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公开(公告)号:CN116590241A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310089247.4
申请日:2023-02-06
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体公开了一种E基因突变的重组鸭坦布苏病毒及其制备方法、疫苗。本发明制备了突变质粒E DⅠD37N R166K,进而构建了E基因突变的重组鸭坦布苏病毒株rDTMUV E DⅠD37N R166K。该毒株可为后续抗鸭坦布苏病毒的药物、疫苗的制备提供了良好的平台。
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公开(公告)号:CN118834294A
公开(公告)日:2024-10-25
申请号:CN202411075423.X
申请日:2024-08-07
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备方法,将经过优化的DTMUV NS1基因与载体连接构成重组质粒;所述DTMUV NS1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;将重组质粒转化进入BL21(DE3)感受态细胞,并收获DTMUV NS1蛋白;将DTMUV NS1蛋白纯化并免疫小鼠,采集小鼠脾细胞;将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0混合培养,筛选分泌NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞;将杂交瘤细胞注射进入小鼠体内,获得NS1蛋白单克隆抗体。该方法制备得到的NS1蛋白单克隆抗体效价较高,可达1:512,000,并且可以用于病毒诊断,如WB,IFA,具有精准高效的特点,日后可以应用于试剂盒检测,药物制备的方面,为坦布苏病毒的机制研究,疾病诊断及防控奠定基础。同时,本发明还提供了基于该方法制备得到的NS1蛋白单克隆抗体的应用和检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN117925542A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202410082281.3
申请日:2024-01-19
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , C12N15/50 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒,所述表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒通过引物组对载有S1蛋白基因的质粒Fused pFastBac1‑C‑S1EGFP的扩增,得到携带同源臂的S1蛋白基因,再将携带同源臂的S1蛋白基因插入穿梭质粒,得到载有携带同源臂的S1蛋白基因的重组穿梭质粒,随后将载有携带同源臂的S1蛋白基因的重组穿梭质粒与腺病毒同源重组、转染,得到表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒,此外,本申请还公开了一种表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒的制备方法以及表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒的应用。
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公开(公告)号:CN117683941A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311710638.X
申请日:2023-12-13
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种IBDV实时荧光定量PCR检测体系,包含引物组和探针,所述引物组包括IBDV‑VP4‑F和IBDV‑VP4‑R,所述探针为Taqman1探针,本申请通过对大量的引物组和探针的不断筛选,最终得到了一种具有高灵敏度、高特异性的引物组和探针,并使用该引物组和探针建立了一种具有高灵敏度、高特异性的IBDV实时荧光定量PCR检测体系,此外,本申请还公开了一种IBDV实时荧光定量PCR检测体系的构建方法。
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公开(公告)号:CN117487962A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311225243.0
申请日:2023-09-21
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术生产技术领域,公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAd V‑11三重荧光定量PCR检测的引物组和探针,本申请通过软件Primer Premier5设计得到多组针对FAdV‑4、FAdV‑8b、FAdV‑11的引物和探针,并且通过反复多次的筛选,得到了三组兼具良好的特异性、灵敏度且又不产生相互干扰的引物及探针,并且根据矩阵法,确定FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的最佳反应体系和反应条件,得到了一种具有良好特异性、灵敏度的FAdV‑4/FAd V‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR检测试剂盒,同时,该试剂盒由于各引物和探针之间不会相互干扰,极大程度地降低了错检、漏检等现象的发生,此外,本申请还公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的构建方法。
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公开(公告)号:CN117430675A
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202311271956.0
申请日:2023-09-27
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒的抗原及其制备方法、试剂盒,涉及生物工程技术领域。本发明利用能够稳定表达重组鸡传染性支气管炎病毒核蛋白(N蛋白)的重组菌,在特定条件下诱导表达重组N蛋白并经亲和层析纯化。用纯化出的重组蛋白作为包被抗原,建立了一种简便、特异的间接ELISA方法。本发明还为检测鸡传染性支气管炎病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒。
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公开(公告)号:CN116064668A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211408464.7
申请日:2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,其公开了一种重组腺病毒质粒,其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能,将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现2个蛋白的表达,以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白,其病毒滴度高。同时,本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号:CN119286931A
公开(公告)日:2025-01-10
申请号:CN202411223001.2
申请日:2024-09-03
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N15/86 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/65 , C12N15/69 , C12N15/40 , C12N15/50 , C12N15/45 , A61K39/17 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种基于塞姆利基森林病毒复制子的高效表达系统的构建方法及应用,该方法包括:构建表达报告基因的saRNA系统;构建得到taRNA系统中复制酶提供质粒;构建得到taRNA系统中抗原提供质粒;将pSFV‑CMV‑T7‑X、pSFV‑CMV‑T7‑TR‑X和pSFV‑CMV‑T7‑replicase分别线性化后进行体外转录制备mRNA;将制备的mRNA以一定的比例转染至宿主真核细胞中表达,得到抗原蛋白;对抗原蛋白检测,以评估基于SFV复制子的saRNA和taRNA系统的表达效率。本发明提供的基于病毒复制子的自扩增DNA和RNA疫苗不仅能缩短开发周期,且能够高水平表达疫苗抗原。
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公开(公告)号:CN118421698A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410389072.3
申请日:2024-04-01
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及蛋白表达与细胞重组技术领域,公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的构建,该方案先将pXJ40质粒中原有的氨苄抗性基因删除并替换成新霉素‑卡那霉素抗性基因,得到真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR,再对IBV S1基因进行密码子优化,得到密码子优化后的IBV S1基因,随后将密码子优化后的IBV S1基因、IRES2、EGFP插入步骤1制得的真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR中,得到重组质粒pXJ40‑S1,最后将重组质粒pXJ40‑S1转染至CHO细胞中,得到表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系,此外,本申请还公开了上述鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的应用。
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公开(公告)号:CN116064668B
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202211408464.7
申请日:2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,其公开了一种重组腺病毒质粒,其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能,将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现2个蛋白的表达,以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白,其病毒滴度高。同时,本发明还公开了该质粒的制备方法。
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