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公开(公告)号:CN105779484A
公开(公告)日:2016-07-20
申请号:CN201610218659.3
申请日:2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/485 , C12N15/66 , C12N2800/101 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明公开了一种基于dacD提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法,涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因,获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种基于dacD提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白,通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54%提高至32.02%。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号:CN105755029A
公开(公告)日:2016-07-13
申请号:CN201610218976.5
申请日:2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/67 , C12N2800/101 , C12P21/00
Abstract: 本发明公开了一种基于dacA提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法,涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因,获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白,通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54%提高至51.77%。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号:CN105647815A
公开(公告)日:2016-06-08
申请号:CN201510942917.8
申请日:2015-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高米曲霉曲酸产量的方法,属于发酵工程技术领域。具体地,通过改变培养基关键组分的浓度与接种条件控制米曲霉的菌落形态为球形(菌体处于最佳产酸形态),进而提高曲酸产量。当菌体形态为菌球时,米曲霉(A.oryzae)的产酸能力比菌丝时明显提高,曲酸产量可达15.11g/L。同时,菌球直径范围为0.25~0.35mm时,单位细胞曲酸积累量最高为0.778g/g。本发明优化了种子培养基中葡萄糖、酵母提取物浓度和孢子浓度,控制菌球大小,从而提高了米曲霉单位细胞曲酸产量,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104774818A
公开(公告)日:2015-07-15
申请号:CN201510179652.0
申请日:2015-04-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12P19/18
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体地,一种果糖基转移酶FTS-8及其基因和应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉Aspergillus niger的果糖基转移酶FTS-8,其氨基酸序列如序列1所示,且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因fts-8。本发明的果糖基转移酶具有以下性质:1)较宽的pH稳定范围:在pH4.0-8.0条件下稳定;2)具有高催化效率:Km、kcat分别为145.3g/L和3.8×103min-13)具有高低聚果糖转化率,其浓度为60%(w/w)。
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公开(公告)号:CN102994474B
公开(公告)日:2015-04-15
申请号:CN201210593202.2
申请日:2012-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公布了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其应用,属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)JN21(CCTCC NO:M 2011231)淀粉酶为母本,采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变。在此改造条件下,嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在50°C的半衰期由对照(突变前)例的15.3min提高到43.8min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性,为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
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公开(公告)号:CN104371994A
公开(公告)日:2015-02-25
申请号:CN201410550898.X
申请日:2014-10-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种新型结合诱变与高通量筛选高产重组酶菌株的方法,属于基因工程、酶学及发酵技术领域。采用ARTP诱变技术对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB600宿主进行诱变,利用筛选平板初筛、96孔板高通量复筛、摇瓶发酵筛选验证的方式获得一株高产重组酶的突变株。以碱性淀粉酶为筛选模式酶,高通量筛选出产酶酶活力较高的突变株B.subtilis WB600-mutl2,发酵得酶活力为186.4U/mL,为出发株酶活的130.3%。过氧化氢酶在B.subtilis WB600-mut12中异源表达后,酶活力提高至出发宿主酶活的135.0%。该发明具有重要的实用与经济价值。
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公开(公告)号:CN103409392A
公开(公告)日:2013-11-27
申请号:CN201310317927.3
申请日:2013-07-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定的淀粉酶突变体及其制备方法,属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)JN21(CCTCC NO:M2011231)淀粉酶为母本,采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变,在淀粉酶催化结构域内引入一对或多对二硫键,获得了具有较高热稳定性的淀粉酶突变体。在此改造条件下,嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在60℃的半衰期由对照(突变前)例的3.2min提高到22.3min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性,为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
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公开(公告)号:CN102304478B
公开(公告)日:2013-04-17
申请号:CN201110252908.8
申请日:2011-08-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高球孢白僵菌孢子抗热性的方法及其应用,可用于白僵菌孢子制剂制备、保藏和田间应用等领域,是将甘露醇或甘露醇与葡萄糖和乳糖的混合物添加于球孢白僵菌的孢子悬浮液。球孢白僵菌孢子可用于防治茶叶小绿叶蝉,其孢子抗热性的提高,降低了孢子在制剂制备和保藏过程中的热损伤,也增加了球孢白僵菌孢子在田间应用时对环境中高温的抵抗能力,从而提高了白僵菌孢子的存活率和侵染率,进而提高其生物防治的效果。
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公开(公告)号:CN102965360A
公开(公告)日:2013-03-13
申请号:CN201210533264.4
申请日:2012-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高催化效率碱性淀粉酶突变体及其制备方法和应用,属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)JN21(CCTCC NO:M2011231)淀粉酶为母本,采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行短肽融合表达。在此改造条件下,嗜碱芽孢杆菌淀粉酶比酶活比对照(突变前)例的比酶活提高4.1倍;催化效率比对照(突变前)例的催化效率提高3.5倍。利用此策略可以大大提高淀粉酶的催化效率,为其在纺织退浆、洗涤剂添加剂等工业生产领域提供了基础。此策略对淀粉酶及其它酶的催化效率提高具有重要的指导意义。
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公开(公告)号:CN101724571B
公开(公告)日:2011-07-27
申请号:CN200910264664.8
申请日:2009-12-21
Applicant: 无锡益鹏集团有限公司 , 江南大学
Abstract: 一种用添加营养物质提高固态发酵白僵菌孢子产量的方法,属于营养条件改变策略在发酵过程优化中的应用技术领域。本发明的球孢白僵菌(Beauveriabassiana)YP3-09已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 209238。以CCTCC NO:M 209238为发酵菌珠,采用在固态发酵培养基中添加33-37g/L的蔗糖、50-55g/L的硝酸钠和75-85μg/L的硼酸进行发酵,在此培养条件下,白僵菌孢子产量由对照(三种营养元素都不添加)例的7.30×107个/g提高到6.22×109个/g,利用此策略可以大大提高白僵菌孢子的产量,为其工业化生产提供了基础。此策略对其它固态发酵产品的生产具有重要的指导意义。
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