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公开(公告)号：CN102174639B
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201110046171.4
申请日：2011-02-25
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/25
Abstract: 本发明涉及一种酯型儿茶素合成酶的活性检测方法。本发明包括：酶液的制备、反应液制备、对照液制备、酶活性的检测、酶活力的计算五个步骤。其中利用高效液相色谱法检测酶反应产物酯型儿茶素来检测酶活性，在反应体系中加入抗氧化剂和水解酶抑制剂可以避免氧化酶和酯型儿茶素水解酶对酶活性检测的干扰。本发明方法简单，准确性强、灵敏度高，能够准确检测到酯型儿茶素合成酶反应产物；操作方便，检测时间短，避免了繁琐的实验操作，检测时间在2-3小时即可完成。
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公开(公告)号：CN102174642A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110046144.7
申请日：2011-02-25
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/44
Abstract: 本发明涉及茶树酯型儿茶素水解酶的酶活性检测方法。该检测方法包括如操作步骤：1、用茶树鲜叶制备酶液，2、用酶液制备反应液和对照液，3、用反应液和对照液分别制备反应甲醇液和对照甲醇液，4、采用高效液相色谱技术（HPLC）分别检测反应甲醇液和对照甲醇液中的非酯型儿茶素。本发明的检测方法简单，不需要纯化酶提取液；检测结果准确性强、灵敏度高，能够准确检测到酯型儿茶素水解酶反应产物，证明检测到茶鲜叶中的酯型儿茶素水解酶酶活；操作方便，检测时间短，在1-2小时即可完成检测，避免了繁琐的实验操作。
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公开(公告)号：CN101519343B
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN200910116109.0
申请日：2009-01-21
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C07C39/21 , C07C37/055
Abstract: 本发明涉及反式白藜芦醇苷水解制备反式白藜芦醇的方法，解决了现有酶法处理所需时间较长、单纯的酸水解的反式白藜芦醇苷转化率很低的问题。本发明水解转化体系的配方为90％纯度的反式白藜芦醇苷∶甲醇∶12％盐酸溶液为4∶2∶2；按上述配方，将90％纯度的反式白藜芦醇苷溶解于甲醇中，充分溶解后，加入12％盐酸溶液；在温度55-75℃条件下，水解反应1-3h；水解体系经过硅胶板的薄层层析，并取得刮下物；将刮下物用3ml甲醇溶解，并超声清洗震荡，分离，冻干上清液即得白色粉末状的反式白藜芦醇。与现有的酶法技术相比，转化率高为45％，水解时间短为1-3小时。本发明方法操作简单；由于甲醇是可以再回收利用的，因此生产成本低，易于实现工业化生产。
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公开(公告)号：CN101482500B
公开(公告)日：2010-08-18
申请号：CN200910116179.6
申请日：2009-02-06
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及茶树中二氢黄烷醇4-还原酶/无色花青素还原酶和花青素还原酶的快速检测方法，解决了公知技术中酶活性检测方法操作烦琐、成本高、检测时间长的问题。本发明方法包括酶提取液制备、酶提取液中蛋白质含量的测定和酶活性的测定三个步骤，其中利用检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸溶液(NADPH)的消耗来检测酶活性，在反应体系中加入维生素C可以降低底物DHM和CYA对酶活性检测的干扰。本发明方法简单，成本低，检测时间15-25分钟即可完成；采用紫外分光光度计即可进行活性测定；环保安全，不需要使用有毒的有机溶剂；测定的准确性较高，可以对酶活性的变化进行连续检测，增加了测定的准确性。
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公开(公告)号：CN101498703A
公开(公告)日：2009-08-05
申请号：CN200910116195.5
申请日：2009-02-12
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及茶树含不同儿茶素含量及组分的细胞系筛选方法，解决了筛选技术中茶树愈伤组织或细胞系中儿茶素含量及组分检测所需时间较长，操作复杂的问题。本发明包括茶愈伤组织诱导与继代、含不同儿茶素含量的愈伤组织筛选、含不同儿茶素含量的细胞系筛选、含不同儿茶素组分的细胞系筛选4道操作步骤。本发明实现了含不同儿茶素含量或组分的细胞系的筛选；能在5－10分钟的短时间内显示愈伤组织的儿茶素含量的差异，因此其最大优点是可以在转接继代的操作过程中同时进行儿茶素检测；茶树细胞系儿茶素组分的薄层层析鉴定，可一次分析多个样品，另外，薄层层析鉴定还可以发现新的成分，从而加快了含不同儿茶素含量和含不同儿茶素组分的细胞系的筛选速度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116790562B
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202310780656.9
申请日：2023-06-28
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明属于酶合成技术领域，涉及一种水解单宁合成酶和编码基因及其应用。本发明提供了一种水解单宁合成酶，所述水解单宁合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述水解单宁合成酶能够实现水解单宁的合成，即CoSCPL3重组酶可以有效催化βG至PGG的四步反应。
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公开(公告)号：CN114410665B
公开(公告)日：2024-01-16
申请号：CN202111610349.3
申请日：2021-12-27
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了高效催化没食子酸甲酯生物合成的基因及其应用，属于分子生物学及代谢工程学技术领域，基因为植物TA家族类基因，TA家族类基因为如下序列中任意一种：(1)如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的CsTA基因或如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的MrTA基因；(2)具有(1)的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。本发明提供了催化没食子酸甲酯生物合成的基因CsTA与MrTA，从茶树的杨梅中克隆并验(3)与(1)、(2)其中任一条的核苷酸序列具有
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公开(公告)号：CN105671059B
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201610225282.4
申请日：2016-04-11
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种紫芽茶树R2R3‑MYB(CsMYB6A)基因克隆及载体构建方法以及应用，具体涉及一种紫芽茶树DNA片段的分离、克隆、功能验证及应用，该基因调控花青素合成，能够改变植物叶片的颜色，提高植物花青色的含量，将该基因转化到烟草中，能使转基因烟草叶片变红，花青素含量明显增加。
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公开(公告)号：CN105002193B
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201510253488.3
申请日：2015-05-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种黄酮醇3‑O‑葡萄糖基转移酶CsUGT78A14基因，该基因从茶叶鲜叶中分离获得，具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，该基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；本发明首次克隆并验证了形成茶饮料柔和涩味相关的黄酮醇3‑O‑葡萄糖基转移酶基因CsUGT78A14功能，本发明还提供了含有CsUGT78A14基因的重组质粒、转基因工程菌和重组蛋白，为开发具有改善茶叶滋味的酶类或工程微生物，深化茶饮料加工，开发不同滋味茶饮品，奠定了坚实基础。
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公开(公告)号：CN104878025B
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201510297824.4
申请日：2015-06-01
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种没食子酰葡萄糖基转移酶CsUGT84A22基因，所述CsUGT84A22基因具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，所述基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；与现有技术相比，本发明首次克隆并验证了形成1‑O‑没食子酰‑β‑D‑葡糖苷相关的尿苷二磷酸葡萄糖依赖的没食子酰葡萄糖基转移酶CsUGT84A22基因的功能，并提供了含有该CsUGT84A22基因的重组质粒、转基因工程菌和重组蛋白，为通过生物工程方法大量合成1‑O‑没食子酰‑β‑D‑葡糖苷，进一步开展酯型儿茶素生物合成调控研究奠定基础。
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