公开(公告)号：CN110129315A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910460240.2

申请日：2019-05-30

Applicant: 北华大学

Inventor： 孙丽媛 ,  陈思秀 ,  刘玟妍 ,  艾金霞 ,  李明成 ,  赵云冬 ,  王艳双 ,  高丽君 ,  王雪松 ,  段思琪 ,  李盈诺 ,  王天添

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法。本方法使用DNA纯化柱代替酚、氯仿等有毒的有机溶剂，并经过数次优化，确定了提取阿胶中驴源性基因组DNA的最适条件，有效去除阿胶中的蛋白质成分，最高效率的从深加工的阿胶及阿胶制品中提取出严重降解的DNA。本方法所需试剂安全无毒害，操作简单、省时，可在90min内完成阿胶基因组DNA提取，经聚合酶链式反应、2％琼脂糖凝胶电泳后在78bp处出现特异性条带，克隆测序比对后，与GenBank中已登记的驴物种相似性为100％。本方法提取的DNA纯度高、浓度大，解决了阿胶及阿胶制品DNA难以提取的问题，为分子生物学鉴定提供了关键的技术支持。

公开(公告)号：CN108977552A

公开(公告)日：2018-12-11

申请号：CN201810922068.3

申请日：2018-08-14

Applicant: 北华大学

Inventor： 艾金霞 ,  孙丽媛 ,  高丽君 ,  李明成 ,  周亭亭 ,  王艳双 ,  张丽华 ,  段思琪 ,  刘玟妍

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明涉及一种食用肉类鉴别阳性对照品及其制备办法和应用，属于PCR鉴别技术领域。该对照品的制备方法包括以下步骤：S1扩增：取经确证的牛、羊、猪、鸡、鸭和驴肉中的至少一种，分别用对应的引物对进行PCR扩增，以琼脂糖凝胶电泳分析扩增结果，分别回收特异性DNA条带；S2纯化：上述特异性DNA条带以吸附柱进行纯化；S3连接：纯化DNA产物与载体进行连接；S4转化：连接产物分别转化至大肠杆菌感受态细胞，获得转化细菌；S5培养：转化细菌涂板培养后进行阳性克隆菌落的筛选，挑取阳性菌落进行扩增，即得阳性对照品。上述食用肉类鉴别阳性对照品与常规肉类鉴别时采用的经鉴定阳性对照品相比，具有DNA信息明确、稳定、便于保存的优点，可作为标准物质使用。

公开(公告)号：CN105238856A

公开(公告)日：2016-01-13

申请号：CN201510602330.2

申请日：2015-09-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 艾金霞 ,  李明成 ,  王雪松 ,  张丽华 ,  王冰梅 ,  高丽君 ,  李萧涵 ,  李梓僮

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/16 ,  C12Q2565/125 ,  C12Q2545/113

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种鹿胎DNA鉴定试剂盒及鉴定方法。一种鹿胎DNA检测试剂盒包括线粒体DNA提取体系，PCR反应体系，结果观察体系三部分组成。一种鹿胎DNA鉴定方法，包括检测样本前处理，线粒体DNA提取，PCR引物设计与合成，建立PCR反应，结果判定五步。判断标准为出现563bp条带为正品鹿胎，只出现多条或不出现均为伪品鹿胎本发明建立的PCR鉴定方法具有简便、快速、检测结果可靠等优点，能够准确同时区别鉴别鹿胎和伪品的特异性。