用于测定神经毒素多肽的生物学活性的细胞测试系统

    公开(公告)号:CN104736697B

    公开(公告)日:2018-06-01

    申请号:CN201380053762.1

    申请日:2013-10-15

    Abstract: 本发明涉及用于生成神经毒素敏感的、神经元分化的细胞的方法,所述方法包括步骤为:a)在引发所述肿瘤细胞神经元分化的条件和时间下,在培养基中培养能够分化为神经元细胞的肿瘤细胞;和b)在具有100至270mOsm/kg的重量摩尔渗透压浓度,并且包含(i)B27补充物和/或(ii)N2补充物的分化培养基中培养a)的经引发神经元分化的肿瘤细胞至少3天,从而获得神经毒素敏感的、神经元分化的细胞。本发明还涉及通过本发明的方法可获得的神经毒素敏感的、神经元分化的细胞。此外,本发明涵盖用于测定神经毒素多肽的活性的方法,所述方法包括步骤为:a)将通过本发明的方法可获得的神经毒素敏感的、神经元分化的细胞与神经毒素多肽相接触;b)在允许神经毒素多肽发挥其生物学活性的条件下培养步骤a)的神经毒素敏感的、神经元分化的细胞3至74小时或72小时;和c)在根据步骤b)培养后,测定所述细胞中神经毒素多肽的活性。最后,本发明提供包含OptiMEM、FBS、B27补充物、和N2补充物的培养基。

    双荧光团的酶测定法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN106414763A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201480067579.1

    申请日:2014-10-24

    Abstract: 本发明公开了提供用于酶活性的快速、灵敏和准确的基于细胞的测定的组合物和方法,特别是用于与肉毒杆菌毒素相关联的酶活性。本发明提供了一种表达构建体的细胞,其中所述构建体包括锚定域、切割位点,和具有两个或多个相同的报告肽的报告域。酶活性在切割位点将报告域释放进入其中发生多个降解事件的胞质溶胶。在信号中所观察到的变化与酶活性成正比。

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