一种诱导性多能干细胞及其制备方法

    公开(公告)号:CN101735985A

    公开(公告)日:2010-06-16

    申请号:CN200910218984.X

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种产生诱导性多能干细胞(iPSCs)方法,该干细胞利用转录因子转染牛体细胞获得的,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法,不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题,而且还避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

    利用转录因子转染牛体细胞成为诱导性多能干细胞的方法

    公开(公告)号:CN101705248A

    公开(公告)日:2010-05-12

    申请号:CN200910218982.0

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法,不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题,而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

    利用转录因子转染牛体细胞成为诱导性多能干细胞的方法

    公开(公告)号:CN101812480B

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN200910218981.6

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导性多能干细胞(iPSCs)的方法,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的策略,不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题,而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

    利用转录因子转染牛体细胞成为诱导性多能干细胞的方法

    公开(公告)号:CN101705247A

    公开(公告)日:2010-05-12

    申请号:CN200910218980.1

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性转录因子基因的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法,不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题,而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

    利用转录因子转染牛体细胞成为诱导性多能干细胞的方法

    公开(公告)号:CN101705247B

    公开(公告)日:2012-06-06

    申请号:CN200910218980.1

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性转录因子基因的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法,不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题,而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

    利用转录因子转染牛体细胞成为诱导性多能干细胞的方法

    公开(公告)号:CN101705248B

    公开(公告)日:2012-03-21

    申请号:CN200910218982.0

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的诱导性多能干细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的方法,不但解决了动物特别是如牛、羊、猪等家畜多能性干细胞难以获得的技术难题,而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

    利用转录因子转染牛体细胞成为诱导性多能干细胞的方法

    公开(公告)号:CN101812480A

    公开(公告)日:2010-08-25

    申请号:CN200910218981.6

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导性多能干细胞(iPSCs)的方法,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性基因转录因子的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;4)逆转录病毒感染牛皮肤成纤维细胞以及牛的iPS细胞的获得。本发明首次采用脱细胞后人羊膜作为支持物代替小鼠胚胎成纤维细胞来维持牛iPSCs体外增殖并长期保持未分化的多能性状态。这种采用基因诱导产生多能性干细胞的策略,不但解决了家畜特别是牛多能性干细胞难以获得的技术难题,而且避免了应用鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞的饲养层所带来的异种动物细胞污染问题。

    一种外分泌的监测方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN103126781A

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201310029048.0

    申请日:2013-01-15

    Abstract: 本发明适用于动物体内分泌的监测领域,提供了一种外分泌的监测方法,所述方法包括:对动物肌肉注射硫酸阿托品,并进行全身麻醉,找到胰腺及十二指肠;将所述胰腺的胰管所在的一段十二指肠剪断,插入T型管并缝合分离肠段两端;将剩余的十二指肠两端进行肠吻合,并在所述肠吻合处下游插入另一T型管,围绕T型管做荷包缝合;将所述两个T型管管口用止血钳夹住、取出并缝合腹膜、膜间肌肉及皮肤。本发明通过对活体动物监测胰液分泌,最大限度地排除其它因素对胰液各种酶活性的影响,同时,收集胰液取样后,剩余胰液可回流至十二指肠,尽可能地还原奶牛自身消化系统运转,本方法避免屠宰,节省试验成本,实时监测奶牛胰腺外分泌功能变化。

    一种治疗动物外伤感染性疾病的药物

    公开(公告)号:CN103083502A

    公开(公告)日:2013-05-08

    申请号:CN201310029046.1

    申请日:2013-01-15

    Inventor: 吕长荣 乔海莲

    Abstract: 本发明公开了一种治疗动物外伤感染性疾病的药物,是由下列重量份的原料药制成:广丹5~25份、结晶磺胺5~40份、乳香1~10份、没药1~10份、血竭2~20份、冰片0.5~5份、轻粉0.5~5份;本药物主要具有抑菌抗感染,散血祛瘀,消肿止痛、解毒敛疮、去腐生肌和促进伤口愈合的作用。对于动物各种原因导致的外伤感染,如刀伤、咬伤、蜂窝织炎、犬肛门腺脓肿、齿槽瘘管、牛腐蹄病、腮腺脓肿、体表溃疡、肌肉腐烂以及陈旧难愈创伤都有非常显著的疗效。

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