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公开(公告)号：CN1611598A
公开(公告)日：2005-05-04
申请号：CN200410026136.6
申请日：2004-05-17
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种人胎儿胰腺干细胞系及其建立方法，人胎儿胰腺上皮样干细胞来源于正常流产胎儿胰腺组织，体外培养能无限克隆，且具有多向分化潜能；经形态特征、生长特性、免疫组化特征、RT－PCR特征、定向诱导分化特征、染色体核型、DNA序列测定及分析，证明该胎儿胰腺干细胞是人源性胎儿胰腺干细胞；本发明可为研究哺乳动物胰腺发育、糖尿病的产生以及再造胰岛微小器官治疗糖尿病提供丰富的种子细胞，为建立人和哺乳动物胰腺干细胞系提供了一种有效可靠的方法。
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公开(公告)号：CN1563366A
公开(公告)日：2005-01-12
申请号：CN200410026031.0
申请日：2004-04-09
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种用表皮干细胞构建的人工角膜上皮植片的制备及用于移植修复因角膜缘干细胞缺损而失明的眼表的用途。表皮干细胞构建的人工角膜上皮植片，无菌采取成人颈部或关中奶山羊耳缘皮肤，用组块培养法和克隆筛选法分离纯化表皮干细胞，用无血清培养基进行扩增，并对所获干细胞进行CK19、P63、integrin－β1等表皮干细胞的标志蛋白免疫组织化学检测；再将纯化的表皮干细胞接种在去上皮细胞的人类羊膜支架上，无血清培养基培养，培养21天后，表皮干细胞在羊膜上分化形成复层，成为表皮干细胞羊膜植片；经透射电镜观察，表皮干细胞分为5－6层细胞；具有正常角膜上皮相似结构。以羊为实验动物模型进行自体或同种异体表皮干细胞羊膜植片移植均取得良好效果。
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公开(公告)号：CN101928694A
公开(公告)日：2010-12-29
申请号：CN200910023046.4
申请日：2009-06-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种人羊水干细胞系的建立方法，该方法包括以下步骤：1)羊水干细胞的原代分离培养；2)将分离培养的原代羊水干细胞进行分离纯化；3)将分离得到的羊水干细胞经过单克隆筛选和扩增培养，建立羊水干细胞系。本发明提供了一种快速、有效、安全、可实现人羊水干细胞体外长期扩增、可为组织工程研究提供新的种子细胞来源以及有望作为种子细胞进行临床应用的人羊水干细胞系的建立方法。
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公开(公告)号：CN101735985A
公开(公告)日：2010-06-16
申请号：CN200910218984.X
申请日：2009-11-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867
Abstract: 本发明公开了一种产生诱导性多能干细胞(iPSCs)方法，该干细胞利用转录因子转染牛体细胞获得的，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题，而且还避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。
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公开(公告)号：CN101705248A
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200910218982.0
申请日：2009-11-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101812480A
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN200910218981.6
申请日：2009-11-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/867
Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导性多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的策略，不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。
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公开(公告)号：CN1865436B
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200610041977.3
申请日：2006-03-27
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种分离纯化皮肤表皮干细胞的方法，在皮肤组织块培养过程中采用自行设计的培养基能有效抑制成纤维细胞的生长，从组织块四周生长出均一的上皮样细胞，诱发表皮干细胞迁移出原来的微环境，在新生成的上皮样细胞层上重新聚集生长。这类克隆性生长的细胞与其共生的上皮样细胞有明显形态学上的差别。借助解剖镜和玻璃针就能将其挑选出来，进行单独扩增培养。对所获得细胞进行当前同行公认的表皮干细胞分子标志的检测：CK19，β1-integrin，P63，α6-integrin均为阳性，即证明所分选的是纯化的表皮干细胞。本发明克服了传统酶消化法的缺点，直接利用干细胞的生物学行为获得纯化的表皮干细胞，可用于人类和哺乳动物表皮干细胞的分离纯化。
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公开(公告)号：CN1242058C
公开(公告)日：2006-02-15
申请号：CN200410026031.0
申请日：2004-04-09
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种用表皮干细胞构建的人工角膜上皮植片的制备及用于移植修复因角膜缘干细胞缺损而失明的眼表的用途。表皮干细胞构建的人工角膜上皮植片，无菌采取成人颈部或关中奶山羊耳缘皮肤，用组块培养法和克隆筛选法分离纯化表皮干细胞，用无血清培养基进行扩增，并对所获干细胞进行CK19、P63、integrin-β1等表皮干细胞的标志蛋白免疫组织化学检测；再将纯化的表皮干细胞接种在去上皮细胞的人类羊膜支架上，无血清培养基培养，培养21天后，表皮干细胞在羊膜上分化形成复层，成为表皮干细胞羊膜植片；经透射电镜观察，表皮干细胞分为5-6层细胞；具有正常角膜上皮相似结构。以羊为实验动物模型进行自体或同种异体表皮干细胞羊膜植片移植均取得良好效果。
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公开(公告)号：CN101705247B
公开(公告)日：2012-06-06
申请号：CN200910218980.1
申请日：2009-11-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性转录因子基因的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。
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