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公开(公告)号：CN102559525A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110410579.5
申请日：2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种新型的共表达内切葡聚糖酶基因和木聚糖酶基因的毕赤酵母工程菌GS115/Aus cel12A-Aor xyn11A的构建方法。通过双质粒表达体系实现了两种酶在同一工程菌中的混合表达，成功的制备了复合酶，降低了酶的生产成本。所表达的两种酶具有较好的酶学性质，具有较大的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN102154241A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010550909.6
申请日：2010-11-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用黑曲霉生产壳聚糖酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明采用廉价的麸皮、豆饼粉和玉米粉等农副产品为发酵基料，并添加适量的无机氮源、壳聚糖和无机盐等，利用黑曲霉(Aspergillus niger)LW-1菌株固态发酵生产壳聚糖酶。本发明提供了黑曲霉LW-1菌株实验室小试生产壳聚糖酶的固态发酵培养基配方和培养条件，其成熟发酵曲料的壳聚糖酶活性可达1381～1966U/g干曲。本壳聚糖酶生产新工艺具有设备简单、投入少、见效快、生产成本低廉、对环境友好以及壳聚糖酶固态发酵酶活性较高等优势，有利于壳聚糖酶的开发和利用，具有较高的经济和实用价值。
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公开(公告)号：CN102127528A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010581318.5
申请日：2010-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用宇佐美曲霉生产纤维素酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明以麸皮和稻草等农副产品为发酵基料，并添加适量的无机氮源和无机盐等，利用宇佐美曲霉(Aspergillususamii)E001菌株固态发酵生产纤维素酶。本发明提供了宇佐美曲霉E001菌株实验室小试生产纤维素酶的固态发酵培养基配方和培养条件，其成熟发酵曲料的纤维素酶活性达到了1205～1915U/g干曲。本发明具有设备简单、投入少、见效快、生产成本低、对环境友好以及纤维素酶活性较高等特点，有利于纤维素的开发和利用，具有较高的经济和实用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102140501A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201010550861.9
申请日：2010-11-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明是一种利用限制性内切酶酶切、pUCm-T载体和巢式PCR扩增等技术，基于已知DNA序列确定其3′端侧翼未知DNA序列的方法。该方法通过选用限制性内切酶酶切基因组DNA，纯化的酶切产物用Taq酶或Ex Taq酶进行补齐和3′端加A反应，与pUCm-T载体连接；利用引物设计软件选定T载体上T/A克隆位点下游的一段序列作为3′端引物；选定两条靠近未知序列端的已知DNA上的序列作为5′端引物。以pUCm-T载体连接物为模板，用设计的引物进行巢式PCR扩增，并对其扩增片段进行克隆和测序。本发明具有操作简便、应用范围广、操作限制少、结果验证简捷、未知序列长度不限和成本低廉等特点。
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公开(公告)号：CN102392033A
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN201110410412.9
申请日：2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186菌株的新型木聚糖酶基因序列的克隆方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1。生物信息学分析表明该木聚糖酶属于糖苷水解酶第11家族，命名为Aor Xyn11A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为Aor xyn11A。本发明还公开了Aor Xyn11A工程菌的构建以及重组Aor Xyn11A的高效表达和纯化的方法，制备的重组Aor Xyn11A的最适作用温度和pH分别为50℃和5.5，在pH 4.5-7.5、40℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102127555A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010581299.6
申请日：2010-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的β-1，4-内切葡聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该β-内切葡聚糖酶属于糖苷水解酶第12家族，命名为Aus Cel12A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus cel12A。本发明还公开了Aus Cel12A工程菌的构建以及重组Aus Cel12A的高效表达和纯化的方法。制备的重组Aus Cel12A的最适作用温度和pH分别为60℃和5.0，在pH 4.0-7.0、60℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值，也为其它β-内切葡聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号：CN102392035A
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN201110410463.1
申请日：2011-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型壳聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该壳聚糖酶属于糖苷水解酶第75家族，命名为Aus CsnA，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus csnA。本发明还公开了Aus CsnA工程菌的构建以及重组Aus CsnA的高效表达和纯化的方法，制备的重组Aus CsnA的最适作用温度和pH分别为50℃和5.0，在pH 4.0-7.0、50℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102154240A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010550873.1
申请日：2010-11-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/42
Abstract: 一种利用宇佐美曲霉生产壳聚糖酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明以麸皮、豆饼粉和菜籽饼粉等农副产品为发酵基料，并添加适量的无机氮源、壳聚糖、无机盐和表面活性剂等，利用宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株固态发酵生产壳聚糖酶。本发明提供了宇佐美曲霉E001菌株实验室小试生产壳聚糖酶的固态发酵培养基配方和培养条件，其成熟发酵曲料的壳聚糖酶活性达到1942～2461U/g干曲。本发明具有设备简单、投入少、见效快、生产成本低廉、对环境友好以及壳聚糖酶发酵酶活性较高等特点，有利于壳聚糖酶的开发和利用，具有较高的经济和实用价值。
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