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公开(公告)号：CN103076450A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201210571988.8
申请日：2012-12-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/544
Abstract: 本发明公开了一种检测副猪嗜血杆菌病抗体的试纸条及其制备方法，试纸条由PVC衬板、硝酸纤维素膜、吸收垫、金标垫及样品垫，PVC衬板设置在最底部，同时PVC衬板上部中段设置有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上部左端设置有吸收垫，硝酸纤维素膜上部右端设置有金标垫，金标垫上部右端设置有样品垫，硝酸纤维素膜左端喷有抗副猪嗜血杆菌IgG作为质控线，硝酸纤维素膜右端喷有纯化复性的His-OppA融合蛋白作为检测线，金标垫上喷有胶体金标记的纯化复性的His-OppA融合蛋白，该试纸条根据检测线和质控线是否出现色带来确定血清中是否存在副猪嗜血杆菌病的抗体，可检测所有血清型副猪嗜血杆菌感染产生的抗体，检测简便、快速。
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公开(公告)号：CN119552903A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411487655.6
申请日：2024-10-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于但不限于基因工程技术技术领域，公开了一种布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株的构建方法及应用，利用同源重组及SacB反向筛选技术构建BspE基因缺失株，以牛种布鲁氏菌A19疫苗株菌液为模板，PCR扩增得到BspE基因上、下游同源臂，将胶回收的BspE基因上、下游同源臂进行融合PCR扩增，将获得的融合片段与pUC19‑SacB质粒进行连接、转化，获得重组质粒pUC19‑ΔBspE。将该质粒电转化至牛种布鲁氏菌A19感受态细胞，经卡那抗性及蔗糖压力筛选，PCR鉴定及测序，所得阳性转化子即为牛种布鲁氏菌BspE缺失株，该缺失疫苗毒株提高了抗菌细胞因子及特异性布鲁氏菌抗体IgG的水平，是一种新型的布鲁氏菌候选减毒疫苗毒株，具有较好的市场前景。
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公开(公告)号：CN118581113A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410767292.5
申请日：2024-06-14
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及生物领域，特别是涉及一种牛种布鲁氏菌arsR2基因缺失菌株构建方法及其应用。本发明提出了一个与布鲁氏菌毒力相关的arsR2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。实验证明arsR2基因缺失不影响布鲁氏菌的生长。与亲本株和回补株相比，布鲁氏菌株ΔarsR2在RAW264.7细胞中存在极显著减少现象。感染小鼠3周后，布鲁氏菌株ΔarsR2感染小鼠脾重与亲本株和回补株相比呈现显著降低的趋势。本发明还提供一株减毒的布鲁氏菌ΔarsR2，能够用于制备布鲁氏菌减毒活疫苗。本发明为布鲁氏菌新疫苗的研发提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN116536284B
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202310461674.0
申请日：2023-04-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N9/10 , C12N15/70 , C12N5/20 , C07K16/40 , C07K16/12 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于血清学检测技术领域，公开了一种MccppdhC单克隆抗体、杂交瘤细胞株及试剂盒，尤其涉及一种MccppdhC重组蛋白、特异性识别山羊支原体山羊肺炎亚种pdhC的单克隆抗体、分泌特异性识别MccppdhC单克隆抗体的杂交瘤细胞株Mccp‑H6以及利用MccppdhC重组蛋白和特异性识别Mccp pdhC的单克隆抗体制备的检测Mccp抗体的竞争ELISA试剂盒。本发明的Mccp pdhC单克隆抗体与山羊支原体山羊亚种、丝状支原体山羊亚种、绵羊肺炎支原体均不发生反应，保证反应特异性，比检测Mccp抗体的间接血凝试剂盒具有更高的特异性和敏感性，避免样本来源的种属限制。
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公开(公告)号：CN116536284A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310461674.0
申请日：2023-04-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N9/10 , C12N15/70 , C12N5/20 , C07K16/40 , C07K16/12 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于血清学检测技术领域，公开了一种MccppdhC单克隆抗体、杂交瘤细胞株及试剂盒，尤其涉及一种MccppdhC重组蛋白、特异性识别山羊支原体山羊肺炎亚种pdhC的单克隆抗体、分泌特异性识别MccppdhC单克隆抗体的杂交瘤细胞株Mccp‑H6以及利用MccppdhC重组蛋白和特异性识别Mccp pdhC的单克隆抗体制备的检测Mccp抗体的竞争ELISA试剂盒。本发明的Mccp pdhC单克隆抗体与山羊支原体山羊亚种、丝状支原体山羊亚种、绵羊肺炎支原体均不发生反应，保证反应特异性，比检测Mccp抗体的间接血凝试剂盒具有更高的特异性和敏感性，避免样本来源的种属限制。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109680080B
