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公开(公告)号：CN118813578A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202411259522.3
申请日：2024-09-10
Applicant: 邦泰生物工程(深圳)有限公司
Abstract: 本发明提供一种多聚磷酸激酶突变体，以解决ATP再生系统效率低的问题。多聚磷酸激酶突变体是将野生型多聚磷酸激酶的氨基酸突变为Y286Stop或者L290Stop，多聚磷酸激酶突变体比野生型多聚磷酸激酶酶活性高。多聚磷酸激酶突变体转化到大肠杆菌，获得含有多聚磷酸激酶突变体的基因工程菌。以D‑核糖、ATP和烟酰胺为底物，多聚磷酸激酶突变体、核糖激酶、磷酸核糖焦磷酸激酶、烟酰胺磷酸核糖转移酶催化生成NMN。在3小时内使NMN产量分别达到25.2 g/L和23.6 g/L，产率都超过70%，具有广泛的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN118956846A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411392293.2
申请日：2024-10-08
Applicant: 邦泰生物工程(深圳)有限公司
Abstract: 本发明提供一种酪氨酸解氨酶突变体，将野生型酪氨酸解氨酶氨基酸突变为G182I/E472Q，其酶活比野生型提高为258%。将含有酪氨酸解氨酶突变体基因的质粒转化至大肠杆菌中，获得重组工程菌。表达酪氨酸解氨酶突变体用于催化酪氨酸合成对羟基肉桂酸。最佳催化反应条件为：重组工程菌的菌体最佳浓度是50 g/L，温度50℃，pH值8.5。从而提高光刻胶树脂单体关键原料对羟基肉桂酸反应合成效率。
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公开(公告)号：CN119351359A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411583690.8
申请日：2024-11-07
Applicant: 邦泰生物工程(深圳)有限公司
Abstract: 本发明提供一种反式肉桂酸‑4‑羟化酶突变体，将反式肉桂酸‑4‑羟化酶基因与P450还原酶基因导入pET28a载体，构建成融合表达质粒pET‑28a(+)‑C4H‑CPR，定点突变为融合表达质粒pET‑28a(+)‑C4H‑CPR（T112G/R188P/L340I）。转化到大肠杆菌中表达反式肉桂酸‑4‑羟化酶和P450还原酶融合后突变体酶高效催化反式肉桂酸和NADPH合成对羟基肉桂酸。C4H（T112G/R188P/L340I）突变体酶活力由野生型融合蛋白C4H‑CPR酶活力为1.8 U/mg提高到3.6 U/mg。
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公开(公告)号：CN117448250A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311599842.9
申请日：2023-11-28
Applicant: 邦泰生物工程(深圳)有限公司
Abstract: 本发明提供一种高效酶法合成烟酰胺单核苷酸的方法，将PPK2基因和NRK基因构建在同一个pET‑28a(+)载体上，实现2个基因共表达，命名为pET‑28a(+)‑PPK2‑NRK，将质粒pET‑28a(+)‑PPK2‑NRK转到大肠杆菌感受态细胞BL21（ED3）构建重组菌，并进行诱导表达。以NR‑CL、ATP、MgCL2、(NaPO3)6为底物，加入重组菌产生的含PPK2酶和NRK酶的粗酶液催化合成烟酰胺单核苷酸。其中PPK2催化ADP转化为ATP，或者将AMP催化成ADP，再将ADP转化为ATP，使ATP在反应体系中再生循环，NRK催化NR‑CL和ATP合成NMN。称取NR‑CL 390mM，ATP 35mM，MgCL 280 mM，(NaPO3)6 75mM，加适量水溶解，待物质充分溶解后，加入3g/L粗酶液，在40℃恒温水浴锅中，pH7.0条件下反应3h，NMN产量为127.6g/L。
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