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公开(公告)号：CN114807095B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202210481149.0
申请日：2022-05-05
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于蛋白质工程改造领域，具体涉及几丁质酶突变体及应用。本发明通过对苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）来源的几丁质酶进行改造，其相对于原始氨基酸序列，将其第293位氨基酸由Asn变为Trp，且第299位氨基酸由Ala变为Arg，并构建该突变体的地衣芽胞杆菌表达菌株。所构得的地衣芽胞杆菌工程菌株的几丁质酶活力达到144.63 U/mL，相比原始几丁质酶表达菌株提高了31％。
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公开(公告)号：CN114891820B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202210595170.3
申请日：2022-05-28
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一种高效合成羟基酪醇的地衣芽胞杆菌、构建方法及其应用。本发明首先在地衣芽胞杆菌DW2基础上进一步进行多种改造，获得重组地衣芽胞杆菌DH7；选择来源于大肠杆菌中的4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶和乳酸乳球菌的酮酸脱羧酶，将其转入到地衣芽胞杆菌DH7底盘细胞中，实现了羟基酪醇产量的从头合成；通过组合表达4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶HpaBC和酮酸脱羧酶KivD突变体，使得所述重组地衣芽胞杆菌利用葡萄糖等廉价碳源可以高效合成羟基酪醇，产量高达5.55±0.37。本发明公开的重组地衣芽胞杆菌可以解决羟基酪醇产量低，价格昂贵的问题，具有广阔的工业前景。
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公开(公告)号：CN115786382A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211412825.5
申请日：2022-11-11
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程领域，公开了一种提高了谷氨酸脱羧酶酶活的地衣芽胞杆菌工程菌的构建方法及应用。申请人强化了地衣芽胞杆菌DW2内源二硫键氧化还原酶，并在地衣芽胞杆菌基因组上整合了二硫键氧化还原酶。将GAD的编码基因与二硫键异构酶进行共表达，成功构建了能够高表达谷氨酸脱羧酶的重组质粒。将其转入上述构建好的地衣芽胞杆菌DW2底盘细胞中进行高效表达，得到了能够提高谷氨酸脱羧酶酶活的重组工程菌，GAD酶活达到57.6 U·mL‑1，本发明所构建的工程菌对提升GAD酶活方面效果显著，为高效生产GABA提供了新思路，为实现生产食品级GABA奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114287422A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202210017545.8
申请日：2020-08-04
申请人： 湖北大学 , 湖北省烟草科学研究院
IPC分类号： A01N27/00 , A01N43/10 , A01P21/00 , A01P1/00 , A01N65/12 , C07C7/00 , C07C13/21 , C07D333/08 , A01C1/00
摘要： 本发明属于生物技术领域，尤其涉及柠檬烯在制备烟草种子萌发促进剂或抑制剂中的应用。本发明研究了各种提取方法提取的万寿菊根茎中的活性物质对青枯菌的作用，确定万寿菊根茎中柠檬烯，α‑三联噻吩为具有抑制青枯病的活性物质，并提供了相应的制备方法。进一步验证在烟草盆栽试验中柠檬烯、α‑三联噻吩对青枯菌HF‑1‑1的防效，发现在烟苗生长的第9周，α‑三联噻吩对HF‑1‑1的抑制效果为28.63％，而柠檬烯对HF‑1‑1的防效达到62.27％。由此奠定了植物源杀菌物质——万寿菊根茎提取物柠檬烯对烟草土传病害的防治基础。
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公开(公告)号：CN113697955A
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN202110985626.2
申请日：2021-08-26
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C02F3/30 , C02F3/34 , C02F101/16
摘要： 本发明提供采用B.licheniformis促进P.stutzeri好氧反硝化的方法，通过以接种量比例为1:0.1～1:5.0将B.licheniformis接种到好氧反硝化微生物P.stutzeri的反硝化体系中实现，体系中的电子供体和受体分别是葡萄糖和硝酸盐，将好氧瓶置于20～35℃的摇床中培养。本发明中培养基的碳氮比为1～15，于溶解氧为4.0～8.0O2mg/L下对硝酸盐进行去除。本发明利用B.licheniformis提高P.stutzeri的膜转运能力促进好氧反硝化脱氮，成本低，无二次污染，硝酸盐去除效果明显提高，减少了亚硝酸盐和一氧化二氮的积累，提高总氮去除效率。
