 本发明涉及茶树儿茶素组织细胞化学定位方法,解决了现有酚类组织化学定位技术中染色显色特异性差、显色速度慢、灵敏度不高,无法进行茶树儿茶素组织细胞化学定位的问题。本发明包括下述操作步骤:取幼嫩的茶树的鲜叶或嫩茎或根尖或茶愈伤组织;制成切片;用滴管从组织切片的侧面滴加1%~3%(w/v)香草醛浓盐酸溶液,从组织切片的另一侧用滤纸吸取溶液,直至到材料完全变红;用滤纸吸取多余的香草醛浓盐酸溶液,并用吹风机吹干切片表面,得染色切片;染色后30分钟内,对染色切片显微拍照,记录染色切片染色后形态。本发明染色过程简单,操作方便;与常用的三氯化铁等酚类物质的显色剂相比较,香草醛酸性溶液染色剂显色速度快,灵敏度高,特异性好;不仅能对茶组织器官儿茶素定位,还可以对茶细胞器儿茶素精确定位。

    一种协同催化茶树酯型儿茶素生物合成的基因组合及其应用

    公开(公告)号:CN113528552A

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110748006.7

    申请日:2021-07-01

    Abstract: 本发明公开了一种协同催化茶树酯型儿茶素生物合成的基因组合及其应用,属于分子生物学及代谢工程学技术领域,包括基因CsSCPL4和基因CsSCPL5,所述基因CsSCPL4和基因CsSCPL5具有如下序列中任意一种:(1)如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列;(2)具有(1)的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。本发明首次从茶树中克隆并验证了催化酯型儿茶素生物合成的基因CsSCPL4和CsSCPL5的功能,还提供了含有CsSCPL4和CsSCPL5基因的表达盒、载体组合、转基因工程农杆菌、转基因稳定共表达烟草和共表达重组蛋白。

    一种儿茶素中间体的生物合成及检测方法

    公开(公告)号:CN108410886B

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN201810165607.3

    申请日:2018-02-28

    Abstract: 本发明公开了一种儿茶素中间体合成及检测方法,包括从茶树中克隆得到CsANRa基因,构建双元表达载体后,利用转化到植物体内获得转基因植株,然后以80%甲醇与盐酸的混合溶液为提取液,对转基因植株中黄烷‑3‑醇中间体等多酚类物质进行提取,获得儿茶素中间体,最后通过UPLC‑QQQ‑MS/MS对儿茶素中间体产物进行定性和定量鉴定。与现有技术相比,本发明方法操作简单,所用的有机溶剂价格低廉,成本低;通过本方法获得的儿茶素中间体中不含儿茶素,相对比较单一,适合用来制备纯度较高的儿茶素中间体,这也是首次报道的儿茶素中间体合成和检测方法。

    一种儿茶素中间体的生物合成及检测方法

    公开(公告)号:CN108410886A

    公开(公告)日:2018-08-17

    申请号:CN201810165607.3

    申请日:2018-02-28

    Abstract: 本发明公开了一种儿茶素中间体合成及检测方法,包括从茶树中克隆得到CsANRa基因,构建双元表达载体后,利用转化到植物体内获得转基因植株,然后以80%甲醇与盐酸的混合溶液为提取液,对转基因植株中黄烷-3-醇中间体等多酚类物质进行提取,获得儿茶素中间体,最后通过UPLC-QQQ-MS/MS对儿茶素中间体产物进行定性和定量鉴定。与现有技术相比,本发明方法操作简单,所用的有机溶剂价格低廉,成本低;通过本方法获得的儿茶素中间体中不含儿茶素,相对比较单一,适合用来制备纯度较高的儿茶素中间体,这也是首次报道的儿茶素中间体合成和检测方法。

    一种高纯度矢车菊色素的制备方法

    公开(公告)号:CN102746266A

    公开(公告)日:2012-10-24

    申请号:CN201210242158.0

    申请日:2012-07-13

    Abstract: 本发明涉及一种高纯度矢车菊色素的制备方法。该方法的具体操作步骤如下:1.原花青素的提取,用新鲜的茶树根制得原花青素溶液;2.原花青素溶液纯化,制得原花青素粗品溶液;3.由原花青素粗品溶液制取矢车菊色素甲醇液;4.矢车菊色素的纯化,得矢车菊色素溶液;5.将矢车菊色素溶液旋转蒸发等处理,获得纯度大于98%的矢车菊色素粉末;矢车菊色素粉末呈胭脂红,难溶于水,易溶于甲醇溶液。本发明方法操作简单,不需要大型昂贵实验仪器,所用有机溶剂价格低廉,且可回收使用,成本低;本方法能有效去除提取物中的糖、蛋白、其他类型花色苷及黄酮类化合物,适合得到高纯度矢车菊产品。

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