公开(公告)号：US20130164820A9

公开(公告)日：2013-06-27

申请号：US13506845

申请日：2012-05-18

申请人： Edwin L. Madison

发明人： Edwin L. Madison

IPC分类号： C12N9/50 ,  C12N15/57 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12N1/15 ,  C40B30/08 ,  C12N15/58

CPC分类号： C12N15/1037 ,  A61K38/00 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/02 ,  C07K2319/21 ,  C07K2319/23 ,  C07K2319/30 ,  C07K2319/41 ,  C07K2319/42 ,  C12N9/50 ,  C12N9/6408 ,  C12N9/6462 ,  C12Q1/37 ,  C12Y304/21073 ,  C12Y304/21109 ,  G01N33/6842

摘要： Methods for identifying modified proteases with modified substrate specificity or other properties are provided. The methods screen candidate and modified proteases by contacting them with a substrate, such as a serpin, an alpha macroglobulins or a p35 family protein or modified serpins and modified p35 family members or modified alpha macroglobulins, that, upon cleavage of the substrate, traps the protease by forming a stable complex. Also provided are modified proteases.

摘要翻译： 提供用于鉴定修饰的底物特异性或其它性质的修饰蛋白酶的方法。 通过使筛选候选物和修饰的蛋白酶与底物（例如丝氨酸蛋白酶抑制剂，α巨球蛋白或p35家族蛋白质或修饰的丝氨酸蛋白酶和修饰的p35家族成员或修饰的α巨球蛋白）接触来筛选候选物和修饰的蛋白酶，在基底切割时， 蛋白酶通过形成稳定的复合物。 还提供了修饰的蛋白酶。

公开(公告)号：US20120252117A1

公开(公告)日：2012-10-04

申请号：US13085425

申请日：2011-04-12

申请人： Richard F Selden ,  Allan M. Miller ,  Douglas A. Treco

发明人： Richard F Selden ,  Allan M. Miller ,  Douglas A. Treco

IPC分类号： C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N5/28 ,  C12N15/56 ,  C12N15/13 ,  C12N15/24 ,  C12N15/17 ,  C12N15/54 ,  C12N15/85 ,  C12N15/58

CPC分类号： C12N9/6437 ,  C07K14/755 ,  C07K2319/50 ,  C07K2319/61 ,  C12N9/2465 ,  C12N9/644 ,  C12N15/67 ,  C12Y304/21022

摘要： The present invention is directed to a synthetic nucleic acid sequence which encodes a protein wherein at least one non-common codon or less-common codon is replaced by a common codon. The synthetic nucleic acid sequence can include a continuous stretch of at least 90 codons all of which are common codons.

摘要翻译： 本发明涉及编码蛋白质的合成核酸序列，其中至少一个非共同密码子或更少共同密码子被共同密码子替代。 合成核酸序列可以包括至少90个密码子的连续延伸，所有这些密码子都是常见的密码子。

公开(公告)号：US07700568B2

公开(公告)日：2010-04-20

申请号：US09750410

申请日：2000-12-28

申请人： Gloria C. Li ,  Paul W. J. J. Burgman

发明人： Gloria C. Li ,  Paul W. J. J. Burgman

IPC分类号： A01N43/04 ,  C12Q1/68 ,  C12P19/34 ,  C12N15/58 ,  C07H21/04

CPC分类号： C12N15/1137 ,  A61K38/00 ,  A61N2005/1098 ,  C07K2319/00 ,  C12N2310/111 ,  C12N2310/121

摘要： This invention provides methods for increasing the susceptibility of cells to DNA-damaging agents, and for treating tumors in a subject, comprising introducing antisense that prevent expression of DNA dependent protein kinase catalytic subunit Ku70 or Ku80, wherein the antisense is in an amount sufficient to increase the sensitivity of the cells and tumors to heat, chemical, or radiation-induced DNA damage.

