公开(公告)号：CN103772497A

公开(公告)日：2014-05-07

申请号：CN201410013192.X

申请日：2014-01-10

Applicant: 浙江大学 ,  杭州碧于天保健品有限公司

Inventor： 沈立荣 ,  李玫璐 ,  于张颖 ,  周志军 ,  谭量量 ,  赵敏洁 ,  尹志红 ,  裘卫

IPC: C07K14/435 ,  C07K1/34 ,  A23L2/38

CPC classification number: C07K14/43572 ,  A23L2/38 ,  A23L2/74 ,  A23L21/20 ,  A23V2002/00 ,  A23V2250/542

Abstract: 本发明公开了蜂王浆中得到王浆主蛋白和活性滤后液的超滤膜分离方法。称取蜂王浆，与水在4℃下搅拌混匀，用NaOH调节pH，用NaCl调节离子强度，再用0.2μm的微孔滤膜去除微粒；采用截留分子量为100kDa的超滤膜M1分离去除大分子杂质，再用截留分子量为49kDa的超滤膜M2分离和浓缩M1透过液中的王浆主蛋白，当浓缩至1/3体积时，补充纯水，让小分子溶液透过M2，得到的截流液为纯化和浓缩的王浆主蛋白溶液，经冷冻干燥成为王浆主蛋白冻干粉。小分子溶液含有多糖和10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)，可用于功能饮料生产。本发明首次用超滤装置对王浆主蛋白（MRJPs）进行分离浓缩，MRJPs的提取率达到82.63%，经冷冻干燥成为蛋白含量大于70%的冻干粉；滤后液用于制备饮料，实现王浆的综合利用。

公开(公告)号：CN103772497B

公开(公告)日：2016-01-13

申请号：CN201410013192.X

申请日：2014-01-10

Applicant: 浙江大学 ,  杭州碧于天保健品有限公司

Inventor： 沈立荣 ,  李玫璐 ,  于张颖 ,  周志军 ,  谭量量 ,  赵敏洁 ,  尹志红 ,  裘卫

IPC: C07K14/435 ,  C07K1/34 ,  A23L2/38

Abstract: 本发明公开了蜂王浆中得到王浆主蛋白和活性滤后液的超滤膜分离方法。称取蜂王浆，与水在4℃下搅拌混匀，用NaOH调节pH，用NaCl调节离子强度，再用0.2μm的微孔滤膜去除微粒；采用截留分子量为100kDa的超滤膜M1分离去除大分子杂质，再用截留分子量为49kDa的超滤膜M2分离和浓缩M1透过液中的王浆主蛋白，当浓缩至1/3体积时，补充纯水，让小分子溶液透过M2，得到的截流液为纯化和浓缩的王浆主蛋白溶液，经冷冻干燥成为王浆主蛋白冻干粉。小分子溶液含有多糖和10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)，可用于功能饮料生产。本发明首次用超滤装置对王浆主蛋白（MRJPs）进行分离浓缩，MRJPs的提取率达到82.63%，经冷冻干燥成为蛋白含量大于70%的冻干粉；滤后液用于制备饮料，实现王浆的综合利用。

公开(公告)号：CN103044549A

公开(公告)日：2013-04-17

申请号：CN201210573720.8

申请日：2012-12-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 沈立荣 ,  李玫璐 ,  王一然 ,  谭量量 ,  金凤 ,  丁美会 ,  陈正贤

IPC: C07K16/18 ,  C07K16/06 ,  C07K19/00 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  G01N33/68 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种中华蜜蜂抗菌肽AccRoyalisin多克隆抗体的制备方法及用途。以大肠杆菌重组表达的中华蜜蜂王浆抗菌肽AccRoyalisin为抗原，免疫大白兔制备的多克隆抗体，该抗体效价大于40000倍；以此多克隆抗体为一抗，以重组表达的GST-AccRoyalisin为标准蛋白抗原作倍比稀释，用酶标仪通过Elisa法检测不同浓度GST-AccRoyalisin蛋白样品的吸光度，建立吸光度与MRJP1蛋白浓度的标准曲线。将不同蜂种或不同蜂群的血淋巴、蜂王浆冻干粉稀释后作为抗原，采用Elisa法检测得到样品的吸光度，代入所建立的标准曲线，计算得到样品的Royalisin的含量。本发明为Royalisin抗体提供了一种新的用途，为养蜂领域蜂中和蜂群抗病力的评价、抗病蜂群的选育，为蜂王浆防腐抗菌性能的评价提供了一种快捷的定性定量检测新方法。