公开(公告)日：2023-01-03
申请号：CN201811514580.0
申请日：2018-12-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12R1/35
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体的nfo‑RPA检测方法及检测试剂盒。本发明通过以牛支原体的P80基因序列为模板，从P80基因克隆出包含R1序列的M.b序列，以该R1序列为目标设计探针M.b‑specific‑Probe；其中，所述M.b序列如SEQ ID NO：1所示。相应的，本发明的检测试剂盒，其成分除了商品化的Freeze‑dried reaction，280mM MgAc，Rehydration buffer，Test device和PCRD Extraction buffer外，主要包括特别设计的牛支原体特异性的引物、探针及配套试剂：M.b‑specific‑Forward，M.b‑specific‑Reverse，M.b‑specific‑Probe，Nuclease‑free water，阳性对照模板。本发明除了用于实验室常规检测牛支原体核酸外，特别适用于无实验室条件下(如基层兽医部门、养殖场等)的现场检测，具有高特异性和灵敏性，是一种快速、准确的牛支原体核酸检测试剂盒，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112760392B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202011284368.7
申请日：2020-11-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于检测绵羊肺炎支原体的特异性PCR引物，本发明首先通过对绵羊肺炎支原体基因测序和对比，筛选到用于检测绵羊肺炎支原体的靶序列，其基因序列如SEQ ID NO.1所示，然后设计了检测其特异性PCR引物，可将Mo与Mccp、Mmc、精氨酸支原体以及常见反刍动物支原体、细菌区分开，显示出良好的特异性，可作为新诊断靶标，以此为基础建立更具临床实用性的Mo诊断技术。
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公开(公告)号：CN106591177B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201611070622.7
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种山羊支原体山羊肺炎亚种低血清高效培养基，含有以下组分：PPLO肉汤、丙酮酸钠、乳糖、胰蛋白胨、新鲜酵母浸出液、L‑谷氨酰胺、L‑半胱氨酸、水解乳蛋白、马血清、青霉素、酚红、去离子水；并提供了其制备方法。本发明的有益效果为：本发明提供的山羊支原体山羊肺炎亚种培养基血清含量仅为5%，仅为现有技术培养基血清量的1/5～1/4；此外，用本发明方法制备的半成品菌液滴度达1010 CCU/ml，明显高于现有技术培养基。本发明低血清高效培养基培养山羊支原体山羊肺炎亚种，既有利于减轻异源血清对羊体的过敏应激反应，提高生物安全，又提高了活菌滴度，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN106635865A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201610689925.0
申请日：2016-08-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基，每1000ml培养基中包括有以下组分：PPLO肉汤10.5 g、脑心浸出液8.0 g、氯化钠4.0 g、硫酸镁0.05 g、氯化钾0.2 g、氯化钙0.09 g、磷酸氢二钠0.024 g、磷酸二氢钾0.03 g、葡萄糖5.0 g、水解乳蛋白5.0 g、25%新鲜酵母浸出液60 ml、无菌猪血清100 ml、无菌马血清100 ml、氨苄青霉素100 mg、10%醋酸铊1 ml；并提供了其制备方法及应用。本发明的有益效果为：本发明提供的一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基及其制备方法和应用，与现有技术相比，具有生长迅速和滴度高的特点，分离出牛鼻支原体的成功率高。
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公开(公告)号：CN106479936A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201611071307.6
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12N1/20
Abstract: 本发明公开了一种绵羊肺炎支原体低血清培养基，含有以下组分：PPLO肉汤、丙酮酸钠、酚红、去离子水、乳糖、胰蛋白胨、新鲜酵母浸出液、胰岛素、L-谷氨酰胺、L-半胱氨酸、水解乳蛋白、转铁蛋白、青霉素和少量马血清；并提供了其制备方法。本发明的有益效果为：本发明提供的绵羊肺炎支原体培养基血清含量仅为5%，是现有技术培养基血清含量的1/4；培养绵羊肺炎支原体活菌滴度达7×109 CCU/ml，明显高于现有技术培养基。与现有技术相比，本发明的绵羊肺炎支原体低血清培养基具有血清含量低、生长迅速和活菌滴度高的特点。
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