一种耐高温的黄素单核苷酸结合荧光蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN117050152A

    公开(公告)日:2023-11-14

    申请号:CN202311063595.0

    申请日:2023-08-22

    发明人: 徐俊 周乐儿 崔莉

    摘要: 本发明公开了一种耐高温的黄素单核苷酸结合荧光蛋白及其应用,涉及生物技术领域,氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;一种差示扫描荧光法在黄素单核苷酸结合荧光蛋白YNP3Y116F突变文库的定向进化筛选中的应用。本发明首次在严格厌氧超嗜热古菌中应用荧光标记,通过定向进化获得热稳定改善的突变体,构建表达载体,使用热球菌转化方法获得重组菌株。该突变体能够顺利应用至生长温度在85℃的热球菌的荧光成像中。本发明引入差示荧光扫描技术作为突变文库的筛选方法,可实现同时筛选荧光强度和热稳定性两个特性。

    施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE蛋白在介导同源重组上的应用

    公开(公告)号:CN114163506B

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202111318814.6

    申请日:2021-11-09

    发明人: 冯雁 黄飞

    摘要: 本发明涉及施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI‑RE蛋白在介导同源重组上的应用。本发明研究发现所述施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI‑RE蛋白影响DNA复制以及DNA损伤修复途径;本发明公开了施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI‑RE蛋白介导的大肠杆菌基因敲除技术的构建和应用。本发明首先构建施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI‑RE蛋白表达质粒和带有待敲除把基因序列左右同源臂序列的重组质粒;随后用两个质粒转化大肠杆菌,诱导双交换重组,通过表型筛选或PCR鉴定获得敲除靶基因的菌株。该操作系统首次构建基于PsPIWI‑RE蛋白与同源序列的基因编辑系统。为大肠杆菌等微生物的基因编辑提供新的优良工具。

    铜绿假单胞菌基因工程疫苗候选抗原PA5505的纯化方法

    公开(公告)号:CN109486736B

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN201811366387.7

    申请日:2018-11-16

    摘要: 本发明属于生物制药技术领域,公开了一种铜绿假单胞菌基因工程疫苗候选抗原PA5505的纯化方法,通过基因工程技术将编码PA5505蛋白活性功能片段的DNA序列克隆至pGEX‑6p‑2载体上,构建大肠杆菌重组工程菌pGEX‑6p‑2‑PA5505/XL‑1 blue,通过诱导表达获得PA5505蛋白。本发明通过对表达PA5505的基因工程菌进行高压破菌、GST亲和层析、PP酶酶切、SP HP层析、Q HP层析等技术,获得高纯度的疫苗候选抗原PA5505。该发明纯化工艺简捷、容易放大、重复性好,所获目标蛋白纯度高,动物试验证明可有效刺激机体产生较高的体液免疫应答和良好的免疫保护作用。

    铜绿假单胞菌疫苗在呼吸系统疾病中的应用

    公开(公告)号:CN114364787A

    公开(公告)日:2022-04-15

    申请号:CN201980099562.7

    申请日:2019-11-14

    申请人: 四川大学

    发明人: 王震玲 魏于全

    摘要: 一种铜绿假单胞菌疫苗在制备防治呼吸系统疾病的药物中的应用。铜绿假单胞菌疫苗可以通过激活机体特应性免疫反应,能防治多药耐药铜绿假单胞菌导致的肺部感染,以及COPD合并铜绿假单胞菌感染。通过既定的免疫程序,降低接受免疫机体感染的细菌荷载量,可以预防肺部感染铜绿假单胞菌,在一定程度上规避了现有技术中采用抗生素不佳、难以根治、并且容易产生耐药性等技术问题。

    DSF群体感应信号降解基因及其应用

    公开(公告)号:CN110607311B

    公开(公告)日:2021-07-20

    申请号:CN201910731498.1

    申请日:2019-08-08

    摘要: 本发明公开了DSF群体感应信号降解基因及其应用。所述降解基因为从硝基还原假单胞菌菌株HS‑18中分离得到的对群体感应信号DSF家族信号有显著降解作用的降解基因dig1、dig2、dig3、dig4。在非致病菌或生防菌中异源表达所述降解基因,能显著提高非致病菌或生防菌对DSF的降解能力。在DSF家族信号介导的致病菌中异源表达所述降解基因,能显著影响受DSF家族信号调控的毒力因子的表达,降低了致病菌对植物寄主的致病力。因此在对DSF家族信号介导的致病菌的生物防治方面具有重要的实际应用价值和应用前景。