一种组成型剪接报告基因影像探针及其制备方法

    公开(公告)号:CN110317806B

    公开(公告)日:2021-06-04

    申请号:CN201910372877.6

    申请日:2019-05-06

    摘要: 本发明公开了一种组成型剪接报告基因影像探针及其制备方法,所述的探针包括载体pcDNA3.1、基因片段A、B、C,所述的基因片段A、B、C按照A‑B‑C顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组,所述的片段A由Exon1和Intron1组成,所述的片段B为Rluc,所述的片段C由Exon2和Intron2组成。所述的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明的报告基因分子影像探针可以模拟活体pre‑mRNA加工为成熟mRNA的过程,为模拟活体pre‑mRNA加工过程的动态变化提供了一种实时、无创的监测工具,同时为作用于剪接体的药物研究提供了有效的筛选工具。

    对称五甲川菁染料及其在分子影像中的应用

    公开(公告)号:CN103146220A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201210436931.7

    申请日:2012-10-25

    IPC分类号: C09B23/16 A61K49/00

    摘要: 一类具有通式I结构的对称五甲川菁染料及其在分子影像中的应用,属于有机化合物和光学分子影像技术领域。通式I中X为Cl或S(CH2)nCOOH或II;R1为C1-6烷基,(CH2)pOR3或(CH2)pC6H5;R2为H、甲基、羟基、卤素、硝基、苄氧基、烷氧基或水溶性基团SO3R4;R4为H或钠离子或钾离子;Y-为卤素离子或PF6-或TsO-。通过对称合成方法制备了具有通式I的五甲川菁染料荧光探针,解决了不对称合成方法步骤繁琐、副产物、产率低的问题。该类染料具有毒性低、活细胞膜通透性、光稳定性良好等优点,可用于标记活细胞及在体分子影像领域中应用。

    一种冻存液及其用途
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN105850983A

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201610305756.6

    申请日:2016-05-10

    IPC分类号: A01N1/02

    CPC分类号: A01N1/0221

    摘要: 本发明公开了一种冻存液及其用途,本发明的冻存液含有体积百分含量为5%?25%的甘油,2%?10%的二甲基亚砜,45%?65%的S Buffer,余量为去离子水。本发明的冻存液在甘油和S Buffer体系中首次加入一定浓度配比的二甲基亚砜,在保存秀丽隐杆线虫时,线虫的存活率和反复冻融后的复苏率显著提高,极高的复苏率有效地保证了后续实验研究的进行,同时能够反复冻存使用的线虫在一定程度上降低了线虫培养保存的成本,极大地提高了冻存线虫的利用率;本发明的冻存液保存秀丽隐杆线虫,方法简单,效果显著,无需液氮,节约了成本。

    一种检测细胞凋亡的HSV1-TK分子影像探针

    公开(公告)号:CN103834740B

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201410098159.1

    申请日:2014-03-17

    摘要: 本发明公开了一种检测细胞凋亡的HSV1-TK分子影像探针及其构建方法和应用。本发明提供的HSV1-TK探针的制备方法,其步骤包括:(1)用限制性内切酶HindIII和XhoI酶切载体pcDNA3.1,使其线性化;(2)PCR扩增DnaE的C端,TK基因的C端,DEVD序列,TK基因的N端,蛋白内含子DnaE的N端。(3)通过基因重组技术将各个片段按一定顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组;(4)重组载体经过转化、提取质粒、酶切鉴定,获得HSV1-TK探针。本发明的分子影像探针可以活体监测细胞凋亡的发生发展,克服了电子显微镜或流式细胞术等技术只能在离体水平观察细胞凋亡的缺点,为活体监测提供了一个有利工具。

    对称五甲川菁染料及其在分子影像中的应用

    公开(公告)号:CN103146220B

    公开(公告)日:2014-08-06

    申请号:CN201210436931.7

    申请日:2012-10-25

    IPC分类号: C09B23/16 A61K49/00

    摘要: 一类具有通式I结构的对称五甲川菁染料及其在分子影像中的应用,属于有机化合物和光学分子影像技术领域。通式I中X为Cl或S(CH2)nCOOH或II;R1为C1-6烷基,(CH2)pOR3或(CH2)pC6H5;R2为H、甲基、羟基、卤素、硝基、苄氧基、烷氧基或水溶性基团SO3R4;R4为H或钠离子或钾离子;Y-为卤素离子或PF6-或TsO-。通过对称合成方法制备了具有通式I的五甲川菁染料荧光探针,解决了不对称合成方法步骤繁琐、副产物、产率低的问题。该类染料具有毒性低、活细胞膜通透性、光稳定性良好等优点,可用于标记活细胞及在体分子影像领域中应用。

    一种靶向转运microRNA的多功能磁性纳米载体及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102631687A

    公开(公告)日:2012-08-15

    申请号:CN201210137549.6

    申请日:2012-05-07

    摘要: 本发明涉及一种靶向转运microRNA的多功能磁性纳米载体的制备方法及其应用。其制备方法包括以下步骤:首先制备右旋糖苷包裹的氨基化的四氧化三铁磁性纳米颗粒,然后将荧光染料与纳米颗粒交联,接着通过一个连接剂将特异性单克隆抗体连接到纳米颗粒上,最后将microRNA也通过连接剂连接到纳米颗粒上,最终得到可用于光学和磁共振成像的microRNA磁性纳米载体。本发明可通过单克隆抗体的特异性介导纳米粒进入肿瘤细胞,所载的microRNA分子能够抑制肿瘤细胞生长,具有抗肿瘤作用,同时由于磁性纳米载体上修饰了荧光标记和磁性纳米颗粒能够作为磁共振成像技术的造影剂,故可利用近红外荧光成像和磁共振成像相结合的双模态成像技术实时监测microRNA在体内的转运途径和对肿瘤的治疗效果。

    一种在体无创监测microRNA表达的双模态成像报告基因的方法

    公开(公告)号:CN102533834A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201110334119.9

    申请日:2012-03-08

    IPC分类号: C12N15/66 C12N15/65

    摘要: 本发明涉及一种在体无创监测microRNA表达的双模态成像报告基因的方法,其提供了microRNA表达调控相关研究的分子成像报告基因系统,为深入研究microRNA在组织细胞内的表达水平及其对生命活动的调控功能奠定了基础。本发明采用的技术方案为(1)利用人钠/碘共同转运体基因能够吸收放射性碘而作为报告基因用于核素成像的特性,将hNIS基因克隆到质粒pcDNA3.1多克隆位点上,从而得到质粒pcDNA3.1-hNIS;(2)利用萤光虫萤光素酶可以作为报告基因用于生物发光成像的特性,将Fluc基因克隆到pcDNA3.1-hNIS上,使hNIS和Fluc基因能够融合表达,从而获得pcDNA3.1-Fluc-hNIS;(3)利用microRNA与靶标mRNA通过碱基互补配对的形式相互作用的特性,将与microRNA-16完全互补配对的三段串联重复序列克隆到pcDNA3.1-Fluc-hNIS上,从而获得双模态成像报告基因pcDNA3.1-Fluc-hNIS-3xmir16TS。