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公开(公告)号：CN109072224B
公开(公告)日：2022-07-15
申请号：CN201780021860.5
申请日：2017-01-30
Applicant: 株式会社博纳克
IPC: C12N15/09 , C07C229/04 , C07C229/34 , C12N9/16
Abstract: 本发明提供：具有与天然型sgRNA同等或不低于天然型sgRNA的活性、且提高了在生物体内的稳定性的新型人工sgRNA、以及组合了该人工sgRNA和Cas9的有效的CRISPR/Cas9系统。即使将sgRNA中的、用于连接crRNA的3'末端和tracrRNA的5'末端而单链化的核苷酸连接子部分置换为氨基酸衍生物连接子，利用在体外的DNA切断法也可保持与原本的sgRNA同等以上的活性。进而，即使将存在于tracrRNA的茎‑环1与茎‑环2之间的连接子区域和/或茎‑环2的环部分置换为氨基酸衍生物连接子，或者在sgRNA的5’末端和/或3’末端附近添加/插入氨基酸衍生物连接子，也可保持与原本的sgRNA同等以上的活性。通过将1个以上的氨基酸衍生物连接子导入sgRNA中，从而能够提高在生物体内的稳定性。
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公开(公告)号：CN110198948A
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201780076625.8
申请日：2017-10-13
Applicant: 株式会社博纳克
IPC: C07H19/067 , C07C319/14 , C07C319/20 , C07C323/12 , C07H19/167 , C07H21/02 , C07H23/00
Abstract: 本发明的目的在于，提供更高效并且高纯度地制造适合于核酸制造(合成)的亚磷酰胺的方法。使用糖苷化合物与下述化学式(105)所示的醚、其对映异构体、互变异构体或立体异构体、或者它们的盐的偶联反应，能够得到能进行高效率的核酸合成的亚磷酰胺。(式中，n为正整数，R与R’相同或不同，为氢原子、或羟基的保护基团。)
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公开(公告)号：CN107428793A
公开(公告)日：2017-12-01
申请号：CN201680020364.3
申请日：2016-04-01
Applicant: 株式会社博纳克
IPC: C07H19/067 , C07H19/167
CPC classification number: C07H13/00 , C07H19/06 , C07H19/067 , C07H19/16 , C07H19/167 , C07H23/00 , C08G65/34 , C08G75/02
Abstract: 本发明提供一种通式(I)所示的配糖体化合物或其盐的制造方法，其包含使通式(103)所示的硫醚化合物与通式(105)所示的醇化合物在卤化剂、干燥剂和路易斯酸的存在下进行偶联反应，然后在选自含硫抗氧化剂和含马来酰亚胺基化合物的至少一种的添加剂的存在下进行蒸馏以得到通式(104)所示的硫醚化合物的步骤(步骤0)；和使通式(Ia)所示的配糖体化合物与通式(104)所示的硫醚化合物在卤化剂、干燥剂和路易斯酸的存在下进行偶联反应以得到通式(Ib)所示的配糖体化合物的步骤(步骤1)。通过该方法，可以更有效且高纯度地制造优选用于核酸的制造(合成)的亚磷酰胺(各化合物如说明书中所定义)。
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公开(公告)号：CN109072224A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201780021860.5
申请日：2017-01-30
Applicant: 株式会社博纳克
IPC: C12N15/09 , C07C229/04 , C07C229/34 , C12N9/16
Abstract: 本发明提供：具有与天然型sgRNA同等或不低于天然型sgRNA的活性、且提高了在生物体内的稳定性的新型人工sgRNA、以及组合了该人工sgRNA和Cas9的有效的CRISPR/Cas9系统。即使将sgRNA中的、用于连接crRNA的3'末端和tracrRNA的5'末端而单链化的核苷酸连接子部分置换为氨基酸衍生物连接子，利用在体外的DNA切断法也可保持与原本的sgRNA同等以上的活性。进而，即使将存在于tracrRNA的茎-环1与茎-环2之间的连接子区域和/或茎-环2的环部分置换为氨基酸衍生物连接子，或者在sgRNA的5’末端和/或3’末端附近添加/插入氨基酸衍生物连接子，也可保持与原本的sgRNA同等以上的活性。通过将1个以上的氨基酸衍生物连接子导入sgRNA中，从而能够提高在生物体内的稳定性。
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