一种抗紫杉醇单克隆抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN101962407A

    公开(公告)日:2011-02-02

    申请号:CN201010525404.4

    申请日:2010-10-29

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C07K16/16

    摘要: 一种抗紫杉醇单克隆抗体的制备方法,它涉及一种单克隆抗体的制备方法。本发明解决了现有紫杉醇微生物发酵的菌株的紫杉醇产量仍然较低,且发酵液中杂质含量多,难以分离提取的问题。方法:一、紫杉醇人工抗原的合成与鉴定;二、利用合成的紫杉醇免疫原免疫Balb/c小鼠,取其效价高且特异性强的小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,培养并筛选出细胞株;三、将细胞株注入小鼠腹腔,收获腹水,得高浓度的单克隆抗体即完成。本发明抗紫杉醇单克隆抗体的产量高达1∶12800,发酵液中杂质含量少,分离提取简单,为从内生真菌发酵液中迅速、高效地分离、提取和纯化紫杉醇,为早日实现工业化生产奠定了基础。

    天然多组分抗菌蛋白发酵液的制备方法

    公开(公告)号:CN1928109B

    公开(公告)日:2010-05-26

    申请号:CN200610010429.4

    申请日:2006-08-23

    申请人: 黑龙江大学

    摘要: 天然多组分抗菌蛋白发酵液的制备方法,它涉及一种蛋白液的制备方法。它解决了目前农用抗生素对土传病害防效显著的种类极少,长期使用导致病原菌产生抗药性和现有抗菌蛋白制品毒性大、抗菌谱窄的问题。天然多组分抗菌蛋白发酵液按以下步骤制备:(一)将侧孢芽孢杆菌菌株BL-21接种到斜面活化培养基上培养;(二)将经过活化的侧孢芽孢杆菌菌株BL-21接种到液体种子培养基上培养;(三)将液体种子培养液与发酵培养基混合后培养,即得到天然多组分抗菌蛋白发酵液。本发明选用的菌株对环境和人体健康安全性高。本发明制备的天然多组分抗菌蛋白发酵液中含有多种抗菌蛋白,抑菌谱广,对多种植物病原真菌、部分革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌都有抑制作用。

    副干酪乳杆菌产生的抗菌肽的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101451158A

    公开(公告)日:2009-06-10

    申请号:CN200710144733.2

    申请日:2007-12-04

    申请人: 黑龙江大学

    摘要: 副干酪乳杆菌产生的抗菌肽的分离纯化方法。目前抗菌肽的应用已成为生命科学领域的一个研究热点。本发明包括:选取副干酪乳杆菌制作培养基,获得的发酵液在离心力10,000克,离心,冷藏并分离,经阳离子交换层析并过积累浓缩,使用超滤离心管在冷冻低温高速离心超滤除盐,同时收集流出液和保留液,将保留液通过分离纯化;高效液相色谱HPLC;采用蛋白浓缩试剂盒对样品进行浓缩,考马斯亮兰蛋白测定试剂盒检测蛋白浓度,12-烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE对分离到抗菌肽进行分子量估测,基质辅助激光解吸飞行时间质谱MOLDI-TOF-MS和串联质谱Q-TOF2实验测定氨基酸序列。本发明应用于抗菌肽的分离纯化。

    紫杉醇产生菌的工程菌株及其应用

    公开(公告)号:CN100451100C

    公开(公告)日:2009-01-14

    申请号:CN01111070.8

    申请日:2001-03-28

    IPC分类号: C12N1/20 C12P17/02 C12R1/645

    摘要: 紫杉醇产生菌及其应用,它涉及一种可生产紫杉醇的菌种及其应用。本发明的紫杉醇产生菌已在中国典型培养物保藏中心保藏,分类命名为树状多节孢(Nodulisporium sylviforme),保藏编号为CCTCC M201007,保藏日期为2001年3月26日。紫杉醇产生菌可用于微生物发酵法生产紫杉醇。本发明经过常规与生物工程手段选育出的工程菌株,发酵后的紫杉醇产量可达到420μg/L以上。

