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公开(公告)号:CN105734158A
公开(公告)日:2016-07-06
申请号:CN201610274783.1
申请日:2016-04-28
Applicant: 新疆农业大学
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明属于生物学检测技术领域,具体涉及一种基于荧光定量PCR标量阳性对照建立的马驽巴贝斯虫病检测试剂盒,用于马属动物感染马驽巴贝斯虫病的临床诊断和日常监测。本发明通过设计检测引物如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示和荧光探针如SEQ ID No.3所示,结合荧光定量PCR系统绝对定量分析,通过优化反应体系和循环条件,建立马驽巴贝斯虫病荧光PCR检测方法。并建立一种基于荧光定量PCR标量的马驽巴贝斯虫病荧光PCR检测试剂盒,适用于马驽巴贝斯虫病的临床诊断和流行病学监测。
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公开(公告)号:CN102455360B
公开(公告)日:2014-06-18
申请号:CN201010512487.3
申请日:2010-10-20
Applicant: 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K19/00
Abstract: 本发明提供的一种新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒,根据GenBank中的新孢子虫NcSRS2基因序列设计一对引物,引入酶切位点,截去NcSRS2蛋白的信号肽区,从新疆地方奶牛阳性血清中提取DNA;通过PCR扩增了长约975bp的tNcSRS2基因片段,克隆到pMD-18-T载体上,酶切并测序鉴定;然后将目的片段进一步定向连接到pGEX-4T-2表达载体,转化到大肠杆菌中,诱导表达、纯化;表达融合蛋白的分子量约为62kDa;用于ELISA包被抗原,获取rELISA抗体检测试剂盒;其使用步骤:将包被好的酶标反应板取出,经洗涤、封闭、再洗涤,加检测样品;再经第三次洗涤,加二抗;经第四次洗涤,显色、终止反应;读板OD450/630值,判定结果;与其商品化ELISA检测盒比符合率均达到95%以上。本检测盒也适用于反刍动物血清和血浆中的犬新孢子虫抗体的酶联免疫检测。
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公开(公告)号:CN107907680B
公开(公告)日:2020-02-18
申请号:CN201710936059.5
申请日:2017-09-30
Applicant: 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 , 新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532
Abstract: 本发明公开检测蜜蜂幼虫芽孢杆菌的胶体金免疫试纸及其制备与应用,具体包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板,其中金标垫上含有胶体金标记的PLMP蛋白多克隆抗体,硝酸纤维素膜上有用PLMP蛋白多克隆抗体预包被的检测线,用羊抗兔IgG溶液预包被的质控线,制备的胶体金免疫试纸特异性强,对阴性菌液均无检出情况,特异度可达100%,灵敏性较好,对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL,检测重复性好,性能稳定,保存期达到3个月。
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公开(公告)号:CN107907680A
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201710936059.5
申请日:2017-09-30
Applicant: 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 , 新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532
Abstract: 本发明公开检测蜜蜂幼虫芽孢杆菌的胶体金免疫试纸及其制备与应用,具体包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板,其中金标垫上含有胶体金标记的PLMP蛋白多克隆抗体,硝酸纤维素膜上有用PLMP蛋白多克隆抗体预包被的检测线,用羊抗兔IgG溶液预包被的质控线,制备的胶体金免疫试纸特异性强,对阴性菌液均无检出情况,特异度可达100%,灵敏性较好,对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL,检测重复性好,性能稳定,保存期达到3个月。
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公开(公告)号:CN105219878A
公开(公告)日:2016-01-06
申请号:CN201510781620.8
申请日:2015-11-13
Applicant: 新疆农业大学
CPC classification number: C12Q1/6893 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2545/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明属于分子生物学检测技术领域,是涉及一种基于3D数字PCR标量阳性对照建立的新孢子虫病(Real-Time PCR)检测试剂盒,用于动物感染新孢子虫病的临床诊断和日常监测。本发明试剂盒包括用于检测的新孢子虫特异性引物、探针其核苷酸如SEQ ID NO.1-3,检测的新孢子虫NcSRS2基因为SEQ ID NO.4所示。本试剂盒具有检测准确,灵敏度高,特异性强,简便快速的特点,用于检测早期感染和隐性“带虫”阶段的虫体DNA,为新孢子虫病的临床诊断和日常监测提供科学的技术支撑。
