本发明公开了一种脱氢酶及其在制备(R)‑3‑羟基丁酸酯中的应用。所述脱氢酶相比于SEQ ID NO:1包含如下氨基酸残基差异中的一种或多种：Q97V、H145L和Y188F；且具有不低于氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的野生型脱氢酶的活性。本发明制备得到的脱氢酶在制备(R)‑3‑羟基丁酸甲酯或乙酯的应用中，具有很高的转化率和收率，分别可高达99.8％和95％，且制备得到的产物纯度均大于99％，ee值可高达99.8％。