    一种表达木糖醇脱氢酶基因的质粒的构建方法

    公开(公告)号:CN101302534A

    公开(公告)日:2008-11-12

    申请号:CN200810064830.5

    申请日:2008-06-30

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N15/66 C12N15/53

    摘要: 一种表达木糖醇脱氢酶基因的质粒的构建方法,它涉及一种质粒载体的构建方法。它解决了目前酿酒酵母缺乏木糖醇脱氢酶(XDH),而不能使木糖代谢后产生乙醇问题。构建方法:一、克隆xyl2基因;二、回收、纯化xyl2基因片段后与pGMT vector载体连接,得到pGMT-xyl2;三、重组质粒p406ADH1-1的构建;四、重组质粒p406ADH1-2的构建;五、重组质粒p406ADH1-3的构建;六、将xyl2基因加入质粒p406ADH1-3,即得到表达木糖醇脱氢酶基因的质粒。本发明方法所构建的载体转化酿酒酵母后实现了木糖醇脱氢酶基因的高效稳定表达。

    亚麻微生物快速脱胶温水沤麻方法

    公开(公告)号:CN1279223C

    公开(公告)日:2006-10-11

    申请号:CN200410043720.2

    申请日:2004-07-16

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: D01C1/04

    摘要: 亚麻微生物快速脱胶温水沤麻方法,它涉及一种沤麻方法。现有的沤麻方法存在发酵周期长、出麻率低、亚麻纤维强度低、质量差的弊端。本发明的沤麻方法是将菌种在30℃下用果胶固体培养基活化24小时,活化后的菌种以沤麻容器中亚麻原茎重量的1%为接种量接入到沤麻容器中,此时亚麻原茎已经经过2~4小时温水的浸泡,然后用清水加满沤麻容器,并加温至30℃~37℃,加温的同时向沤麻池中加入46.3~92.6g/m3氯化钠和92.6~129.6g/m3尿素,78-100个小时后,沤麻结束;本发明的沤麻方法可以缩短亚麻的发酵周期、提高亚麻纤维的出麻率、提高亚麻纤维的强度、改善亚麻纤维质量、减少亚麻沤制中污水,利于推广应用。

    加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法

    公开(公告)号:CN1594676A

    公开(公告)日:2005-03-16

    申请号:CN200410043721.7

    申请日:2004-07-16

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: D01C1/04

    摘要: 加菌沤麻液回用在温水沤麻中的方法,它涉及一种沤麻方法。现有的沤麻方法存在沤麻废液不能重复利用、生产成本高的弊端。本发明的沤麻方法是将经过微生物脱胶温水沤麻方法所得的沤麻液以沤麻容器容积50%的量加入到沤麻容器中,容器中的亚麻原茎已经经过2~4小时温水的浸泡,再用清水加满沤麻容器,并加温至30℃~37℃,加温的同时向沤麻容器中加入氯化钠和尿素,加入量为每立方米沤麻容器加74~92.6克氯化钠和129.6~231.5克尿素,72~88个小时后,沤麻结束。本发明的沤麻方法可以降低生产成本,缩短亚麻的发酵周期、提高亚麻纤维的出麻率、提高亚麻纤维的强度、改善亚麻纤维质量、减少亚麻沤制中污水,利于推广应用。

    一种肠膜明串珠菌发酵产葡聚糖蔗糖酶的方法及其应用

    公开(公告)号:CN114317479A

    公开(公告)日:2022-04-12

    申请号:CN202210013792.0

    申请日:2022-01-06

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N9/10 C12N1/20 C12R1/01

    摘要: 一种肠膜明串珠菌发酵产葡聚糖蔗糖酶的方法及其应用,属于微生物发酵技术领域。本发明方法包括:(1)将肠膜明串珠菌接种于MRS液体培养基中,静置培养,获得种子液;(2)将种子液置于产酶培养基中,静置培养,获得葡聚糖蔗糖酶。本发明还提供了通过该方法制备得到的高酶活葡聚糖蔗糖酶及其应用。本发明通过优化发酵培养基和产酶条件,发酵周期短,产酶效率高,酶活高达到5.07U/mL。所产葡聚糖蔗糖酶最适作用温度为30℃,最适pH值为5,酶活力稳定,可体外催化蔗糖合成胞外多糖。

    一种芽孢盐杆菌属细菌产木聚糖酶的方法

    公开(公告)号:CN111394338A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010216936.3

    申请日:2020-03-25

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N9/24 C12N1/20 C12R1/01

    摘要: 一种芽孢盐杆菌属细菌产木聚糖酶的方法,本发明的目的是为了拓展产木聚糖酶的微生物菌种来源。具体的方法:一、将芽孢盐杆菌属(Sporohalobacter sp.)细菌HDYM-12接种于甘蔗渣培养基中进行发酵培养;二、发酵液进行离心即得到含有木聚糖酶的上清液。本发明所得到的含有木聚糖酶的上清液中木聚糖酶含量高,木聚糖酶活力即可达到50U/mL以上,本发明的方法发酵周期短、成本低、操作简便。