公开(公告)号：CN118667858A

公开(公告)日：2024-09-20

申请号：CN202410884238.9

申请日：2024-07-03

申请人： 齐鲁工业大学(山东省科学院) ,  山东星光首创生物科技有限公司

发明人： 朱德强 ,  李昊 ,  甄庚尧 ,  常化难 ,  刘新利 ,  李宁 ,  宁占国 ,  曹建帮 ,  高学秀 ,  魏田慧 ,  陈又铭 ,  周焕霞

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种将聚唾液酸合成大肠杆菌经基因改造为产唾液酸乳糖的方法，属于生物工程技术领域。方法包括：敲除大肠杆菌中的Neu5Ac α‑2,8‑唾液酸转移酶(NeuS)基因，导入唾液酸转移酶基因。通过设计引物扩增NeuS基因的sgRNA序列，得到pTargetF‑sgRNA质粒；利用融合PCR制备重组同源臂片段，转化大肠杆菌并制作感受态细胞，进行电转化获得阳性敲除子。通过添加IPTG和高温培养，消除pTargetF‑sgRNA质粒和pCAS质粒，得到纯净的基因编辑菌株。本方法提高了基因编辑效率和稳定性，实现了高效生产唾液酸乳糖，为其工业化生产提供了新途径。

公开(公告)号：CN118792234A

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202411266269.4

申请日：2024-09-11

申请人： 齐鲁工业大学(山东省科学院)

发明人： 朱德强 ,  常化难 ,  任喜东 ,  刘新利 ,  甄庚尧 ,  徐艳秋 ,  李昊

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/76 ,  C12N15/52 ,  C12N15/55 ,  C12N9/10 ,  C12R1/465

摘要： 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种增强secD和ftsY基因转录水平的谷氨酰胺转氨酶高产菌株及其制备方法。本发明在茂原链霉菌中过表达与蛋白质转运相关的secD或ftsY基因，构建突变菌株，实验结果表明，相比于原始茂原链霉菌，将含有secD的编码基因的片段导入所述茂原链霉菌中形成的突变株GL‑p1以及将含有ftsY的编码基因的片段导入所述茂原链霉菌中形成的突变株GL‑p2均可以大幅提高谷氨酰胺转氨酶的产量。