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公开(公告)号：CN116555206A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210114692.7
申请日：2022-01-30
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种D‑氨基酸氧化酶及其在制备L‑草铵膦或其中间体中的应用。一种D‑氨基酸氧化酶，其氨基酸序列与SEQ ID NO:1相比包含选自以下一个或多个的氨基酸残基差异：K29G/H/I/N/Q/W/Y/C/L；V42C/D/E/H/Y；E195N/Y/Q；C234L；V326W；并具有不低于如SEQ ID NO:1的氨基酸序列所示的D‑氨基酸氧化酶的活性和/或热稳定性。本发明提供了一种热稳定性更高的D‑氨基酸氧化酶，在提高酶活性的同时，也扩大了酶的使用温度范围，且在较低温度下使用，能够延长酶的使用寿命；在较高温度下使用，可提高酶的催化效率。
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公开(公告)号：CN116410944A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202111641233.6
申请日：2021-12-29
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种脱氢酶及其在制备(R)‑3‑羟基丁酸酯中的应用。所述脱氢酶相比于SEQ ID NO:1包含如下氨基酸残基差异中的一种或多种：Q97V、H145L和Y188F；且具有不低于氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的野生型脱氢酶的活性。本发明制备得到的脱氢酶在制备(R)‑3‑羟基丁酸甲酯或乙酯的应用中，具有很高的转化率和收率，分别可高达99.8％和95％，且制备得到的产物纯度均大于99％，ee值可高达99.8％。
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公开(公告)号：CN116334162A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202111602506.6
申请日：2021-12-24
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种莱鲍迪苷I的制备方法及应用。一种莱鲍迪苷I的制备方法，在糖基转移酶的存在下将莱鲍迪苷A和糖基供体进行反应，所述糖基转移酶与SEQ ID NO:2相比包含选自以下一个或多个的残基位置处的氨基酸残基差异：第12位氨基酸为Q；第118位氨基酸为S；第265位氨基酸为E；第271位氨基酸为A；第308位氨基酸为N；第333位氨基酸为K；第347位氨基酸为P；第418位氨基酸为D；第455位氨基酸为R；并具有不低于如SEQ ID NO:2的氨基酸序列所示的糖基转移酶活性。本发明提供的制备方法催化效果较好、稳定性较高，且优化了酶法合成莱鲍迪苷I的工艺条件，解决了糖基供体UDPG(和/或ADPG)价格昂贵的问题。
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公开(公告)号：CN116287044A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310435402.3
申请日：2023-04-21
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种D‑苏氨酸醛缩酶在制备D‑丝氨酸中的应用。所述D‑苏氨酸醛缩酶为NCBI登录号WP_054449105.1、WP_063568578.1、WP_192330693.1或WP_033471211.1对应的酶。本发明还公开了一种酶组合、分离的核酸、制备D‑丝氨酸的方法和包含D‑丝氨酸的组合物。本发明公开的D‑苏氨酸醛缩酶或酶组合在制备D‑丝氨酸中具有产率高和产物ee值高的特点，有着潜在的应用价值。
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公开(公告)号：CN115896212A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202111162656.X
申请日：2021-09-30
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种尿苷二磷酸的制备方法。所述制备方法包括以下步骤：(1)在尿苷激酶、ATP或其二钠盐存在的条件下，将尿苷通过尿苷激酶磷酸化得到尿苷酸；(2)在尿苷酸激酶、ATP或其二钠盐存在的条件下，将尿苷酸通过尿苷酸激酶磷酸化得到尿苷二磷酸；所述尿苷激酶为来源于金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)BL21、或者枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的尿苷激酶；所述尿苷酸激酶为来源于细粒海洋海栖菌(Oceanicola granulosus)、大肠杆菌(Escherchia coli)BL21、或者米曲霉菌(Aspergillus oryzae)的尿苷酸激酶。本发明以尿苷为底物，通过生物途径合成尿苷二磷酸，反应效率高，且原料易得，有效提高了尿苷二磷酸的产率，有利于产业化应用。
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![一种6,6-二甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷的制备方法](/CN/2022/1/66/images/202210332264.jpg)
公开(公告)号：CN114805176A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210332264.1
申请日：2022-03-30
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
IPC分类号： C07D209/52
摘要： 本发明公开了一种如式TM所示的6,6‑二甲基‑3‑氮杂双环[3.1.0]己烷的制备方法，其包含下列步骤：有机溶剂中，在硼氢化锌作用下，将如式SM1所示的化合物进行如下所示的还原反应。本发明的制备方法能够降低生产成本、提高了生产安全性，更适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN114277008A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202011038175.3
申请日：2020-09-28
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种(R)‑选择性转氨酶及其应用。所述(R)‑选择性转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或者3所示。本发明使用该酶催化以获得(R)‑1‑Boc‑3‑氨基吡咯烷，转化率至少高达62％，同时ee值保持在99.8％以上，能够有效满足手性胺化合物的需要。
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公开(公告)号：CN114075585A
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202010832445.1
申请日：2020-08-18
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种β‑烟酰胺单核苷酸的制备方法。所述制备方法利用氨基酸序列如NCBI登录号XP_013025941.1、XP_013017940.1、XP_023459718.1、TVY65083.1、KAF4999805.1、XP_024756901.1、XP_018180784.1和/或PMB71451.1所示的烟酰胺核糖核苷激酶，在存在磷酸供体的体系中将烟酰胺核糖和/或烟酰胺核糖氯化物进行磷酸化反应，得到所述β‑烟酰胺单核苷酸。本发明所述的β‑烟酰胺单核苷酸制备方法实现了提高底物浓度的同时维持高转化率、催化时间大幅缩短的效果，有利于以烟酰胺核糖为原料大规模生产β‑烟酰胺单核苷酸并降低生产成本。
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公开(公告)号：CN114075582A
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202010832436.2
申请日：2020-08-18
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明提供了一种D‑核糖‑5‑磷酸的制备方法，其包括使用核糖激酶，将D‑核糖和磷酸供体进行磷酸化反应制得所述D‑核糖‑5‑磷酸，所述核糖激酶的氨基酸序列如NCBI登录号为WP_054396858.1、CCX07771.1、WP_125988536.1和/或WP_160803741.1所示的D‑核糖激酶。还公开了一种酶组合物，其内容见下文。本发明的D‑核糖激酶稳定性和酶活高，利用其制备D‑核糖5‑磷酸具有工艺操作简单、适用于更高的底物浓度、转化率高、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN113583983A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202010369514.X
申请日：2020-04-30
申请人： 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
摘要： 本发明提供了一种融合蛋白或其变体，其包括K1和RhFR，所述K1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述RhFR的氨基酸序列如SEQ ID NO:5的第466‑773位的氨基酸所示。本发明还提供了一种所述融合蛋白或其变体的制备方法和应用。将本发明的融合蛋白或其变体应用于催化VD3合成25‑羟基维生素D3(骨化二醇)时无需额外添加电子传递相关蛋白，操作简便，且所述融合蛋白中的电子传递效率高，催化效率高，所得骨化二醇的产量显著提高，且降低了生产的成本，适于工业化生产。
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