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公开(公告)号：CN115725634A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202111011568.X
申请日：2021-08-31
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种豆血红蛋白的表达盒、含其的表达载体、基因工程菌及其应用。其包括使用含有Fe离子和5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐的培养基培养本发明所述的毕赤酵母基因工程菌。其在含有豆血红蛋白基因表达载体的基因工程菌的培养液中加入了Fe离子和5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐(5‑ALA)，优化了豆血红蛋白诱导表达条件，提高了豆血红蛋白的表达量，相比未优化的培养方案，本发明的培养方案可将豆血红蛋白的表达量提升40％。
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公开(公告)号：CN115678947A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202110853020.3
申请日：2021-07-27
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种NAD+的制备方法及NMNAT的应用。所述NAD+的制备方法包括以下步骤：在反应体系中，使用烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶催化NMN和ATP或其二钠盐，从而合成NAD+，其中所述烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶选自GenBank登录号为WP_137651209.1、SUF38787.1、EAA7244348.1、WP_013799818.1和WP_011972696.1的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶中的一种或多种。所述制备方法可在高浓度底物NMN的情况下高转化率地生产NAD+，大大提升了NAD+的生产效率。
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公开(公告)号：CN111979208B
公开(公告)日：2023-01-10
申请号：CN201910434350.1
申请日：2019-05-23
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种L‑谷氨酸脱氢酶突变体，所述L‑谷氨酸脱氢酶突变体的序列为将SEQ ID NO.1所述序列的第175位氨基酸残基A突变为G，和，第386位氨基酸残基V突变为空间位阻更小的氨基酸残基后的序列。本发明还公开了该L‑氨基酸脱氢酶突变体在制备L‑草铵膦或其盐中的应用。本发明的L‑谷氨酸脱氢酶突变体制备L‑草铵膦或其盐时，与仅在175位或者仅在386突变的L‑谷氨酸脱氢酶突变体相比，比酶活更高，从而酶的作用效率提高，降低了反应的成本，利于工业化生产。
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公开(公告)号：CN115466756A
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202110655349.9
申请日：2021-06-11
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种固定化转氨酶在制备西他列汀和/或(R)‑3‑氨基‑1‑吗啉‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑1‑丁酮中的用途；所述固定化转氨酶包括树脂和转氨酶，所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:49或其变体所示；所述变体为在如SEQ ID NO:5所示氨基酸序列的第241位的R突变为A、H、N、S、L、T、C或M。本发明还提供了一种固定化转氨酶、一种转氨酶及其制备方法和用途。将本发明的转氨酶制备成固定化转氨酶后，将其用于催化酮酰胺底物以生产西他列汀或其中间体时转化率高且立体选择性好、稳定性好、可重复使用率提高、操作更简单，进而降低了生产成本，有利于工业化生产。
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公开(公告)号：CN115418358A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202110610098.2
申请日：2021-06-01
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种糖基转移酶及其应用，所述糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:112或与SEQ ID NO:112具有至少99％序列同一性的氨基酸序列所示。本发明的糖基转移酶的酶活高、稳定性好；将其用于制备甜菊糖苷(例如莱鲍迪苷A、莱鲍迪苷D或莱鲍迪苷M)时与糖基转移酶亲本相比，在催化活性方面有了明显的提高，转化率显著提升，从而降低了反应的成本，利于工业化生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114763569A
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN202110040363.8
申请日：2021-01-13
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
IPC: C12P17/10
Abstract: 本发明提供一种三唑醇的制备方法。所述制备方法包括以下步骤：在反应体系中，利用酮还原酶催化三唑酮即得三唑醇；所述酮还原酶的氨基酸序列的Genbank登录号为AHC30841.1和/或ABB91667.1。本发明还提供酮还原酶在制备三唑醇中的用途。本发明的制备方法采用生物酶催化的方法替代现有技术中的化学方法，安全性高、反应条件温和，生产工艺更加环境友好的同时，所制备得到的产品立体选择性高，制得的三唑醇其有效体A体的含量较高，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN114540456A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202011340227.2
申请日：2020-11-25
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种将(R)‑2‑(苄氧基羰基氨基)‑2‑(氧杂环丁烷‑3‑基)乙酸甲酯转换为(R)‑2‑(苄氧基羰基氨基)‑2‑(氧杂环丁烷‑3‑基)乙酸的酶催化方法以及拆分2‑(苄氧基羰基氨基)‑2‑(氧杂环丁烷‑3‑基)乙酸甲酯的方法。所述酶催化方法中的所述酶包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9和10所示的酶中的一种或多种。发明采用酶催化的拆分方法制得(S)‑2‑(苄氧基羰基氨基)‑2‑(氧杂环丁烷‑3‑基)乙酸甲酯的收率可达30％，且产品ee值高，可达93％以上，经纯化后ee值高达99.5％以上，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN113549563A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202010336666.X
申请日：2020-04-26
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种发酵培养基，用于发酵生产细胞色素P450，包括：基础培养基，包括下列成分：包含甘油的碳源，包含蛋白胨和酵母膏的氮源和无机盐；以及补料培养基，包括下列成分：包含甘油的碳源，包含蛋白胨和酵母膏的氮源和含镁的无机盐。还公开了一种细胞色素P450的发酵生产方法，包括第一次诱导和第二次诱导，其中，在第二次诱导之前、同时和/或之后，降低发酵搅拌转速、通气量、补料速率和发酵温度中的一种或多种，从而降低生产菌体的生长代谢速率。结合本发明中的发酵培养基以及发酵生产方法，能够大幅度提高大肠杆菌发酵细胞色素P450的单位产量，大大缩短发酵周期，从而降低动力消耗和发酵成本，适宜大规模实际应用。
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公开(公告)号：CN107815445B
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN201610818949.1
申请日：2016-09-12
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种干粉型固定化脂肪酶及其生产工艺，具体地本发明提供了一种干粉型固定化猪肝酯酶，所述干粉型固定化猪肝脂肪酶包括猪肝脂肪酶和固定化载体树脂；其中，所述猪肝脂肪酶吸附于所述固定化载体树脂上；并且，所述干粉型固定化猪肝酯酶的含水量(重量)为40％～50％，本发明还提供了所述干粉型固定化猪肝酯酶的制备方法。本发明的固定化猪肝酯酶在有机相中能够表现出极高的催化活性，而且稳定性好，能够多次重复使用。
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公开(公告)号：CN111057687B
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN201910434373.2
申请日：2019-05-23
Applicant: 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种L‑谷氨酸脱氢酶突变体，所述L‑谷氨酸脱氢酶突变体的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.9所示。本发明还公开了该L‑氨基酸脱氢酶突变体在制备L‑草铵膦或其盐中的应用。利用本发明的L‑谷氨酸脱氢酶突变体制备L‑草铵膦或其盐时与野生型谷氨酸脱氢酶突变体相比，比酶活更高，从而酶的作用效率提高，降低了反应的成本，利于工业化生产。
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