公开(公告)号：CN118834294A

公开(公告)日：2024-10-25

申请号：CN202411075423.X

申请日：2024-08-07

Applicant: 华南农业大学 ,  岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心

Inventor： 冯海霞 ,  杨泽坤 ,  王琼洁 ,  陈思璇 ,  李佳慧 ,  徐飞 ,  韩银 ,  陈瑞爱

IPC: C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备方法，将经过优化的DTMUV NS1基因与载体连接构成重组质粒；所述DTMUV NS1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；将重组质粒转化进入BL21(DE3)感受态细胞，并收获DTMUV NS1蛋白；将DTMUV NS1蛋白纯化并免疫小鼠，采集小鼠脾细胞；将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0混合培养，筛选分泌NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞注射进入小鼠体内，获得NS1蛋白单克隆抗体。该方法制备得到的NS1蛋白单克隆抗体效价较高，可达1:512,000，并且可以用于病毒诊断，如WB，IFA，具有精准高效的特点，日后可以应用于试剂盒检测，药物制备的方面，为坦布苏病毒的机制研究，疾病诊断及防控奠定基础。同时，本发明还提供了基于该方法制备得到的NS1蛋白单克隆抗体的应用和检测试剂盒。