一种中华蜜蜂抗菌肽AccRoyalisin多克隆抗体的制备方法及用途

    公开(公告)号:CN103044549A

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201210573720.8

    申请日:2012-12-26

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种中华蜜蜂抗菌肽AccRoyalisin多克隆抗体的制备方法及用途。以大肠杆菌重组表达的中华蜜蜂王浆抗菌肽AccRoyalisin为抗原,免疫大白兔制备的多克隆抗体,该抗体效价大于40000倍;以此多克隆抗体为一抗,以重组表达的GST-AccRoyalisin为标准蛋白抗原作倍比稀释,用酶标仪通过Elisa法检测不同浓度GST-AccRoyalisin蛋白样品的吸光度,建立吸光度与MRJP1蛋白浓度的标准曲线。将不同蜂种或不同蜂群的血淋巴、蜂王浆冻干粉稀释后作为抗原,采用Elisa法检测得到样品的吸光度,代入所建立的标准曲线,计算得到样品的Royalisin的含量。本发明为Royalisin抗体提供了一种新的用途,为养蜂领域蜂中和蜂群抗病力的评价、抗病蜂群的选育,为蜂王浆防腐抗菌性能的评价提供了一种快捷的定性定量检测新方法。

    中华蜜蜂王浆抗菌肽AccRoyalisin基因及其编码多肽与应用

    公开(公告)号:CN101705231A

    公开(公告)日:2010-05-12

    申请号:CN200910154257.1

    申请日:2009-11-19

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了中华蜜蜂王浆抗菌肽AccRoyalisin基因及其编码多肽与应用,该基因具有SEQ ID No.4所示的DNA序列;该基因的编码蛋白具有SEQ ID No.5所示的氨基酸序列,该抗菌肽基因可通过构建大肠杆菌表达载体建立高效表达的基因工程菌株,通过发酵工程诱导表达进行生产、重组产物分离和纯化,其重组产物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和黄色微球菌等多种革兰氏阳性细菌具有明显的抑制作用,可用于食品防腐保鲜,特别是预防食源性细菌污染,对人体和动物安全无害,可作为抗生素和化学防腐剂的替代品,也适合于养殖动物细菌性病害防治。本发明为Royalisin的开发、规模化工业生产及应用奠定了基础。

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