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公开(公告)号：CN114480352B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210097345.8
申请日：2022-01-26
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明主要通过DNA改组技术，利用DNaseI消化地衣芽胞杆菌来源和克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因，纯化回收目的片段，通过无引物PCR和有引物PCR构建碱性蛋白酶突变库，筛选获得了一种碱性蛋白酶活力显著提高的突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。适宜条件下，突变体碱性蛋白酶活力为61.75U/mL，相比野生型有显著提高。
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公开(公告)号：CN112522173B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202011539757.X
申请日：2020-12-23
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明目的是通过对基因工程宿主的定向改造，提供一株能够高效稳定生产异源蛋白酶的基因工程菌，以解淀粉芽孢杆菌为宿主，首先将宿主的8种胞外蛋白酶aprE、epr、mpr、vpr、nprE、bpr、wprA、aprX缺失，得到胞外蛋白酶缺陷型菌株；还将宿主的α‑淀粉酶和胞外多糖基因簇eps缺失；还将表达异源碱性蛋白酶的高拷贝质粒导入宿主，得到一株高效生产异源碱性蛋白酶的基因工程菌。并且该工程菌在发酵过程中粘性大大降低，利于产物蛋白酶的分离纯化。
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公开(公告)号：CN114958807B
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202210693001.3
申请日：2022-06-17
申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种耐碱性的脂肪酶突变体及其应用。所述的碱性脂肪酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示，脂肪酶突变体由根霉菌株ZF071脂肪酶氨基酸序列SEQ ID No.2中的第122位丙氨酸变为缬氨酸而获得。通过基因工程的手段将含有突变基因的载体导入宿主中获得基因工程菌，通过发酵性能验证，其碱性脂肪酶发酵酶活可达93000U/mL以上。突变体所表达的碱性脂肪酶最适pH为10.5，较突变前提高0.5，在pH 11.0的条件下处理10h，该酶相对活性仍剩余85％左右，与突变前相比耐碱性得到提高，更有利于在洗涤剂行业中进行应用。
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公开(公告)号：CN115125247A
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202210671305.X
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N9/56 , C12N1/21 , C12R1/11
摘要： 本发明通过对枯草芽孢杆菌来源的启动子分析改造获得了一种强度提高的新型组合启动子pα2‑α2。本发明还提供包含该组合启动子的表达载体、表达系统。本发明所述组合启动子用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可将碱性蛋白酶表达活性提高144％，为介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源碱性蛋白酶基因的表达奠定基础，推动碱性蛋白酶的高效表达及工业化生产。
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公开(公告)号：CN112626052B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202011430468.6
申请日：2020-12-09
申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明属于饲料生物技术领域，具体涉及一种多聚半乳糖醛酸酶突变体及其编码基因和应用。是以一种以来源于Talaromyces leycettanus JCM12802的多聚半乳糖醛酸酶作为母本，经点突变获得的突变体E247C/S276C。本发明的多聚半乳糖醛酸酶突变体与野生型多聚半乳糖醛酸酶相比，多聚半乳糖醛酸酶热稳定性增强，70℃处理30min仍保留21.78％左右的活性，而野生酶活性已经消失。此外，野生型比活为50483U/mg，突变体的比活为46270U/mg，可以应用于能源、食品和饲料领域中。
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公开(公告)号：CN111593063B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202010595893.4
申请日：2017-09-30
申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种包含植酸酶突变体的重组载体或重组菌株。本发明通过PCR获得来自枯草芽孢杆菌突变菌的耐热植酸酶突变基因A‑2，并将A‑2构建到pPIC9质粒上，得到重组质粒pPIC9‑A‑2，并转化到毕赤酵母GS115，筛选得到高表达耐热植酸酶的重组菌，所表达的耐热植酸酶在80℃保温处理30min，相对活性仍剩余75％左右，90℃处理30min，酶活仍存留25％以上，耐热性良好，可以广泛用于食品、饲料等行业。
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公开(公告)号：CN110777096B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201911119241.7
申请日：2019-11-15
申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明属于微生物或酶工程领域，具体涉及一株高产热稳定胰蛋白酶的链霉菌及其应用。所述菌株具体为链霉菌(Streptomyces sp.)LDE‑79，保藏号为CGMCC No.18646。链霉菌LDE‑79发酵得到的胰蛋白酶最适pH范围为7.5‑9.0，最适pH为8.0，最适作用温度范围为35℃‑60℃，最适温度为50℃。并且在55℃保温1h后剩余酶活为92％，保温2h后剩余酶活为85％，具有显著的耐热性，可广泛应用到高温工业生产中，大大地拓宽了胰蛋白酶的应用范围，增加了胰蛋白酶的应用价值。
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公开(公告)号：CN112626052A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011430468.6
申请日：2020-12-09
申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明属于饲料生物技术领域，具体涉及一种多聚半乳糖醛酸酶突变体及其编码基因和应用。是以一种以来源于Talaromyces leycettanus JCM12802的多聚半乳糖醛酸酶作为母本，经点突变获得的突变体E247C/S276C。本发明的多聚半乳糖醛酸酶突变体与野生型多聚半乳糖醛酸酶相比，多聚半乳糖醛酸酶热稳定性增强，70℃处理30min仍保留21.78％左右的活性，而野生酶活性已经消失。此外，野生型比活为50483U/mg，突变体的比活为46270U/mg，可以应用于能源、食品和饲料领域中。
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公开(公告)号：CN112522173A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011539757.X
申请日：2020-12-23
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明目的是通过对基因工程宿主的定向改造，提供一株能够高效稳定生产异源蛋白酶的基因工程菌，以解淀粉芽孢杆菌为宿主，首先将宿主的8种胞外蛋白酶aprE、epr、mpr、vpr、nprE、bpr、wprA、aprX缺失，得到胞外蛋白酶缺陷型菌株；还将宿主的α‑淀粉酶和胞外多糖基因簇eps缺失；还将表达异源碱性蛋白酶的高拷贝质粒导入宿主，得到一株高效生产异源碱性蛋白酶的基因工程菌。并且该工程菌在发酵过程中粘性大大降低，利于产物蛋白酶的分离纯化。
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公开(公告)号：CN110747188B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201911125959.7
申请日：2019-11-18
申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种生产角蛋白酶的方法。该方法所采用的生产菌株为地衣芽孢杆菌(Bucillus licheniformis)JR‑101，保藏编号为CGMCC No.18643。该菌株经过液态发酵生产的角蛋白酶发酵液酶活力平均达到27703U/mL，所生产的角蛋白酶具有耐热、酶活力高、pH作用范围广泛、性能稳定而且价格较低的特点，应用范围广泛。
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