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公开(公告)号：CN110526960B
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN201810508832.2
申请日：2018-05-24
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一类抗病毒多肽及其制备方法与应用，所述抗病毒多肽含有如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.8所示的任意一种氨基酸序列，将所述抗病毒多肽基因转化至植物中具有显著的抗病毒效果，且对黄瓜花叶病毒、大麦条纹花叶病毒等多种病毒都具有较强的抗病毒作用。采用酵母表达系统制备所述抗病毒多肽，将表达多肽喷施至植物表面，植物的病毒侵染量显著降低。本发明提供的抗病毒多肽可以用于防治植物的多种病毒侵染，利用生物制剂在生产中进行植物保护，实现有效的植物免疫防御，从而减少农药使用，有效提高植物质量和产量，提高农作物的经济和社会效应。
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公开(公告)号：CN110468147B
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN201811243473.9
申请日：2018-10-24
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种基于大麦条纹花叶病毒的基因编辑载体系统。所述基因编辑载体系统包括分别含有大麦条纹花叶病毒RNAα、RNAβ和RNAγ的人造质粒；在RNAβ或RNAγ中，整合有所需的sgRNA序列。本发明基于大麦条纹花叶病毒的基因编辑载体系统可以对本生烟等双子叶植物和小麦、玉米等单子叶植物的基因组进行高效的基因编辑。
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公开(公告)号：CN110885363A
公开(公告)日：2020-03-17
申请号：CN201911302490.X
申请日：2019-12-17
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种丝瓜蚜传黄化病毒运动蛋白(SABYV-MP)表达纯化方法以及SABYV-MP多克隆抗血清的制备和检测试剂盒的构建，其中SABYV-MP表达纯化步骤为：(1)SABYV-MP基因的调取及扩增；(2)SABYV-MP基因原核表达载体构建；(3)His-tag-(SABYV-MP)融合蛋白的原核表达；(4)His-tag-(SABYV-MP)融合蛋白的纯化；(5)SABYV-MP蛋白的获得。采用本发明所述方法获得的SABYV-MP蛋白多克隆抗血清不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性较好，可实现丝瓜蚜传黄化病毒及其运动蛋白的准确检测，具有较大的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号：CN110468147A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201811243473.9
申请日：2018-10-24
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种基于大麦条纹花叶病毒的基因编辑载体系统。所述基因编辑载体系统包括分别含有大麦条纹花叶病毒RNAα、RNAβ和RNAγ的人造质粒；在RNAβ或RNAγ中，整合有所需的sgRNA序列。本发明基于大麦条纹花叶病毒的基因编辑载体系统可以对本生烟等双子叶植物和小麦、玉米等单子叶植物的基因组进行高效的基因编辑。
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公开(公告)号：CN110396503A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910660873.8
申请日：2019-07-22
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用桃蚜(Myzus persicae)获取马铃薯卷叶病毒属芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus，BrYV)的方法，具体步骤为：S1：获得携带芸薹黄化病毒的病毒转基因植株；S2：获得饲毒用无毒蚜虫；S3：用所述无毒桃蚜从含有病毒基因组的转基因植株和冷冻病叶中获得病毒；S4：检测获毒后所述桃蚜的传毒能力。采用本发明建立的芸薹黄化病毒等马铃薯卷叶属病毒获毒方法可以很好地克服采用患病植株饲毒桃蚜中存在的植株难以长期保存、占用空间、不便于运送和毒源易混杂等的技术瓶颈，拓宽了介体昆虫获毒及品种抗性鉴定等的简便性、快速性和可靠性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109609546A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201811547209.4
申请日：2018-12-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/83
Abstract: 本发明公开了一种植物多分体病毒载体的开发和应用。本发明提供了成套重组病毒载体，包括表达BN1的重组载体和表达BN2的重组载体；所述表达BN1的重组载体为将BNYVV基因组的RNA1全长CDNA序列替换双元表达载体的多克隆位点间的DNA片段得到的载体，表达BNYVV病毒的RNA1；所述表达BN2的重组载体为将BNYVV基因组的RNA2全长CDNA序列替换所述双元表达载体的多克隆位点间的DNA片段得到的载体，表达BNYVV病毒的RNA2。本发明采用的多分体病毒表达载体能在植物同一个细胞内同时表达多个蛋白；在植物体内表达量比较高，周期短，并且可以系统侵染。
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公开(公告)号：CN101748135A
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN201010033727.1
申请日：2010-01-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了利用烟草坏死病毒A(Tobacco necrosis virus A，TNV-A)作为外源基因的表达载体，通过基因替换或融合的方式将外源基因整合入TNV-A基因组中，外源蛋白可以伴随TNV-A在植物中的高效侵染和复制而得到高效表达。以替换β-葡糖醛酸酶基因(gus)为例，表明TNV-A可以作为外源蛋白高效表达载体；选择口蹄疫(foot-and-mouth disease virus，FMDV)结构蛋白VP1上的不同肽段融合入TNV-A外壳蛋白(coat protein，CP)中，表明TNV-A可以作为高效的外源表位肽展示载体，并且重组病毒(chimaeric virus)可以通过肌肉免疫和滴鼻免疫途径刺激动物产生特异性体液免疫反应和黏膜免疫反应。
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公开(公告)号：CN110396503B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN201910660873.8
申请日：2019-07-22
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用桃蚜(Myzus persicae)获取马铃薯卷叶病毒属芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus，BrYV)的方法，具体步骤为：S1：获得携带芸薹黄化病毒的病毒转基因植株；S2：获得饲毒用无毒蚜虫；S3：用所述无毒桃蚜从含有病毒基因组的转基因植株和冷冻病叶中获得病毒；S4：检测获毒后所述桃蚜的传毒能力。采用本发明建立的芸薹黄化病毒等马铃薯卷叶属病毒获毒方法可以很好地克服采用患病植株饲毒桃蚜中存在的植株难以长期保存、占用空间、不便于运送和毒源易混杂等的技术瓶颈，拓宽了介体昆虫获毒及品种抗性鉴定等的简便性、快速性和可靠性。
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公开(公告)号：CN110511955A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201810488090.1
申请日：2018-05-21
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种植物细胞质弹状病毒侵染性克隆、表达载体及其构建方法与应用。本发明所提供的植物细胞质弹状病毒表达载体为含有大麦黄条点花叶病毒(BYSMV)全基因组反向互补链的载体。本发明首次提供一种构建虫传植物病毒侵染性克隆的策略，即通过将前述表达载体与表达BYSMV的核衣壳(N)、磷蛋白(P)、大聚合酶蛋白(L)等病毒元件的载体经农杆菌介导在本生烟建立侵染性病毒，再利用本生烟发病汁液通过飞虱类昆虫接种单子叶植物并建立系统性侵染。不仅如此，本发明还进一步提供了所述植物细胞质弹状病毒表达载体在单子叶植物或飞虱类昆虫体内进行蛋白高效表达或者基因编辑等方面的广泛应用。
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公开(公告)号：CN103740670B
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201410014620.0
申请日：2014-01-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N9/10 , C07K16/40 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开了筛选草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的试剂盒。本发明提供了草甘膦N-乙酰转移酶在制备筛选抗草甘膦N-乙酰转移酶血清试剂盒中的应用；所述草甘膦N-乙酰转移酶的氨基酸序列为如下1）或2）：1）序列表中的序列2自N端第114-260位氨基酸残基；2）序列表中的序列2。本发明的实验证明，本发明首次利用原核表达蛋白制备草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的方法，成功地获得了GAT的抗血清，并且可以用于转基因植物目标蛋白的特异性检测。
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