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公开(公告)号:CN101948928A
公开(公告)日:2011-01-19
申请号:CN201010511965.9
申请日:2010-10-19
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的猪链球菌2型GDH基因的荧光定量PCR检测方法,根据猪链球菌的GDH基因的序列,设计一对特异性引物F1、R1和TaqMan探针,探针5′端标记的荧光报告基团为FAM,3′端标记的淬灭基团为Eclipse,扩增目的片断长度为81bp;将含有目的基因的片段克隆到pMD18-T载体中,转化到JM109感受态细胞,挑取阳性克隆鉴定;提取阳性质粒,用分光光度计测定OD260nm值,并将质粒浓度换算成拷贝数/μl,质粒标准品10倍梯度稀释作为模板,在荧光定量PCR仪上检测,得出标准曲线;采集猪血液并提取血液全基因组DNA,采用已建立的荧光定量PCR方法,根据标准曲线计算出待检样品中猪链球菌含量;本发明可以实时定量检测血液中细菌含量,灵敏度高、特异性强、重复性好,易于推广应用。
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公开(公告)号:CN101812518A
公开(公告)日:2010-08-25
申请号:CN201010119005.8
申请日:2010-03-08
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的猪链球菌毒力因子的多重PCR检测试剂盒及其检测方法;该试剂盒包含碱基序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:20所示的核酸;该试剂盒的检测方法包括如下步骤:步骤一,提供待测样品的DNA;步骤二,取试剂盒,采用常规PCR方法扩增待测样品的DNA,采用琼脂糖凝胶电泳法检测扩增结果,根据结果进行判定;所述判断具体为,以猪链球菌2型阳性DNA作为对照,若对照未扩增出全部条带,则重新检测;若对照扩增出全部条带,则进行结果判定。本发明所建立的多重PCR检测方法特异、灵敏,且具有简便快捷的优点;试剂盒稳定性可靠,能用于临床样品的快速检测及猪链球菌的分子流行病学调查研究。
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公开(公告)号:CN100430472C
公开(公告)日:2008-11-05
申请号:CN200510111519.8
申请日:2005-12-15
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明涉及一种犬类精液稀释液,属于动物繁殖技术领域。由N-乙酰基-D-葡萄糖胺0.01~0.10克、果糖和/或葡萄糖0.55~3.85克、柠檬酸0.85~2.50克、三羟甲基胺基甲烷1.10~3.90克、乙二胺四乙酸0.05~1.00克、杀菌剂1000UI/毫升,加蒸馏水至100毫升配制而成,稀释液pH值为6.15~6.95,渗透压为310~350mOsmo/L。本发明的稀释液能够有效延长低温或常温条件下犬类精子的存活时间,有利于维持犬类精子的质膜完整性及顶体完整性,提高犬类人工授精的受孕率。
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公开(公告)号:CN109107650A
公开(公告)日:2019-01-01
申请号:CN201810910091.0
申请日:2018-08-10
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明属于样本处理设备技术领域。传统猪病毒样本研磨处理装置的研磨效果差。针对现有技术中的问题,本发明公开了一种猪病毒样本的研磨处理装置,包括盛放槽、若干根弧形杆、圆块、转动轴、纺锤块、齿圈、若干个碾轮齿轮和弧形摩擦块,盛放槽顶部设有环形滑道,底部设有滤孔,各弧形杆的上端均与圆块相连,下端分别与环形滑道上的滑块相连;转动轴上端与圆块相连,下端与电机相连,齿圈与转动轴相连,各碾轮齿轮与齿圈啮合,纺锤块包括大圆锥台,大圆锥台的弧形面上铰接有若干个沿弧面周向均匀分布的碾轮,各碾轮由相应的碾轮齿轮带动转动,相邻碾轮表面相互贴合,弧形摩擦块由弧形杆带动转动,弧形摩擦块的内侧面与碾轮贴合。本发明研磨效果好。
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公开(公告)号:CN101701033B
公开(公告)日:2012-08-29
申请号:CN200910309580.1
申请日:2009-11-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K14/29 , C07K1/14 , C07K16/12 , G01N33/531
Abstract: 一种免疫技术领域的猪附红细胞体抗原、抗体、样品的制备方法,其中,抗原的制备方法,包括如下步骤:取感染附红细胞体的猪血,制备红细胞泥;PBS悬浮红细胞泥,水浴,离心,取上清;滤膜过滤上清,得滤液,之后超速离心得沉淀,PBS重悬,裂解,离心得上清,即猪附红细胞体抗原;抗体的制备方法,包括如下步骤:取猪附红细胞体抗原,制备血清;将血清与健康猪血红细胞泥混合,孵育,离心,取上清,纯化上清,得IgG抗体;样品的制备方法,包括如下步骤:取待检的猪血液,制备得红细胞泥;用预冷PBS洗涤红细胞泥,生理盐水悬浮,加Tris-Hcl裂解,超速离心,PBS悬浮沉淀,得样品。在本发明的基础上,可方便地应用双抗夹心ELISA法检测猪附红细胞体。
