一种用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记及其检测方法

    公开(公告)号:CN106148527A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610543110.1

    申请日:2016-07-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记为,硬脂酰辅酶A去饱和酶SCD1基因(NC_007327)在8586bp的一个碱基C→T的SNP突变,导致蛋白质肽链中878位氨基酸‑丙氨酸(alanine)突变为缬氨酸(valine)。其用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记的检测方法包括:1)以从样品提取DNA为样本,使用用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记引物进行PCR扩增;2)检测步骤1)中所获得的PCR产物的序列,根据分子标记,即:SCD1基因(NC_007327)在8586bp的SNP突变,判定其样品的基因型为CC,CT或者TT型,对降低奶牛泰勒虫病进行辅助选择,其中CC型感染率最高,TT型感染率最低。该分子标记及其检测方法具有更高的准确性和可信度,可以有效地针对奶牛泰勒虫病的易感性对种牛进行辅助选择。

    一种基于ILF3基因的SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN119662848A

    公开(公告)日:2025-03-21

    申请号:CN202411910369.6

    申请日:2024-12-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于ILF3基因的SNP分子标记及其应用,属于基因工程技术领域,该分子标记位于荷斯坦牛基因组的7号染色体,特指ILF3基因的突变位点,基因在NCBI的编号为NC_037334.1。该SNP位点位于ILF3基因的第12647位碱基,表现为T/C多态性。本发明通过验证该SNP分子标记与泌乳性状的关联效应,成功构建了一种高效且准确的分子标记辅助育种技术。该技术可应用于奶牛遗传改良,通过选择具有优势等位基因的个体,并逐代提高该等位基因的频率,从而有效提升奶牛的泌乳性能,并增强其核心竞争力。

    一种用于鉴别荷斯坦牛泌乳性能的SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN118667965A

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202410789621.6

    申请日:2024-06-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于鉴别荷斯坦牛泌乳性能的SNP分子标记及其应用,所述SNP分子标记位于荷斯坦牛基因组的13号染色体上,为NCOA6基因发生突变,NCOA6基因在NCBI数据库中的基因编号为NC_037340,该SNP分子标记位于NCOA6基因的第87310位点的碱基处,该SNP分子标记位点具有G/A多态性。本发明验证了该分子标记对泌乳性状的影响效应,并建立了高效准确的分子标记辅助育种技术,将其应用于奶牛的遗传改良中,通过优选该SNP的优势等位基因,能够逐代增加优势等位基因频率,从而提高奶牛的泌乳性能,增加核心竞争力。

    奶牛气管抗菌肽基因乳腺特异性表达重组质粒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110643634A

    公开(公告)日:2020-01-03

    申请号:CN201911025737.8

    申请日:2019-10-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种奶牛气管抗菌肽基因(TAP)乳腺特异性表达质粒及其构建方法和应用。具体地,PCR扩增TAP基因的编码序列,将其插入到携带增强的绿色荧光蛋白基因的通用表达载体pEGFP-N1的多克隆位点中。通用表达载体pEGFP-N1经Ase I+Hind III双酶切,去除CMV启动子,克隆奶牛乳腺特异性表达β-乳球蛋白基因(BLG)启动子序列并取代Ase I和HindIII酶切位点,构建奶牛气管抗菌肽基因(TAP)乳腺特异性表达质粒。采用上述重组质粒转染奶牛乳腺上皮细胞,得到的细胞系可用于分泌具有生物活性的奶牛气管抗菌肽,用于奶牛乳腺组织免疫机制研究;该重组质粒还可应用于基因治疗奶牛乳房炎制剂的研发。

    一种粘质沙雷氏菌的检测引物及荧光定量PCR检测方法

    公开(公告)号:CN107523622A

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201710812437.9

    申请日:2017-09-11

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/6851 C12Q2531/113 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明提供一种粘质沙雷氏菌荧光定量PCR检测引物和方法。该引物核苷酸序列分别为:TGCCTGGAAAGCGGCGATGG和CGCCAGCTCGTCGTTGTGGT;该检测方法包括:1)提取待测样品DNA;2)以该DNA为模板,使用上述引物,采用荧光定量PCR方法扩增粘质沙雷氏菌,且在61℃退火阶段收集荧光值Ct样品值;3)根据模式细菌浓度为×102、×103、×104、×105、×106、×107时对应的Ct标准值,建立粘质沙雷氏菌的细菌数lg标准与Ct标准值的标准曲线,并根据Ct样品值,在标准曲线上确定样品中的粘质沙雷氏菌的数量。本发明提供的引物特异性强、灵敏度高,其检测限可达到×102cfu/mL,检测方法快速准确、耗时短。

    一种鲁氏不动杆菌的检测引物及荧光定量PCR检测方法

    公开(公告)号:CN106282354A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610747187.0

    申请日:2016-08-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种鲁氏不动杆菌荧光定量PCR检测引物和方法。该引物核苷酸序列分别为:T T A T T T G A T C A G G C G C A A A G 和CGTTTCTTGCCATCCCATTTA;该检测方法包括:1)提取待测样品DNA;2)以该DNA为模板,使用上述引物,采用荧光定量PCR方法扩增鲁氏不动杆菌,且在55℃退火阶段收集荧光值Ct样品值;3)根据模式细菌浓度为×102、×103、×104、×105、×106、×107时对应的Ct标准值,建立鲁氏不动杆菌的细菌数lg标准与Ct标准值的标准曲线,并根据Ct样品值,在标准曲线上确定样品中的鲁氏不动杆菌的数量。本发明提供的引物特异性强、灵敏度高,其检测限可达到×102cfu/mL,检测方法快速准确、耗时短。

    奶牛溶菌酶基因乳腺特异性表达重组质粒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110607324A

    公开(公告)日:2019-12-24

    申请号:CN201911025733.X

    申请日:2019-10-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种奶牛溶菌酶基因(Lyz)乳腺特异性表达质粒及其构建方法和应用。具体地,PCR扩增Lyz基因的编码序列,将其插入到携带增强的绿色荧光蛋白基因的通用表达载体pEGFP-N1的多克隆位点中。通用表达载体pEGFP-N1经Ase I+Hind III双酶切,去除CMV启动子,克隆奶牛乳腺特异性表达β-乳球蛋白基因(BLG)启动子序列并取代Ase I和HindIII酶切位点,构建奶牛溶菌酶基因(Lyz)乳腺特异性表达质粒。采用上述重组质粒转染奶牛乳腺上皮细胞,得到的细胞系可用于分泌具有生物活性的奶牛溶菌酶,用于奶牛乳腺组织免疫机制研究;该重组质粒还可应用于基因治疗奶牛乳房炎制剂的研发。

    一种用于生态肉牛场及放养动物的树木保护罩

    公开(公告)号:CN109417969A

    公开(公告)日:2019-03-05

    申请号:CN201710785165.8

    申请日:2017-09-04

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于生态肉牛场及放养动物的树木保护罩,所述保护罩包括轮胎底座及与轮胎底座连接的圆筒形围板,所述轮胎底座由废旧轮胎制成,所述废旧轮胎从内侧至外侧方向5 cm延轮胎圆弧切割,所述轮胎竖切一道切口,用于使轮胎套在树上;所述筒形围板的底边通过粘合剂与轮胎的圆弧切口平面连接。

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