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公开(公告)号:CN102455360A
公开(公告)日:2012-05-16
申请号:CN201010512487.3
申请日:2010-10-20
Applicant: 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K19/00
Abstract: 本发明提供的一种新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒,根据GenBank中的新孢子虫NcSRS2基因序列设计一对引物,引入酶切位点,截去NcSRS2蛋白的信号肽区,从新疆地方奶牛阳性血清中提取DNA;通过PCR扩增了长约975bp的tNcSRS2基因片段,克隆到pMD-18-T载体上,酶切并测序鉴定;然后将目的片段进一步定向连接到pGEX-4T-2表达载体,转化到大肠杆菌中,诱导表达、纯化;表达融合蛋白的分子量约为62kDa;用于ELISA包被抗原,获取rELISA抗体检测试剂盒;其使用步骤:将包被好的酶标反应板取出,经洗涤、封闭、再洗涤,加检测样品;再经第三次洗涤,加二抗;经第四次洗涤,显色、终止反应;读板OD450/630值,判定结果;与其商品化ELISA检测盒比符合率均达到95%以上。本检测盒也适用于反刍动物血清和血浆中的犬新孢子虫抗体的酶联免疫检测。
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公开(公告)号:CN107629127A
公开(公告)日:2018-01-26
申请号:CN201710923656.4
申请日:2017-09-30
Applicant: 伊犁职业技术学院 , 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 , 新疆农业大学
Abstract: 本发明公开蜜蜂幼虫芽孢杆菌金属蛋白酶多克隆抗体的制备方法,针对现有技术中蜜蜂幼虫芽孢杆菌的检测方法耗时较长,操作技术要求较高,不利于现场快速检测的问题,通过PLMP基因扩增、原核表达载体pGEX-4T-1-PLMP的构建、PLMP重组蛋白的诱导表达及纯化、PLMP多克隆抗体的制备等步骤,制备的PLMP多克隆抗体经间接ELISA检测效价为1:12800,且经Western Blot方法测定,具有较好的反应性,为建立蜜蜂幼虫芽孢杆菌免疫检测方法奠定了基础,而且构建的PLMP重组蛋白效率高,分离纯化方法简单,周期短。
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公开(公告)号:CN107722121A
公开(公告)日:2018-02-23
申请号:CN201710923663.4
申请日:2017-09-30
Applicant: 伊犁职业技术学院 , 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 , 新疆农业大学
IPC: C07K16/12 , C07K16/06 , G01N33/569 , G01N33/558
CPC classification number: C07K16/1278 , C07K16/065 , G01N33/558 , G01N33/56911
Abstract: 本发明公开蜜蜂幼虫芽孢杆菌PLMP多抗及其在免疫层析纸的应用,针对现有技术中蜜蜂幼虫芽孢杆菌的检测方法耗时较长,操作技术要求较高,不利于现场快速检测的问题,通过PLMP基因扩增、原核表达载体pGEX-4T-1-PLMP的构建、PLMP重组蛋白的诱导表达及纯化、PLMP多克隆抗体的制备等步骤制备PLMP多抗,构建的PLMP重组蛋白效率高,分离纯化方法简单,周期短并将其应用在胶体金免疫层析纸的制备中,得到的免疫层析纸特异性强,对阴性菌液均无检出情况,特异度可达100%,灵敏性较好,对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL。
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公开(公告)号:CN205803457U
公开(公告)日:2016-12-14
申请号:CN201620758831.X
申请日:2016-07-15
IPC: C12M1/00
Abstract: 本实用新型提供了一种摇菌平板一体式恒温培养装置,包括恒温箱和设置在恒温箱内的平板培养组件和摇菌培养组件;恒温箱内部由筛网式隔挡分为上下两层,平板培养组件设置在上层,摇菌培养组件设置在下层;平板培养组件包括链条、悬挂式平台和平板培养器具,悬挂式平台的四角通过链条与恒温箱内侧顶部固定连接,平板培养器具设置在悬挂式平台上;摇菌培养组件包括摇床和摇菌架,摇菌架设置在摇床上,该装置能够进行多类型摇瓶培养,平板培养和摇菌培养互不影响,节约空间、降低能耗,对于微生物技术领域有广泛的实用性。
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公开(公告)号:CN205750101U
公开(公告)日:2016-11-30
申请号:CN201620667715.7
申请日:2016-06-29
IPC: G02B21/34
Abstract: 本实用新型提供一种可拆卸式玻片标本装置,包括载玻片固定板和玻片标本组件,载玻片固定板中间固定设置两个插槽,插槽中间设置透光窗口,玻片标本组件活动插接在载玻片固定板的两个插槽中间,玻片标本组件包括上盖玻片、标本固定层和下盖玻片,上盖玻片与下盖玻片四周边通过标本固定层粘接,标本固定层与上盖玻片和下盖玻片结合整体构成玻片标本组件,上盖玻片和下盖玻片大小一致,对应设置,透光窗口为正方形,透光窗口小于玻片标本组件;该装置可通过正反两面观察多个玻片标本,通过玻片标本组件与载玻片固定板分开存放,使得实验教学更加便捷,对于教学观察用具的技术领域具有广泛的实用性。
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