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公开(公告)号：CN112481157A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011348405.6
申请日：2020-11-26
申请人： 湖北省烟草科学研究院 , 湖北大学
摘要： 本发明属于烟草青枯病防治技术领域，尤其涉及烟草化感自毒物质降解菌、复合菌剂可湿性粉剂及应用。本发明通过筛选能够降解化感自毒物质的降解菌，最终针对化感自毒物质邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二异丁酯、苯甲酸、3‑甲氧基‑4‑羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛或2,4‑二叔丁基苯酚获得六株降解菌，将其应用于烟草青枯病的防治能够避免通过物理方法和化学方法产生对环境有害的物质，同时降解菌利用化感物质作为营养成分，使得土壤中的化感自毒物质含量减少，从而减少了化感自毒物质对青枯菌的刺激生长效应，切断了化感自毒物质对青枯菌的趋化诱导效应。
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公开(公告)号：CN112262855A
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN202011171734.8
申请日：2020-10-28
申请人： 湖北省烟草科学研究院 , 湖北大学
摘要： 本发明属于植物病害防治技术领域，尤其涉及一种防治烟草青枯病的方法及NaHS在防治烟草青枯病菌中的应用。本发明通过平板和摇瓶实验对烟草青枯雷尔氏菌生长效果进行测定，发现NaHS对青枯病病原菌的生长具有抑制效果；检测不同浓度NaHS对烟草青枯病发病率的影响，结果也说明了NaHS对烟草抗青枯病具有良好作用。本发明还从青枯菌在烟草根部定殖情况、烟草抗青枯病相关基因表达以及土壤微生态的研究各个方面证实了NaHS对烟草青枯病菌的抑菌效果。本发明首次发现并证明了NaHS是抗青枯病原菌的有效抑菌物质，为烟草青枯病的防治提供了新方法，为H2S开发利用及推进烟草青枯病的防治提供理论和实践依据。
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公开(公告)号：CN112226437A
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN202011153718.6
申请日：2020-10-26
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75
摘要： 本发明涉及基因工程和微生物蛋白表达领域，公开了梯度调控芽胞杆菌启动子启动效率的序列组合及应用。本发明以地衣芽胞杆菌DW2杆菌肽合成基因簇启动子PbacA为基础，将启动子PylB、Pndh的5’UTR分别替换PbacA的5’UTR、以获得一组适用于芽胞杆菌的强、中和弱启动子（PUbay、PbacA、PUndh）。接着，以绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白GFP、角蛋白酶KER为目的蛋白，梯度型启动子PUndh(弱)、PbacA(中)、PUbay(强)分别实现不同蛋白在不同芽胞杆菌(地衣芽胞杆菌DW2、解淀粉芽胞杆菌HZ‑12、枯草芽胞杆菌168)中的不同表达水平的表达。
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公开(公告)号：CN112063673A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010951329.1
申请日：2020-09-11
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于发酵工程技术领域，特别是涉及到适用于解淀粉芽孢杆菌发酵高产伊枯草菌素A的培养基和应用。所述的发酵培养基组成：玉米淀粉20‑60 g/L、豆粕40‑90 g/L、花生粕5‑20 g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5 g/L、硫酸亚铁0.2 g/L、硫酸锰0.02 g/L，pH 6.20。以本发明提供的特定培养基配方和培养条件对解淀粉芽孢杆菌LX‑12进行发酵验证，伊枯草菌素A产量达到5.43 g/L，相对于原始培养基（3.26g/L）提高了66.56%，产量显著提高。本发明工艺具有原料便宜易得、培养基组成简单、环保和产量高等优势，具有一定的应用前景。
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公开(公告)号：CN110951797B
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN201911236047.7
申请日：2019-12-05
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，公开了消化链球菌谷氨酸脱氢酶GdhA在提高地衣芽胞杆菌聚γ‑谷氨酸产量中的应用。本发明通过同源重组的方式，将来源于消化链球菌(Peptostreptococcus asaccharolyticus)中的谷氨酸脱氢酶GdhA替换地衣芽胞杆菌WX‑02(Baclicus lincheniformis)自身的谷氨酸脱氢酶，显著提高了地衣芽胞杆菌聚γ‑谷氨酸合成水平，获得菌株聚γ‑谷氨酸产量相较于对照菌株至少提高了20%以上。本发明为聚γ‑谷氨酸的高效生产提供了一种新策略。
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