一种多聚磷酸激酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN118813578A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202411259522.3

    申请日:2024-09-10

    Abstract: 本发明提供一种多聚磷酸激酶突变体,以解决ATP再生系统效率低的问题。多聚磷酸激酶突变体是将野生型多聚磷酸激酶的氨基酸突变为Y286Stop或者L290Stop,多聚磷酸激酶突变体比野生型多聚磷酸激酶酶活性高。多聚磷酸激酶突变体转化到大肠杆菌,获得含有多聚磷酸激酶突变体的基因工程菌。以D‑核糖、ATP和烟酰胺为底物,多聚磷酸激酶突变体、核糖激酶、磷酸核糖焦磷酸激酶、烟酰胺磷酸核糖转移酶催化生成NMN。在3小时内使NMN产量分别达到25.2 g/L和23.6 g/L,产率都超过70%,具有广泛的工业应用前景。

    一种以烟酰胺为原料制备烟酰胺单核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN113518782B

    公开(公告)日:2023-09-08

    申请号:CN202080016989.9

    申请日:2020-06-19

    Abstract: 一种以烟酰胺为原料制备烟酰胺单核苷酸的方法,包括:在乙腈、二氯甲烷、1,2‑二氯乙烷或者液态二氧化硫溶剂中,用三氟甲磺酸三甲基硅酯或四氯化锡催化烟酰胺和四乙酰核糖进行反应,调节pH值为3~5,加入甲醇钠溶液,于‑15~5℃进行反应,调节pH值为3~5,用膜浓缩设备进行微滤和纳滤处理,得烟酰胺核糖溶液;在Mg离子、ATP和缓冲液存在的环境中,用烟酰胺核糖激酶催化烟酰胺核糖溶液进行反应,即得烟酰胺单核苷酸。该方法减少了对烟酰胺核糖的精制步骤,工艺更精简、成本更低廉、耗时更短,并且相较于直接采用烟酰胺核糖精制固体的酶催化过程具有更快的反应速度、更低的酶用量等优点。

    一种以烟酰胺为原料制备烟酰胺单核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN113518782A

    公开(公告)日:2021-10-19

    申请号:CN202080016989.9

    申请日:2020-06-19

    Abstract: 一种以烟酰胺为原料制备烟酰胺单核苷酸的方法,包括:在乙腈、二氯甲烷、1,2‑二氯乙烷或者液态二氧化硫溶剂中,用三氟甲磺酸三甲基硅酯或四氯化锡催化烟酰胺和四乙酰核糖进行反应,调节pH值为3~5,加入甲醇钠溶液,于‑15~5℃进行反应,调节pH值为3~5,用膜浓缩设备进行微滤和纳滤处理,得烟酰胺核糖溶液;在Mg离子、ATP和缓冲液存在的环境中,用烟酰胺核糖激酶催化烟酰胺核糖溶液进行反应,即得烟酰胺单核苷酸。该方法减少了对烟酰胺核糖的精制步骤,工艺更精简、成本更低廉、耗时更短,并且相较于直接采用烟酰胺核糖精制固体的酶催化过程具有更快的反应速度、更低的酶用量等优点。

    一种烟酰胺磷酸核糖转移酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN108026517B

    公开(公告)日:2021-05-25

    申请号:CN201680003981.2

    申请日:2016-07-30

    Inventor: 傅荣昭 张琦

    Abstract: 一种烟酰胺磷酸核糖转移酶突变体及其应用,涉及一种通过基因定点突变的方法人工获得的烟酰胺磷酸核糖转移酶突变体及其应用。目的在于解决现有烟酰胺磷酸核糖转移酶的催化活性较低、工业应用价值较低的问题,提供了一系列烟酰胺磷酸核糖转移酶突变体,以及相应的核苷酸序列、表达载体和活体细胞,这些突变体以烟酰胺和PRPP为底物的酶催化活性是其亲本的1.2‑6.9倍,可应用在制备烟酰胺单核苷酸的工艺中。

    酶法工业化生产NAD的方法

    公开(公告)号:CN112437813A

    公开(公告)日:2021-03-02

    申请号:CN201980044066.1

    申请日:2019-06-27

    Inventor: 张章 张琦

    Abstract: 酶法工业化生产NAD的方法,该方法以烟酰胺核糖和ATP为原料,在NAD合成酶存在的条件下进行生物催化反应制备NAD,其中,NAD合成酶包含来源于流感嗜血杆菌的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶结构域以及来源于人类、酿酒酵母、大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌中的任意一种的烟酰胺核糖激酶结构域。该方法可实现以NR和ATP为原料一步催化生产NAD。

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