CK-MB融合蛋白及其制备方法和检测试剂盒

    公开(公告)号:CN107698683A

    公开(公告)日:2018-02-16

    申请号:CN201710271706.5

    申请日:2017-04-24

    申请人: 郑忠亮

    发明人: 郑忠亮

    摘要: 本发明公开了一种CK-MB融合蛋白及其制备方法和检测试剂盒,该融合蛋白由CK-M蛋白和CK-B蛋白通过Loop连接形成,与天然CK-MB蛋白功能相同。其制备方法是将人源性CK-M和CK-B的编码基因序列用Loop的核苷酸碱基偶联在一起,克隆到表达载体得到表达质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,培养产物经过细菌超声波破壁,离心取上清,依次过镍柱、强阴离子交换柱Q柱和Superdex G200分子筛层析柱,得到活性蛋白含量高达85%的高纯度蛋白。本发明采用稀土荧光微球作为标记载体制备了测CK-MB的试剂盒,具有稳定、敏感、定量、简便、快速、结果可靠的特点。

    新颖的基因SMS43
    3.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101952419B

    公开(公告)日:2015-08-19

    申请号:CN200980102071.X

    申请日:2009-01-09

    IPC分类号: C12N9/12 C12P17/04

    CPC分类号: C12P17/04 C12N9/1223

    摘要: 本发明涉及新鉴定出的基因,其编码L-抗坏血酸(下文中也称为维生素C)和/或2-酮-L-古洛酸(下文中也称为2-KGA)合成中涉及的蛋白质。本发明还涉及:包含该新颖基因的全长多核苷酸序列的多核苷酸及其片段,所述多核苷酸编码的新颖的多肽及其片段,以及它们的功能等同物。本发明还涉及所述多核苷酸和多肽作为生物技术工具在从微生物生产维生素C和/或2-KGA中的用途,其中对所述多核苷酸和/或被编码的多肽的修饰对所述微生物中生产所述发酵产物的产率、产量和/或效率有着直接或间接的影响。本发明还包括使用多核苷酸和经修饰的多核苷酸序列转化宿主微生物的方法/工艺。本发明还涉及经过遗传工程改造的微生物及其用于直接生产维生素C和/或2-KGA的用途。

    一种产L-色氨酸基因工程菌及其构建方法与用途

    公开(公告)号:CN105543154A

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201610021610.9

    申请日:2016-01-13

    IPC分类号: C12N1/21 C12N15/70 C12P13/22

    摘要: 本发明涉及微生物领域,公开了一种产L-色氨酸基因工程菌及其构建方法以及用途。本发明通过基因工程的方法改造大肠杆菌的中央碳代谢途径的共有途径,敲除大肠杆菌自身的以磷酸烯醇式丙酮酸为底物的磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统,并增强以非PEP为底物的葡萄糖转运系统,改变葡萄糖转运入胞的路径,获得一种产L-色氨酸基因工程菌,避免了L-色氨酸合成前体物磷酸烯醇式丙酮酸在葡萄糖转运过程中的消耗,从而提高胞内PEP的水平,进而提高菌株发酵产L-色氨酸的能力。实验表明本发明构建的产L-色氨酸基因工程菌为大肠杆菌L-色氨酸高产菌株,能有效积累L-色氨酸,提高L-色氨酸的产量,为L-色氨酸的工业化生产奠定了基础。

    一种适用于磷酸肌酸酶法生产工艺的肌酸激酶突变体

    公开(公告)号:CN104357420A

    公开(公告)日:2015-02-18

    申请号:CN201410716476.5

    申请日:2014-12-02

    IPC分类号: C12N9/12 C12N15/54 C12N15/70

    摘要: 本发明涉及利用基因工程技术对兔肌肌酸激酶进行突变和改造,以改善肌酸激酶在磷酸激酶生产中作为反应催化酶的性能表现。所述方法是利用基因工程技术对兔肌肌酸激酶进行多点突变,以改善肌酸激酶在磷酸肌酸生产中的表现,如酶催化能力、底物亲和力、耐酸碱能力、热稳定性等。本发明的优点在于通过酶突变改造可以极大的提高肌酸激酶在pH8~10,在25~45℃下的磷酸肌酸酶法生产工艺环境中的催化能力,提高了生产效率,降低了生产成本,对于促进酶法生产磷酸肌酸产业有重要意义。