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公开(公告)号：CN102080064A
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN201010579755.3
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌及其构建方法，属于遗传工程领域。本发明通过分子生物学的手段，首次得到了吸水链霉菌（Streptomyceshygroscopicus）中TGase活化蛋白酶抑制剂（TAPI）的完整基因序列，并根据得到序列构建了pET22b(+)-TAPI重组质粒，使TAPI在大肠杆菌中表达，应用该菌种生产TAPI，产量可达10mg/L。本方法工艺简单、产品产量高等诸多优点，开发了一种安全性、温和性和“绿色性”的新型蛋白质类表面活性剂；并且该菌株生产的目的蛋白直接分泌到胞外，便于分离纯化。本发明为用基因手段表达蛋白质类表面活性剂提供了参考和依据，也为表面活性剂的发展拓展了方向。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102080064B
公开(公告)日：2012-02-08
申请号：CN201010579755.3
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌及其构建方法，属于遗传工程领域。本发明通过分子生物学的手段，首次得到了吸水链霉菌（Streptomyceshygroscopicus）中TGase活化蛋白酶抑制剂（TAPI）的完整基因序列，并根据得到序列构建了pET22b(+)-TAPI重组质粒，使TAPI在大肠杆菌中表达，应用该菌种生产TAPI，产量可达10mg/L。本方法工艺简单、产品产量高等诸多优点，开发了一种安全性、温和性和“绿色性”的新型蛋白质类表面活性剂；并且该菌株生产的目的蛋白直接分泌到胞外，便于分离纯化。本发明为用基因手段表达蛋白质类表面活性剂提供了参考和依据，也为表面活性剂的发展拓展了方向。
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公开(公告)号：CN103173429A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310076338.0
申请日：2013-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的重组胰蛋白酶，属于酶工程领域。本发明通过融合PCR技术，在胰蛋白酶上融合有前导肽序列，其中优选YVEF。获得了在40℃、50℃和60℃下，热稳定性分别比野生胰蛋白酶提高了1.77,2.6和31倍的重组胰蛋白酶。解决了胰蛋白酶热稳定性差的问题。该重组胰蛋白酶生产工艺简单、便于工业化应用。
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公开(公告)号：CN101906393B
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201010211057.8
申请日：2010-06-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酰胺转胺酶编码基因阻断吸水链霉菌及其应用。本发明主要采用同源重组技术，利用单交换使谷氨酰胺转胺酶编码基因被插入失活，从而得到不产谷氨酰胺转胺酶的重组子。本发明得到的吸水链霉菌，阻断了其分化过程，但是不影响其基内菌丝生长。以该阻断菌株为宿主构建了一株基因工程菌，用于生产谷氨酰胺转胺酶，表明该阻断菌株可以作为一个良好的链霉菌表达宿主，可用于解决链霉菌在发酵过程中由于分化过程而引起的代谢产物变化，提高发酵产量及稳定性，将极大促进后续链霉菌基因改造和微生物生理学研究，为链霉菌发酵生产提供一个新的模式菌。
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公开(公告)号：CN101906393A
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN201010211057.8
申请日：2010-06-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酰胺转胺酶编码基因阻断吸水链霉菌及其应用。本发明主要采用同源重组技术，利用单交换使谷氨酰胺转胺酶编码基因被插入失活，从而得到不产谷氨酰胺转胺酶的重组子。本发明得到的吸水链霉菌，阻断了其分化过程，但是不影响其基内菌丝生长。以该阻断菌株为宿主构建了一株基因工程菌，用于生产谷氨酰胺转胺酶，表明该阻断菌株可以作为一个良好的链霉菌表达宿主，可用于解决链霉菌在发酵过程中由于分化过程而引起的代谢产物变化，提高发酵产量及稳定性，将极大促进后续链霉菌基因改造和微生物生理学研究，为链霉菌发酵生产提供一个新的模式菌。
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公开(公告)号：CN103173367A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310076829.5
申请日：2013-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产热稳定性重组胰蛋白酶的酵母工程菌及其应用，属于遗传工程领域。本发明通过将体外扩增所得的胰蛋白酶基因融合前导短肽YVEF，并将其整合连接到毕赤酵母GS115（Pichia pastoris）染色体上，构建了一株高效分泌表达重组胰蛋白酶的价目工程菌，纯化后得到热稳定提高的重组胰蛋白酶，在40℃、50℃和60℃下，热稳定性分别比野生胰蛋白酶提高了1.77,2.6和31倍的重组胰蛋白酶，解决了胰蛋白酶热稳定性低的问题。应用该菌种生产胰蛋白酶，产量相对较高、工艺相对简单、所使用工程菌株遗传及应用背景清晰，便于工业化应用。
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