公开(公告)号：CN110846290B

公开(公告)日：2022-11-18

申请号：CN201911236056.6

申请日：2019-12-05

申请人： 湖北大学

发明人： 陈守文 ,  张蒙 ,  蔡冬波 ,  杨帆 ,  陈耀中 ,  张清 ,  马昕

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12P13/02 ,  C12N1/21 ,  C12R1/10

摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，公开了二氢硫辛酸脱氢酶突变体P213R在地衣芽胞杆菌聚γ‑谷氨酸合成中的应用。本发明通过基因组上定点突变的方式，将来源于地衣芽胞杆菌WX‑02（Baclicus lincheniformis WX‑02）二氢硫辛酸脱氢酶PdhD的第213位脯氨酸编码的碱基CCA改为CGG，即213位由脯氨酸改成精氨酸，显著提高了聚γ‑谷氨酸合成水平，突变菌株聚γ‑谷氨酸产量相较于对照菌株至少提高了21%以上。本发明为聚γ‑谷氨酸的高效生产提供了一种新策略。

公开(公告)号：CN111549050B

公开(公告)日：2021-09-17

申请号：CN202010417161.6

申请日：2020-05-18

申请人： 湖北大学

发明人： 陈守文 ,  张清 ,  蔡冬波 ,  陈耀中 ,  杨帆 ,  马昕

IPC分类号： C12N15/75 ,  C12N15/31 ,  C12P13/02 ,  C12P21/04 ,  C12R1/125 ,  C12R1/07 ,  C12R1/10

摘要： 本发明属于生物技术与发酵工程领域，提供了适用于芽胞杆菌的透明颤菌血红蛋白表达框及应用，本发明将透明颤菌血红蛋白VHb与枯草芽胞杆菌中YwbN的信号肽SPywbN以及枯草芽胞杆菌启动子P43、地衣芽胞杆菌中淀粉酶终止子TamyL相连，组成VHb蛋白表达框P43‑SPywbN‑vhb‑TamyL。将该表达框应用于三种芽胞杆菌（枯草芽胞杆菌168、解淀粉芽胞杆菌LX‑12、地衣芽胞杆菌DW2）中，与常规的单独强化表达VHb菌株相比，分别使得聚γ‑谷氨酸、伊枯草菌素A、杆菌肽的产量提高21.85%、18.77%和23.40%，本发明为透明颤菌血红蛋白VHb在芽胞杆菌中高效表达和广泛应用提供了理论指导。

公开(公告)号：CN110951797B

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN201911236047.7

申请日：2019-12-05

申请人： 湖北大学

发明人： 陈守文 ,  杨帆 ,  蔡冬波 ,  陈耀中 ,  张清 ,  马昕 ,  陈建刚

IPC分类号： C12N9/06 ,  C12P13/02 ,  C12N1/21 ,  C12R1/10

摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，公开了消化链球菌谷氨酸脱氢酶GdhA在提高地衣芽胞杆菌聚γ‑谷氨酸产量中的应用。本发明通过同源重组的方式，将来源于消化链球菌(Peptostreptococcus asaccharolyticus)中的谷氨酸脱氢酶GdhA替换地衣芽胞杆菌WX‑02(Baclicus lincheniformis)自身的谷氨酸脱氢酶，显著提高了地衣芽胞杆菌聚γ‑谷氨酸合成水平，获得菌株聚γ‑谷氨酸产量相较于对照菌株至少提高了20%以上。本发明为聚γ‑谷氨酸的高效生产提供了一种新策略。

公开(公告)号：CN111549050A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010417161.6

申请日：2020-05-18

申请人： 湖北大学

发明人： 陈守文 ,  张清 ,  蔡冬波 ,  陈耀中 ,  杨帆 ,  马昕

IPC分类号： C12N15/75 ,  C12N15/31 ,  C12P13/02 ,  C12P21/04 ,  C12R1/125 ,  C12R1/07 ,  C12R1/10

摘要： 本发明属于生物技术与发酵工程领域，提供了适用于芽胞杆菌的透明颤菌血红蛋白表达框及应用，本发明将透明颤菌血红蛋白VHb与枯草芽胞杆菌中YwbN的信号肽SPywbN以及枯草芽胞杆菌启动子P43、地衣芽胞杆菌中淀粉酶终止子TamyL相连，组成VHb蛋白表达框P43-SPywbN-vhb-TamyL。将该表达框应用于三种芽胞杆菌（枯草芽胞杆菌168、解淀粉芽胞杆菌LX-12、地衣芽胞杆菌DW2）中，与常规的单独强化表达VHb菌株相比，分别使得聚γ-谷氨酸、伊枯草菌素A、杆菌肽的产量提高21.85%、18.77%和23.40%，本发明为透明颤菌血红蛋白VHb在芽胞杆菌中高效表达和广泛应用提供了理论指导。

公开(公告)号：CN110951797A

公开(公告)日：2020-04-03

申请号：CN201911236047.7

申请日：2019-12-05

申请人： 湖北大学

发明人： 陈守文 ,  杨帆 ,  蔡冬波 ,  陈耀中 ,  张清 ,  马昕 ,  陈建刚

IPC分类号： C12P13/02 ,  C12N9/06 ,  C12N1/21 ,  C12R1/10

摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，公开了消化链球菌谷氨酸脱氢酶GdhA在提高地衣芽胞杆菌聚γ-谷氨酸产量中的应用。本发明通过同源重组的方式，将来源于消化链球菌(Peptostreptococcus asaccharolyticus)中的谷氨酸脱氢酶GdhA替换地衣芽胞杆菌WX-02(Baclicus lincheniformis)自身的谷氨酸脱氢酶，显著提高了地衣芽胞杆菌聚γ-谷氨酸合成水平，获得菌株聚γ-谷氨酸产量相较于对照菌株至少提高了20%以上。本发明为聚γ-谷氨酸的高效生产提供了一种新策略。

公开(公告)号：CN110846290A

公开(公告)日：2020-02-28

申请号：CN201911236056.6

申请日：2019-12-05

申请人： 湖北大学

发明人： 陈守文 ,  张蒙 ,  蔡冬波 ,  杨帆 ,  陈耀中 ,  张清 ,  马昕

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12P13/02 ,  C12N1/21 ,  C12R1/10

摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，公开了二氢硫辛酸脱氢酶突变体P213R在地衣芽胞杆菌聚γ-谷氨酸合成中的应用。本发明通过基因组上定点突变的方式，将来源于地衣芽胞杆菌WX-02（Baclicus lincheniformis WX-02）二氢硫辛酸脱氢酶PdhD的第213位脯氨酸编码的碱基CCA改为CGG，即213位由脯氨酸改成精氨酸，显著提高了聚γ-谷氨酸合成水平，突变菌株聚γ-谷氨酸产量相较于对照菌株至少提高了21%以上。本发明为聚γ-谷氨酸的高效生产提供了一种新策略。