本发明属于基因工程和酶工程领域，公开了一种提高了谷氨酸脱羧酶酶活的地衣芽胞杆菌工程菌的构建方法及应用。申请人强化了地衣芽胞杆菌DW2内源二硫键氧化还原酶，并在地衣芽胞杆菌基因组上整合了二硫键氧化还原酶。将GAD的编码基因与二硫键异构酶进行共表达，成功构建了能够高表达谷氨酸脱羧酶的重组质粒。将其转入上述构建好的地衣芽胞杆菌DW2底盘细胞中进行高效表达，得到了能够提高谷氨酸脱羧酶酶活的重组工程菌，GAD酶活达到57.6 U·mL‑1，本发明所构建的工程菌对提升GAD酶活方面效果显著，为高效生产GABA提供了新思路，为实现生产食品级GABA奠定了基础。