摘要翻译： 本发明提供了增加细胞对DNA损伤剂的敏感性和用于治疗受试者的肿瘤的方法，包括引入预防DNA依赖性蛋白激酶催化亚基Ku70或Ku80表达的反义，其中反义物的量足以 增加细胞和肿瘤对热，化学或辐射诱导的DNA损伤的敏感性。

公开(公告)号：US20080020416A1

公开(公告)日：2008-01-24

申请号：US10598280

申请日：2005-03-07

申请人： Mark McAlister ,  Antonio Pineda-Lucena

发明人： Mark McAlister ,  Antonio Pineda-Lucena

IPC分类号： C12N9/72 ,  C12N15/58 ,  C12Q1/37 ,  C12N15/62

CPC分类号： C12N9/6462 ,  C12Y304/21073

摘要： A method for preparing a soluble protein comprising urokinase-type plasminogen activator (uPA) or an active fragment thereof, or a variant of either of these which has uPA activity, which method comprises contacting said protein with a buffer at a pH of from 8.5-10.5, said buffer comprising a reducing agent and an oxidising agent which forms a redox pair, wherein the reducing agent is present in excess compared to the oxidising agent, and wherein the reducing agent is present in a concentration of at least 5 mM. Material obtainable in this way forms a further aspect of the invention. It has been refolded in a “native-like” form and is useful in studies such as N.M.R. analysis to detect ligands.

摘要翻译： 一种制备包含尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）或其活性片段的可溶性蛋白质的方法，或其中具有uPA活性的其中任一种的变体，该方法包括使所述蛋白质与pH为8.5〜 10.5，所述缓冲液包含形成氧化还原对的还原剂和氧化剂，其中所述还原剂与氧化剂相比存在过量，并且其中所述还原剂以至少5mM的浓度存在。 以这种方式获得的材料形成本发明的另一方面。 它已经以“本土化”形式重新折叠，并且在诸如N.M.R.的研究中是有用的。 分析检测配体。

公开(公告)号：US6010897A

公开(公告)日：2000-01-04

申请号：US852299

申请日：1997-05-17

申请人： Detley Behnke ,  Bernhard Schlott ,  Sybille Albrecht ,  Karl-Heinz Guhrs ,  Manfred Hartmann

发明人： Detley Behnke ,  Bernhard Schlott ,  Sybille Albrecht ,  Karl-Heinz Guhrs ,  Manfred Hartmann

IPC分类号： C12N15/02 ,  A61K38/00 ,  A61K38/46 ,  A61K39/00 ,  A61K39/395 ,  C07K1/20 ,  C07K14/195 ,  C07K14/31 ,  C07K14/41 ,  C07K16/00 ,  C07K16/40 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N5/20 ,  C12N9/00 ,  C12N9/52 ,  C12N9/64 ,  C12N15/09 ,  C12N15/58 ,  C12P21/08 ,  C12R1/01 ,  C12R1/91 ,  C12N1/00 ,  C12N15/63

CPC分类号： C07K14/31 ,  C07K16/40 ,  A61K38/00

摘要： The invention relates to recombinant staphylokinase polypeptides with plasminogen activator effect and to their production and use. The polypeptides are obtained by expression of DNA sequences which are free from signal-peptide-coding regions.

摘要翻译： 本发明涉及具有纤溶酶原激活物作用的重组葡激酶多肽及其生产和使用。 通过表达不含信号肽编码区的DNA序列获得多肽。

公开(公告)号：US5869314A

公开(公告)日：1999-02-09

申请号：US487456

申请日：1995-06-06

申请人： David V. Goeddel ,  William J. Kohr ,  Diane Pennica ,  Gordon A. Vehar

发明人： David V. Goeddel ,  William J. Kohr ,  Diane Pennica ,  Gordon A. Vehar

IPC分类号： A61K38/00 ,  C12N1/21 ,  C12N9/06 ,  C12N9/72 ,  C12N15/58 ,  C12N15/71 ,  C12P20060101 ,  C12N9/64 ,  A61K38/49

CPC分类号： C12N15/71 ,  C12N9/003 ,  C12N9/6459 ,  C12Y304/21069 ,  A61K38/00

摘要： Tissue plasminogen activators (t-PAs) and derivatives thereof are produced in useful quantities using recombinant DNA techniques. Specific derivatives include amino acid deletion derivatives and amino acid substitution derivatives. A deletion derivative lacking the N-terminal first 68 amino acids is specifically exemplified having requisite t-PA characteristics. The invention disclosed thus enables the production of t-PAs and derivatives thereof via recombinant means. Methods, expression vehicles and various host cells useful in the production of said t-PAs and derivatives thereof are also disclosed.

