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公开(公告)号：CN108587996B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201810426631.8
申请日：2018-05-07
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明提供了一种高产聚γ‑谷氨酸的工程菌及其构建方法与应用。本发明公开的高产聚γ‑谷氨酸的工程菌为强化表达dltB基因的重组微生物，所述强化表达为引入一个或多个拷贝的dltB基因和/或将dltB基因的表达元件替换为具有较高活性的表达元件。本发明通过提高dltB基因的表达获得的工程菌发酵生产聚γ‑谷氨酸产量提高20％以上。本发明获得的工程菌能够提高发酵生产聚γ‑谷氨酸的产量、降低生产成本，具有良好的市场应用价值。
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公开(公告)号：CN116334120A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210881079.8
申请日：2022-07-22
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程领域，公开了一种通过共表达stoA基因提高谷氨酸脱羧酶酶活的方法及其应用，申请人将谷氨酸脱羧酶（GAD）的编码基因与地衣芽胞杆菌DW2内源基因stoA进行共表达，成功构建了能够高表达谷氨酸脱羧酶的重组质粒。将其转入食品级宿主菌地衣芽胞杆菌DW2中进行高效表达，GAD酶活达到23.2 U·mL‑1，较对照菌株提高了71.9%，全细胞催化得到γ‑氨基丁酸产量为103 g·L‑1。本发明所构建的重组质粒对提升GAD酶活方面效果显著，为高效生产GABA提供了新思路。本发明所构建的工程菌为实现生产食品级GABA奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108611308B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201810410909.2
申请日：2018-05-02
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明涉及生物技术和发酵领域，公开了一种高产聚γ‑谷氨酸的地衣芽胞杆菌的制备方法及应用，本发明以质粒T2(2)‑Ori为基础，通过构建柠檬酸转运蛋白基因cimH的敲除载体T2‑△cimH，成功在地衣芽胞杆菌WX‑02中敲除了cimH基因，得到了地衣芽胞杆菌工程菌WX‑02△cimH。与对照菌WX‑02相比，工程菌株WX‑02△cimH的γ‑PGA产量至少提高了11%以上，为γ‑PGA高产提供一种新的策略。
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公开(公告)号：CN115786382A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211412825.5
申请日：2022-11-11
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程领域，公开了一种提高了谷氨酸脱羧酶酶活的地衣芽胞杆菌工程菌的构建方法及应用。申请人强化了地衣芽胞杆菌DW2内源二硫键氧化还原酶，并在地衣芽胞杆菌基因组上整合了二硫键氧化还原酶。将GAD的编码基因与二硫键异构酶进行共表达，成功构建了能够高表达谷氨酸脱羧酶的重组质粒。将其转入上述构建好的地衣芽胞杆菌DW2底盘细胞中进行高效表达，得到了能够提高谷氨酸脱羧酶酶活的重组工程菌，GAD酶活达到57.6 U·mL‑1，本发明所构建的工程菌对提升GAD酶活方面效果显著，为高效生产GABA提供了新思路，为实现生产食品级GABA奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108611308A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810410909.2
申请日：2018-05-02
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明涉及生物技术和发酵领域，公开了一种高产聚γ-谷氨酸的地衣芽胞杆菌的制备方法及应用，本发明以质粒T2(2)-Ori为基础，通过构建柠檬酸转运蛋白基因cimH的敲除载体T2-△cimH，成功在地衣芽胞杆菌WX-02中敲除了cimH基因，得到了地衣芽胞杆菌工程菌WX-02△cimH。与对照菌WX-02相比，工程菌株WX-02△cimH的γ-PGA产量至少提高了11%以上，为γ-PGA高产提供一种新的策略。
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公开(公告)号：CN115948372A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211340344.8
申请日：2022-10-29
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程领域，公开了谷氨酸脱羧酶突变体V6L及其在γ‑氨基丁酸生产中的应用，所述突变体是来源于大肠杆菌（Escherichia coli str.K‑12 substr.MG1655NC_000913.3）的野生型谷氨酸脱羧酶第6位氨基酸由缬氨酸V突变为亮氨酸L得到。通过谷氨酸脱羧酶的活性测定分析，发现相较于野生型谷氨酸脱羧酶，本发明的谷氨酸脱羧酶突变体V6L在不同pH条件下都表现出明显提高的酶活性，显示其更适合工业化生产γ‑氨基丁酸。
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公开(公告)号：CN108410789B
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN201810426359.3
申请日：2018-05-07
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明涉及产聚γ‑谷氨酸的微生物及其构建方法与应用。本发明公开的产聚γ‑谷氨酸的微生物为过表达磷脂酶C的微生物，所述过表达为引入一个或多个拷贝的磷脂酶C编码基因和/或将磷脂酶C的表达元件替换为具有较高活性的表达元件。本发明通过提高磷酯酶C的表达获得的微生物，其发酵生产聚γ‑谷氨酸产量得到显著提高。本发明为提高微生物发酵生产聚γ‑谷氨酸的产量、降低生产成本提供了新的策略。
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公开(公告)号：CN108486030A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810413939.9
申请日：2018-05-03
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于生物技术及发酵领域，具体公开了一种通过过表达phoP基因高产聚γ-谷氨酸的芽胞杆菌的制备方法及应用。本发明以质粒pHY300PLK为表达载体，在地衣芽胞杆菌WX-02中游离表达磷代谢转录因子基因phoP，构建了地衣芽胞杆菌工程菌WX-02/pHY300-phoP，与转入pHY300PLK空质粒的对照菌WX-02/pHY300相比，工程菌株的γ-PGA的产量提高了30%以上。本发明首次尝试通过强化phoP基因的表达，提高了γ-聚谷氨酸的产量，为今后γ-PGA的发酵生产提供了新思路。
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公开(公告)号：CN118599790A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410680717.9
申请日：2024-05-29
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于酶工程和基因工程领域，公开了Indigoidine合成酶突变体M4及其在Indigoidine生产中的应用，所述突变体为SEQ ID NO.2所示。通过Indigodine发酵产量测定分析，发现相较于野生型Indigoidine合成酶，本发明的Indigoidine合成酶M4表现出明显提高的酶活性，显示其更适合工业化生产Indigoidine。
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公开(公告)号：CN108486030B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN201810413939.9
申请日：2018-05-03
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于生物技术及发酵领域，具体公开了一种通过过表达phoP基因高产聚γ‑谷氨酸的芽胞杆菌的制备方法及应用。本发明以质粒pHY300PLK为表达载体，在地衣芽胞杆菌WX‑02中游离表达磷代谢转录因子基因phoP，构建了地衣芽胞杆菌工程菌WX‑02/pHY300‑phoP，与转入pHY300PLK空质粒的对照菌WX‑02/pHY300相比，工程菌株的γ‑PGA的产量提高了30%以上。本发明首次尝试通过强化phoP基因的表达，提高了γ‑聚谷氨酸的产量，为今后γ‑PGA的发酵生产提供了新思路。
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