激素受体阳性乳腺癌复发监测基因突变文库的构建方法

    公开(公告)号:CN106939337A

    公开(公告)日:2017-07-11

    申请号:CN201710170142.6

    申请日:2017-03-21

    Abstract: 本发明公开了一种激素受体阳性乳腺癌复发监测基因突变文库的构建方法,其特征在于:覆盖人类基因KRAS、JAK3、AKT1、CREBBP、PTEN、RB1、TP53、CTNNB1、TSC2、TSC1、ERBB2、PIK3CA、SF3B1、JAK2、CDH1、SMAD4、GATA3、MAP2K4、MAP3K1和ESR1上的总共1357种体细胞突变。本发明的构建方法针对多个靶序列进行单管,快速完成文库的构建,整个文库构建过程仅需要2~3小时,手动时间仅仅需要45分钟即可,可以十分有效的解决目前对于临床上乳腺癌复发监测中在少量的外周血样本基础上需要对体细胞多基因、多靶点检测这一难点,且成本低廉。

    一种诊断卵巢癌的磁性纳米探针的制备方法及检测方法

    公开(公告)号:CN103604920A

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201310627413.8

    申请日:2013-12-02

    CPC classification number: G01N33/54333 G01N33/54346 G01N33/57449

    Abstract: 本发明公开了一种诊断卵巢癌的磁性纳米探针的制备方法,步骤如下:(1)磁性纳米粒子的制备与表征;(2)磁性纳米粒子的硅烷化及氨基化修饰与表征;(3)采用氨基硅烷化的磁性纳米粒子,经戊二醛活化后,与CA125单抗交联制备卵巢癌磁性纳米探针。同时,本发明还公开了一种诊断卵巢癌的检测方法。本发明制备的磁性纳米探针,磁性粒子体积小可吸附更多抗原或抗体,因磁性微粒子核心为铁,在磁场中下沉速度快,易进行洗涤和固相载体分离;可特异性的捕获早期卵巢癌患者外周血中的CA125,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对富集后的样品进行检测,构建一种基于纳米探针在卵巢癌预警及早期诊断的方法。

    应用iTRAQ技术研究三阴性乳腺癌外泌体差异表达蛋白的方法

    公开(公告)号:CN109060989B

    公开(公告)日:2021-07-30

    申请号:CN201810997414.4

    申请日:2018-08-29

    Abstract: 本发明公开了一种应用iTRAQ技术研究三阴性乳腺癌外泌体差异表达蛋白的方法,包含以下步骤:(1)外泌体及外泌体蛋白质的提取处理;(2)对步骤(1)所得外泌体蛋白样品进行酶解和除盐得到多肽;(3)对步骤(2)所得多肽进行iTRAQ标记、混合;(4)对步骤(3)标记的多肽肽段混合物进行HPLC分离及LC‑MS分析;(5)对上述所得到质谱鉴定结果进行生物信息学分析、定量分析获取三阴性乳腺癌外泌体的差异表达蛋白。本发明提供的iTRAQ技术结合MS/MS技术能快速有效进行三阴性乳腺癌外泌体蛋白质组的研究,为研究三阴性乳腺癌的疾病机制以及发现三阴性乳腺癌相关的生物标志物提供参考。

    激素受体阳性乳腺癌复发监测基因突变文库的构建方法

    公开(公告)号:CN106939337B

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN201710170142.6

    申请日:2017-03-21

    Abstract: 本发明公开了一种激素受体阳性乳腺癌复发监测基因突变文库的构建方法,其特征在于:覆盖人类基因KRAS、JAK3、AKT1、CREBBP、PTEN、RB1、TP53、CTNNB1、TSC2、TSC1、ERBB2、PIK3CA、SF3B1、JAK2、CDH1、SMAD4、GATA3、MAP2K4、MAP3K1和ESR1上的总共1357种体细胞突变。本发明的构建方法针对多个靶序列进行单管,快速完成文库的构建,整个文库构建过程仅需要2~3小时,手动时间仅仅需要45分钟即可,可以十分有效的解决目前对于临床上乳腺癌复发监测中在少量的外周血样本基础上需要对体细胞多基因、多靶点检测这一难点,且成本低廉。

    肿瘤细胞DNA损伤修复相关基因捕获测序的探针制备方法

    公开(公告)号:CN108148891A

    公开(公告)日:2018-06-12

    申请号:CN201810180473.2

    申请日:2018-03-05

    Abstract: 本发明公开了一种肿瘤细胞DNA损伤修复相关基因捕获测序的探针制备方法,该方法中目标基因包括58个肿瘤细胞DNA损伤修复相关基因;该方法至少包括如下步骤:步骤1:制备58个HRD基因全外显子区域探针;步骤2:捕获58个目标基因DNA;步骤3:进行洗脱程序;步骤4:PCR反应体系进行捕获目标DNA后扩增;步骤5:扩增产物用磁珠纯化后,用qubit定量至20ng/ul,分装保存。本发明的探针制备方法针对58个基因捕获,结合高通量测序平台可以十分有效的解决目前对于临床上乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌及前列腺癌等同源重组修复缺陷多基因的捕获检测。

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