摘要翻译： 使用重组DNA技术以有用的量产生组织纤溶酶原激活剂（t-PA）及其衍生物。 具体的衍生物包括氨基酸缺失衍生物和氨基酸取代衍生物。 具有必需的t-PA特征的具体示例是缺少N-末端第68个氨基酸的缺失衍生物。 因此，本发明能够通过重组方法生产t-PA及其衍生物。 还公开了可用于生产所述t-PA及其衍生物的方法，表达载体和各种宿主细胞。

公开(公告)号：US5770425A

公开(公告)日：1998-06-23

申请号：US276862

申请日：1994-07-18

申请人： Stephen P. Anderson ,  Deborah L. Higgins ,  Adair J. Hotchkiss ,  Cara B. Marks

发明人： Stephen P. Anderson ,  Deborah L. Higgins ,  Adair J. Hotchkiss ,  Cara B. Marks

IPC分类号： C12N9/64 ,  A61K38/46 ,  A61K38/48 ,  A61P7/02 ,  C12N9/72 ,  C12N15/09 ,  C12N15/12 ,  C12N15/58 ,  C12R1/91 ,  C12N9/48

CPC分类号： C12N9/6459 ,  C12Y304/21069

摘要： Disclosed are novel variants of tissue plasminogen activator (t-PA) that have surprising biological/pharmacokinetic properties compared with native t-PA. For example, certain of the variants hereof demonstrate increased half-life profiles, and show good fibrin binding activity even though fibrin binding regions of the molecule are deleted. All associated means and methods for preparing such variants recombinantly and for using such variants are also disclosed.

摘要翻译： 公开了与天然t-PA相比具有令人惊奇的生物/药代动力学特征的组织纤溶酶原激活剂（t-PA）的新型变体。 例如，其中的某些变体表现出增加的半衰期曲线，并且即使缺失了分子的纤维蛋白结合区，也显示出良好的纤维蛋白结合活性。 还公开了重组制备这些变体和使用这些变体的所有相关的方法和方法。

公开(公告)号：US5674728A

公开(公告)日：1997-10-07

申请号：US328314

申请日：1994-10-24

申请人： Frank Buxton ,  Gabor Jarai ,  Jacob Visser

发明人： Frank Buxton ,  Gabor Jarai ,  Jacob Visser

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N1/15 ,  C12N9/62 ,  C12N15/00 ,  C12N15/57 ,  C12N15/58 ,  C12R1/685 ,  C12N15/80 ,  C12N15/90

CPC分类号： C12N9/62

摘要： The present invention concerns a novel DNA sequence coding for an Aspergillus aspartic protease, an Aspergillus aspartic protease per se and a method for the preparation thereof. The invention further concerns a novel Aspergillus mutant strain defective in a protease of the aspartic proteinase-type, which is useful for the expression of heterologous protein, and a method for the preparation of such a mutant strain.

摘要翻译： 本发明涉及编码曲霉天冬氨酸蛋白酶，曲霉天门冬氨酸蛋白酶本身的新型DNA序列及其制备方法。 本发明还涉及可用于异源蛋白质表达的天冬氨酸蛋白酶型蛋白酶中缺陷的新型曲霉菌突变株，以及这种突变菌株的制备方法。

公开(公告)号：US5637503A

公开(公告)日：1997-06-10

申请号：US551907

申请日：1990-07-12

申请人： Regina E. Brigelius-Flohe' ,  Leopold Flohe' ,  Wolfgang Hillen ,  Gerd J. Steffens ,  Wolfgang Strassburger ,  Martin R. F. Wilhelm

发明人： Regina E. Brigelius-Flohe' ,  Leopold Flohe' ,  Wolfgang Hillen ,  Gerd J. Steffens ,  Wolfgang Strassburger ,  Martin R. F. Wilhelm

IPC分类号： C12N9/64 ,  C12N9/72 ,  C12N15/00 ,  C12N15/58 ,  C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N15/67 ,  C12N15/70 ,  C12N15/71 ,  C07H21/02 ,  C12P21/06

