特殊密闭空间专用植物复合酶配方及其制备方法

    公开(公告)号:CN118874210A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410928823.4

    申请日:2024-07-11

    Abstract: 本发明公开了特殊密闭空间专用植物复合酶配方及其制备方法,属于复合酶生产工艺。所述特殊密闭空间专用植物复合酶配方,由以下重量份的成分组成:30‑40份发酵混合物,4‑8份酶保护剂,2‑6份纳米复合物,其中,发酵混合物由菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、丝氨酸蛋白酶、胰蛋白酶、橙皮苷酶、艾草提取物、迷迭香提取物、紫锥菊多酚、洋甘菊提取物、硅藻土、葡萄糖和纯净水组成,酶保护剂由玉米秸秆、四甲基哌啶氧化物、海带干粉和乙醇制备得到,纳米复合物由磷脂、胆固醇、吐温80和ε‑聚赖氨酸制备得到。通过该方法获得的植物复合酶配方具有优异的净化效率和持久的净化时间。

    一种利用MBP促溶标签可溶性表达和纯化重组胰蛋白酶的方法

    公开(公告)号:CN118685389A

    公开(公告)日:2024-09-24

    申请号:CN202410952077.2

    申请日:2024-07-16

    Abstract: 本发明涉及蛋白质工程技术领域,具体公开了一种利用MBP促溶标签可溶性表达和纯化重组胰蛋白酶的方法,步骤1:将含有胰蛋白酶编码基因的重组表达载体转化宿主菌,得到重组菌;步骤2:培养所述重组菌至OD600为0.6‑0.8时,向培养体系中添加0.5mM的IPTG进行诱导培养,诱导所述重组菌产生胰蛋白酶酶原,得到诱导后菌体;步骤3:从所述诱导后菌体中纯化得到重组胰蛋白酶。本发明通过选择表达载体、宿主菌及优化培养诱导条件,控制毒性蛋白的本底表达,当宿主生长到一定浓度时经诱导物诱导,目的蛋白可以一段时间内以可溶的形式大量表达,成功的在大肠杆菌中表达了胰蛋白酶,实现了重组胰蛋白酶的生产,为胰蛋白酶的广泛药物应用铺平了道路。

    一种糜蛋白酶的制备方法和应用
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN117721099A

    公开(公告)日:2024-03-19

    申请号:CN202311741836.2

    申请日:2023-12-18

    Abstract: 本发明公开了一种糜蛋白酶的制备方法和应用,涉及生物制药技术领域,依次进行原料预处理、浸提、萃取、活化、超滤、精提、纯化、干燥粉碎,其中精提时向糜蛋白酶粗酶液中加入聚乙烯磺酸钠,搅拌后离心,收集不溶聚合物;向不溶聚合物中加入醋酸缓冲溶液,搅拌均匀后加入聚醚酰亚胺溶液,充分解离,冷冻离心,过滤,并收集沉淀;利用聚乙烯磺酸钠具有的磺酸基带负电荷的基团能够与糜蛋白酶的带正电的组氨酸残基之间发生相互静电作用而形成聚合沉淀物,同时低浓度的聚乙烯亚胺的存在可以破坏两者之间的库仑力作用,使两者相互解离,即通过加入的聚乙烯磺酸钠和聚乙烯亚胺之间的协同作用,使得制备的糜蛋白酶质量更高。

    一种胰蛋白酶的制备方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN117165562A

    公开(公告)日:2023-12-05

    申请号:CN202311193211.7

    申请日:2023-09-15

    Abstract: 本发明公开了一种胰蛋白酶的制备方法,涉及生物技术领域,解决现有的胰蛋白酶分离纯化方法存在的纯度低、回收率低、活性损失较大的技术问题;包括以下步骤:(1)猪胰脏破碎加乙酸溶液提取,得胰蛋白酶粗提取液,(2)向粗提取液中加入固体硫酸铵盐析,抽滤得滤饼,为胰蛋白酶原粗制品,(3)向胰蛋白酶原粗制品中加水溶解,加入氯化钙和胰蛋白酶活化,抽滤除去硫酸钙沉淀,得到胰蛋白酶液,(4)对胰蛋白酶液进行超滤浓缩,得到浓缩液,并透析,(5)用戊二醛‑磷酸缓冲液和鸡卵粘蛋白‑磷酸缓冲液处理载体得到固体亲和树脂(6)洗脱并收集胰蛋白酶;本发明对胰蛋白酶具有很好的分离纯化能力,同时减小了酶活性损失,提高了胰蛋白酶活力。

    生产β-胰蛋白酶的方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116406422A

    公开(公告)日:2023-07-07

    申请号:CN202180067315.6

    申请日:2021-10-01

    Abstract: 一种生产β‑胰蛋白酶的方法,所述方法包含:a)使变性胰蛋白酶原复性,从而生产复性胰蛋白酶原,其中所述复性在包含L‑精氨酸的缓冲液中进行;b)通过阴离子交换层析对复性胰蛋白酶原进行纯化,从而提供纯化的复性胰蛋白酶原;和c)在促进胰蛋白酶原的蛋白水解活性的条件下对纯化的复性胰蛋白酶原进行孵育,其中胰蛋白酶原通过所述蛋白水解活性裂解成β‑胰蛋白酶;其中步骤a)和b)在不促进胰蛋白酶原的蛋白水解活性的条件下进行;其中所述方法不包含加入用于将胰蛋白酶原裂解成β‑胰蛋白酶的另外的蛋白酶;其中至少步骤c)在不包含L‑精氨酸的缓冲液中进行;并且其中在步骤c)之前,当存在于不包含L‑精氨酸的缓冲液中时,不使胰蛋白酶原经受>8℃的温度超过38小时。

Patent Agency Ranking