公开(公告)号：CN101812480B

公开(公告)日：2013-04-10

申请号：CN200910218981.6

申请日：2009-11-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 吕长荣 ,  陈冬梅 ,  辛晓玲 ,  窦忠英

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/06 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导性多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的策略，不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

公开(公告)号：CN101705247A

公开(公告)日：2010-05-12

申请号：CN200910218980.1

申请日：2009-11-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 吕长荣 ,  陈冬梅 ,  辛晓玲 ,  窦忠英

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性转录因子基因的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

公开(公告)号：CN101705247B

公开(公告)日：2012-06-06

申请号：CN200910218980.1

申请日：2009-11-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 吕长荣 ,  陈冬梅 ,  辛晓玲 ,  窦忠英

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性转录因子基因的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

公开(公告)号：CN101705248B

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN200910218982.0

申请日：2009-11-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈冬梅 ,  吕长荣 ,  辛晓玲 ,  窦忠英

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

公开(公告)号：CN101812480A

公开(公告)日：2010-08-25

申请号：CN200910218981.6

申请日：2009-11-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈冬梅 ,  吕长荣 ,  辛晓玲 ,  窦忠英

IPC: C12N15/867

Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导性多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的策略，不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

公开(公告)号：CN101735985A

公开(公告)日：2010-06-16

申请号：CN200910218984.X

申请日：2009-11-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 吕长荣 ,  陈冬梅 ,  辛晓玲 ,  窦忠英

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867

Abstract: 本发明公开了一种产生诱导性多能干细胞(iPSCs)方法，该干细胞利用转录因子转染牛体细胞获得的，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题，而且还避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

公开(公告)号：CN101705248A

公开(公告)日：2010-05-12

申请号：CN200910218982.0

申请日：2009-11-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈冬梅 ,  吕长荣 ,  辛晓玲 ,  窦忠英

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法，具体包括下列步骤：1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养；2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建；3)逆转录病毒的包装与准备；4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法，不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题，而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。