CPC分类号： C12N9/6462 ,  C12N15/67 ,  C12N15/70 ,  C12Y304/21073

摘要： Plasmids containing synthetic DNA sequences are described which are suitable for the expression of the intermediate protein of the recombinant scu-PA (i.e., the unglycosylated protein moiety of the single chain prourokinase) in Enterobacteriaceae, especially in E. coli, with expression rates far higher than those obtainable according to prior methods. The plasmids comprise operons that include a regulatable, optionally synthetic, promotor, a Shine-Dalgarno sequence, a start codon, a synthetic structural gene with selected codon usage, and downstream of the structural gene, 1 to 2 transcription terminators. The preparation of the plasmids and of synthetic DNA-sequences starting from commercially available plasmids and intermediates is described. The intermediate protein, expressed in high yields by using the plasmids for transforming suitable hosts, may be refolded to produce the therapeutically useful plasminogen activator recombinant scu-PA. This protein also may serve as a starting material for obtaining the recombinant two chain unglycosylated urokinase protein (rtcu-PA) on a large scale by splitting the single chain product.

摘要翻译： 描述了含有合成DNA序列的质粒，其适用于在肠杆菌科特别是大肠杆菌中表达重组scu-PA（即，单链原尿激酶的未糖基化蛋白质部分）的中间蛋白质，其表达率远高于 比根据现有方法可获得的那些。 质粒包含操纵子，其包括可调节的，任选合成的启动子，Shine-Dalgarno序列，起始密码子，具有选择的密码子使用的合成结构基因，以及结构基因的下游，1至2个转录终止子。 描述了从市售质粒和中间体开始制备质粒和合成DNA序列。 通过使用质粒转化合适的宿主以高产率表达的中间蛋白质可以重折叠以产生治疗上有用的纤溶酶原激活物重组scu-PA。 该蛋白质还可用作通过分离单链产物大规模获得重组双链非糖基化尿激酶蛋白（rtcu-PA）的起始材料。

公开(公告)号：US5614190A

公开(公告)日：1997-03-25

申请号：US429364

申请日：1995-04-26

申请人： Stephen Anderson ,  William F. Bennett ,  David Botstein ,  Deborah L. Higgins ,  Nicholas F. Paoni ,  Mark J. Zoller

发明人： Stephen Anderson ,  William F. Bennett ,  David Botstein ,  Deborah L. Higgins ,  Nicholas F. Paoni ,  Mark J. Zoller

IPC分类号： A61K38/00 ,  A61K38/48 ,  C07H21/04 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N9/64 ,  C12N9/72 ,  C12N15/55 ,  C12N15/58 ,  C12N15/63 ,  C12N15/70 ,  C12N15/86 ,  A61K38/49 ,  C12N9/50

CPC分类号： C12N9/6456 ,  A61K38/00

摘要： Tissue plasminogen activator (t-PA) zymogens and variants are prepared, including a fibrinolytically active variant of t-PA that has an amino acid alteration at a site within the protease domain of t-PA as compared with the corresponding wild-type t-PA, which alteration renders the variant zymogenic in the presence of plasmin-degraded fibrinogen, and/or fibrin (or plasma clot) specific, as compared to the corresponding wild-type t-PA. DNA sequences can be prepared that encode the zymogens and variants, as well as expression vectors incorporating the DNA sequences, and host cells transformed with the expression vectors. The zymogens and variants may be used in a pharmaceutical preparation to treat a vascular disease or condition or to prevent fibrin deposition or adhesion formation or reformation in mammals.

摘要翻译： 制备组织纤溶酶原激活剂（t-PA）酶原和变体，包括t-PA的纤维蛋白溶解活性变体，其在t-PA的蛋白酶结构域内的位置具有氨基酸改变，与相应的野生型t- PA，与相应的野生型t-PA相比，其改变使纤维蛋白溶酶原纤维蛋白原和/或纤维蛋白（或血浆凝块）存在下的变形酶原。 可以制备编码酶原和变体的DNA序列，以及掺入DNA序列的表达载体和用表达载体转化的宿主细胞。 酶原和变体可用于药物制剂中以治疗血管疾病或病症或预防纤维蛋白沉积或哺乳动物中的粘附形成或重新形成。