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公开(公告)号：CN104878035A
公开(公告)日：2015-09-02
申请号：CN201510189018.5
申请日：2015-04-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产N-乙酰神经氨酸重组微生物的构建方法及应用。通过密码子优化、基因克隆等分子生物学技术分别构建了表达N-乙酰葡萄糖胺-2-异构酶基因和N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因的两株重组大肠杆菌。两株重组微生物经诱导培养、按一定比例混合后，能够高效的生产N-乙酰神经氨酸。以N-乙酰葡萄糖胺和丙酮酸钠为底物，以两株重组微生物作为全细胞为催化剂，经催化反应后N-乙酰神经氨酸产量可达260mM(80.5g/L)，最高底物转化率达43.3％。
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公开(公告)号：CN103014097A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210471187.4
申请日：2012-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种以淀粉为原料的麦芽三糖制备方法及其专用真菌α-淀粉酶，属于淀粉糖制造和酶工程技术领域。本发明以各种植物淀粉质为原料，利用真菌α-淀粉酶SfA进行液化和糖化，获得麦芽三糖占总糖比例46%-55%的糖浆；通过活性炭吸附和酒精洗脱获得麦芽三糖占总糖比例不低于90%的糖浆；本发明还提供真菌α-淀粉酶SfA的高效制备方法。真菌α-淀粉酶SfA基因来源于扣囊复膜孢酵母CICIMY2037，通过基因重组手段获得重组巴斯德毕赤酵母，用重组菌进行SfA的高效制备。用真菌α-淀粉酶SfA制备麦芽三糖的方法与现有的方法相比具有原料成本低、不依赖于淀粉液化酶和淀粉脱支酶以及工艺简单、易于放大的优点。
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公开(公告)号：CN101157931A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200710131859.6
申请日：2007-09-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 产甘油假丝酵母NAD+依赖－甘油3－磷酸脱氢酶基因及其克隆，属于微生物分子生物学领域。本发明涉及一种新的基因序列SEQID NO.1，采用简并引物PCR和反向PCR法从产甘油假丝酵母WL2002－5－59的基因组DNA中克隆出甘油合成的限速酶NAD+依赖－甘油3－磷酸脱氢酶基因及其侧翼的调控序列。该基因全长4900bp，在2082bp处具有起始密码子ATG，3246bp处具有终止密码子TAA。该序列无内含子，具有1167bp完整的开放阅读框，编码388个氨基酸。其与酿酒酵母GPD1基因同源性高达60％，与安格斯毕赤酵母GPD基因同源性高达70％。该基因的克隆扩大了微生物抗渗透压胁迫研究的基因资源，也为产甘油假丝酵母高产甘油的分子机理研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119709441A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202510016727.7
申请日：2025-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种产乳铁蛋白的重组里氏木霉及其应用，属于基因工程技术领域。本发明以里氏木霉CJ2095为出发菌株，在里氏木霉CJ2095中过表达了二硫键异构酶并且敲除了蛋白激活酶基因，得到的重组里氏木霉其乳铁蛋白产量达到了306.31mg/L。除此以外，本发明还对重组里氏木霉的发酵条件进行探究，在以微晶纤维素为碳源的培养基中重组里氏木霉能够高产乳铁蛋白，并且麸皮和吐温‑80的浓度均可以影响乳铁蛋白的产量。因此在以微晶纤维素为碳源且含有麸皮和吐温‑80的培养基中，本发明的重组里氏木霉能够发酵产生1349.5mg/L的乳铁蛋白。
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公开(公告)号：CN119530195A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411735771.5
申请日：2024-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐酸性的PET塑料降解酶PETase突变体及其应用，属于生物酶工程技术领域。本发明在野生型FAST‑PETase的基础上进行氨基酸序列截短、单点突变、两两复合突变，获得的突变体R84D降低了FAST‑PETase的最适反应pH，并提高了FAST‑PETase在不同pH下的稳定性。本发明构建的突变体相较于出发FAST‑PETase酶活力提高了2.2倍。在pH＝6.5‑8.5时，R84D稳定性较高，酶活力残留均>60％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118995459A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411189752.7
申请日：2024-08-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成次丹参酮二烯菌株的构建方法及其应用，属于代谢工程领域。本发明将次丹参酮二烯合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达，从IPP和DMAPP到次丹参酮二烯合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达，从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。本发明构建的基因工程菌株经过264h发酵后次丹参酮二烯产量可达4170.3mg·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成次丹参酮二烯，并且生产性能稳定，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN116694589B
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202310663759.7
申请日：2023-06-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种7β‑羟基类固醇脱氢酶的突变体及其应用。所述的7β‑HSDH突变体在SEQ ID NO.1所示的野生型上进行单点突变、两两复合突变和三点复合突变，经筛选获得复合突变体T189V/V207M，在此基础上进一步筛选出25个氨基酸残基位点，通过定点饱和突变，提高7β‑HSDH的催化效率以及热稳定性的突变体T189V/V207M/V91P、T189V/V207M/M144H、T189V/V207M/G146A、T189V/V207M/A158S、T189V/V207M/V183I。本发明构建的突变后的7β‑HSDH突变体相较于出发7β‑HSDH酶活力提高了3.8倍，突变后的7β‑HSDH突变体在催化100g·L‑1的7‑酮基‑石胆酸转化率可达到91％，具有工业化生产前景。
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公开(公告)号：CN114686414B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202210258249.7
申请日：2022-03-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准定量调控大肠杆菌全细胞催化的方法及应用，属于基因工程与生物催化领域。本发明通过构建色氨酸操纵子及温敏阻遏系统，可实现大肠杆菌生长前期稳定、正常生长，稳定期促进目的蛋白的表达；该系统还通过控制发酵温度，调节结构基因的表达水平，调控D,D‑羧肽酶实时表达量，增加了胞内可溶性肽聚糖，提高了重组大肠杆菌外膜的透性，有助于催化反应的底物及产物自由穿梭于细胞内外，更加有效的促进全细胞的高效催化。
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公开(公告)号：CN114457133B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202210216549.9
申请日：2022-03-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种以N‑乙酰葡萄糖胺发酵液为底物全细胞催化生产N‑乙酰神经氨酸的方法，属于生物工程应用领域。本发明在以N‑乙酰葡萄糖胺发酵液为底物的转化体系中进行全细胞催化生产N‑乙酰神经氨酸，通过对全细胞转化条件进行优化，在温度为30℃、转化液初始pH为6.5、底物丙酮酸浓度为1.38mol/L、TritonX‑100添加量为0.4％、菌体OD600为30、在5L发酵罐等条件下进行全细胞转化，可得到N‑乙酰神经氨酸180mmol/L，摩尔转化率达65.45％。
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公开(公告)号：CN116445435A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310064553.2
申请日：2023-01-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/04 , C07K19/00 , C12N15/53 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P33/00 , C12P33/02 , C12P33/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种融合表达催化生产熊去氧胆酸的方法及应用，属于酶工程和生物催化技术领域。本发明通过linker连接7β‑羟基类固醇脱氢酶和7α‑羟基类固醇脱氢酶两个基因，构建融合蛋白7α‑HSDH‑Linker‑7β‑HSDH，并将构建的融合蛋白用于熊去氧胆酸的催化生产工艺，为酶法催化生产熊去氧胆酸的工艺提供了一种新的选择方向，同时对其催化生产熊去氧胆酸的工艺进行了系统优化，显著提高了熊去氧胆酸的转化效率。
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