公开(公告)号：CN110684673B

公开(公告)日：2022-02-15

申请号：CN201911068722.X

申请日：2019-11-05

申请人： 南京师范大学 ,  天津科技大学

发明人： 黄和 ,  徐晴 ,  刘浩 ,  陆玲霞

IPC分类号： C12N1/14 ,  C12P7/46 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及L‑苹果酸高产菌株及其应用，其分类命名为黑曲霉（Aspergillus niger）L01，保藏编号为CCTCC NO：M 2019458。本发明以购买自中国工业微生物菌种保藏中心（CICC）的黑曲霉Aspergillus niger CICC NO：40567为出发菌株，采用ARTP物理诱变结合自然筛选得到高产L‑苹果酸的突变株Aspergillus nigerL01，该突变株L‑苹果酸的产量高，不仅能解决黄曲霉菌株发酵过程中产生黄曲霉毒素的问题，而且黑曲霉产柠檬酸的工艺目前在工业上已经成熟，可直接利用现有过剩的柠檬酸生产装置，助推企业的转型升级。

公开(公告)号：CN116925933A

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202311009526.1

申请日：2023-08-11

申请人： 天津科技大学

发明人： 刘浩 ,  白春芳 ,  刘蛟

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/31 ,  C07K14/38 ,  C12P7/46 ,  C12R1/685

摘要： 本发明属于生物工程技术领域，公开了一株降低L‑苹果酸发酵过程中副产物琥珀酸的黑曲霉工程菌株，所述黑曲霉工程菌株是敲除了产L‑苹果酸的黑曲霉菌株中特定基因ctp6的黑曲霉工程菌株。本发明克服了现有技术中的不足，现有的利用黑曲霉发酵生产苹果酸的过程中，副产物琥珀酸会伴随着苹果酸的产生而积累，造成后续苹果酸纯化工艺成本的提高，本发明提供了一种ctp6基因敲除的黑曲霉工程菌株，和一种大大减少黑曲霉发酵过程中副产物琥珀酸的方法。本发明显著地减少了黑曲霉发酵生产苹果酸过程中积累的副产物琥珀酸，减少了下游分离纯化苹果酸过程中的成本，为工业化发酵生产苹果酸提供了优良菌株。

公开(公告)号：CN116535309A

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202310385872.3

申请日：2023-04-10

申请人： 南京师范大学

发明人： 黄和 ,  邢明言 ,  张明玉 ,  刘雪 ,  徐晴 ,  薛锋

IPC分类号： C07C51/42 ,  C07C51/47 ,  C07C51/43 ,  C07C55/10

摘要： 本发明涉及发酵液的分离，公开了一种从苹果酸发酵液中提取丁二酸的方法。该方法包括如下步骤：(1)将发酵液固液分离I，收集液相I；(2)将所述液相I和聚合氯化铝、聚丙烯酰胺、硅藻土混合静置后固液分离II、浓缩，收集浓缩液；(3)将所述浓缩液的pH调节至1‑3后，得到酸化液；(4)将所述酸化液固液分离III，得到液相II；(5)将所述液相II脱色、分离，得到丁二酸。该方法不存在有机污染，环境友好，且能够有效提高制得的纯度和收率。

公开(公告)号：CN110029068B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN201910283994.5

申请日：2019-04-10

申请人： 天津科技大学 ,  南京师范大学

发明人： 刘浩 ,  周宇涛 ,  黄和 ,  徐永学 ,  徐晴 ,  曹威

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N15/66 ,  C12P7/46 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3‑磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。

公开(公告)号：CN110684673A

公开(公告)日：2020-01-14

申请号：CN201911068722.X

申请日：2019-11-05

申请人： 南京师范大学 ,  天津科技大学

发明人： 黄和 ,  徐晴 ,  刘浩 ,  陆玲霞

IPC分类号： C12N1/14 ,  C12P7/46 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及L-苹果酸高产菌株及其应用，其分类命名为黑曲霉（Aspergillus niger）L01，保藏编号为CCTCC NO：M 2019458。本发明以购买自中国工业微生物菌种保藏中心（CICC）的黑曲霉Aspergillus niger CICC NO：40567为出发菌株，采用ARTP物理诱变结合自然筛选得到高产L-苹果酸的突变株Aspergillus nigerL01，该突变株L-苹果酸的产量高，不仅能解决黄曲霉菌株发酵过程中产生黄曲霉毒素的问题，而且黑曲霉产柠檬酸的工艺目前在工业上已经成熟，可直接利用现有过剩的柠檬酸生产装置，助推企业的转型升级。

公开(公告)号：CN110029068A

公开(公告)日：2019-07-19

申请号：CN201910283994.5

申请日：2019-04-10

申请人： 天津科技大学 ,  南京师范大学

发明人： 刘浩 ,  周宇涛 ,  黄和 ,  徐永学 ,  徐晴 ,  曹威

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N15/66 ,  C12P7/46 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

摘要： 本发明涉及一种低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株，所述基因工程菌株的构建步骤如下：步骤1，构建异源表达vhb基因质粒；所述基因vhb序列片段由黑曲霉3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子PgpdA控制；步骤2，异源表达vhb基因菌株的获得，即得低溶氧条件下高产有机酸的黑曲霉(Aspergillus niger)基因工程菌株。本发明基于黑曲霉产生有机酸的天然特性，通过遗传重组改造黑曲霉的生理特性，获得了一种黑曲霉基因工程菌株，经过实验证实，该黑曲霉基因工程菌株在低溶氧情况下生产有机酸的能力显著提升，为微生物发酵法制备有机酸提供了优良菌种。