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公开(公告)号:CN102559927A
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201110440713.6
申请日:2011-12-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种犬星状病毒的半套式RT-PCR检测方法,包括如下步骤:1.以犬星状病毒基因的保守片段为靶目标设计引物,2.将检测样品处理后提取总RNA,3.将总RNA逆转录到cDNA,四、通过半套式RT-PCR方法检测样品中的犬星状病毒。本发明克服了传统技术中的不足之处,具有灵敏度高、特异性好、简便、快速等特点,适用于犬星状病毒的病原学诊断和流行病学研究。
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公开(公告)号:CN101392228A
公开(公告)日:2009-03-25
申请号:CN200810202320.X
申请日:2008-11-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种空肠弯曲杆菌的微需氧分离培养方法,采用普通烛缸法与焦性没食子酸法相结合的方法来创造微需氧环境,对空肠弯曲杆菌分离培养采用直接划线培养法,用接菌环挑取少量动物组织检测样品直接接种在选择培养基上,用烛缸法配合焦性没食子酸和无水碳酸钠混合物来降低空气中氧气的浓度,利用无水碳酸钠形成碱性环境,促使焦性没食子酸与氧气反应吸收氧气,使培养环境达到空肠弯曲杆菌培养所需的微需氧条件。挑取分离培养获得的典型菌落,做PCR鉴定,进一步确定为空肠弯曲杆菌。本发明具有成本低廉、操作简单、检出率高、培养效果好等优点,提高了空肠弯曲杆菌的分离培养效率,解决了微需氧条件培养空肠弯曲杆菌的难点。
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公开(公告)号:CN1970082A
公开(公告)日:2007-05-30
申请号:CN200610116631.5
申请日:2006-09-28
Applicant: 上海交通大学
IPC: A61K39/395 , A61P31/12
Abstract: 本发明涉及一种治疗仔猪断奶多系统衰竭综合症的自家高免血清制备方法,在经免疫学方法确诊仔猪断奶多系统衰竭综合症PMWS疫情的情况下,采用多重PCR技术检测脏器中主要病原体PCV2和协同感染病原PPV以及PRRSV病毒含量,选择病毒含量相对高的脏器作原料制备自家脏器苗,再按照一定的免疫程序,用灭活脏器苗对自家漏去势公猪进行多点注射强化免疫,用琼扩试验检测免疫猪的血清抗体水平,取用抗体水平高者的血液分离血清,经生物学安全检验后即可作为治疗用的高免血清。本发明以自家脏器苗免疫自家公猪制备的高免血清,可以在不扩散病原的前提下,对本场发生的PMWS猪进行治疗,以最大程度地降低发病率和死亡率,减少经济损失。
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公开(公告)号:CN1672552A
公开(公告)日:2005-09-28
申请号:CN200510025242.7
申请日:2005-04-21
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种属于食品加工技术领域的富硒低胆固醇健康蛋的生产方法,本发明具体步骤如下:(1)选择并添加有机硒源-富硒干酵母;(2)选择并添加共轭亚油酸;(3)中草药制剂的配制和添加;(4)将富硒干酵母、共轭亚油酸和中草药制剂三种粉末进行配合,混合均匀,配制富硒低胆固醇蛋生产专用预混剂;(5)添加上述富硒低胆固醇蛋生产专用预混剂,饲喂产蛋禽后收集禽蛋。本发明以较低的生产成本生产出不仅富硒富CLA,而且胆固醇含量明显降低的禽蛋,同时添加的中草药制剂能够促进硒和CLA的吸收和沉积,更有利于蛋禽和人类的健康。
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公开(公告)号:CN109107650B
公开(公告)日:2020-05-08
申请号:CN201810910091.0
申请日:2018-08-10
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明属于样本处理设备技术领域。传统猪病毒样本研磨处理装置的研磨效果差。针对现有技术中的问题,本发明公开了一种猪病毒样本的研磨处理装置,包括盛放槽、若干根弧形杆、圆块、转动轴、纺锤块、齿圈、若干个碾轮齿轮和弧形摩擦块,盛放槽顶部设有环形滑道,底部设有滤孔,各弧形杆的上端均与圆块相连,下端分别与环形滑道上的滑块相连;转动轴上端与圆块相连,下端与电机相连,齿圈与转动轴相连,各碾轮齿轮与齿圈啮合,纺锤块包括大圆锥台,大圆锥台的弧形面上铰接有若干个沿弧面周向均匀分布的碾轮,各碾轮由相应的碾轮齿轮带动转动,相邻碾轮表面相互贴合,弧形摩擦块由弧形杆带动转动,弧形摩擦块的内侧面与碾轮贴合。本发明研磨效果好。
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