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公开(公告)号：CN102455360B
公开(公告)日：2014-06-18
申请号：CN201010512487.3
申请日：2010-10-20
Applicant: 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K19/00
Abstract: 本发明提供的一种新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒，根据GenBank中的新孢子虫NcSRS2基因序列设计一对引物，引入酶切位点，截去NcSRS2蛋白的信号肽区，从新疆地方奶牛阳性血清中提取DNA；通过PCR扩增了长约975bp的tNcSRS2基因片段，克隆到pMD-18-T载体上，酶切并测序鉴定；然后将目的片段进一步定向连接到pGEX-4T-2表达载体，转化到大肠杆菌中，诱导表达、纯化；表达融合蛋白的分子量约为62kDa；用于ELISA包被抗原，获取rELISA抗体检测试剂盒；其使用步骤：将包被好的酶标反应板取出，经洗涤、封闭、再洗涤，加检测样品；再经第三次洗涤，加二抗；经第四次洗涤，显色、终止反应；读板OD450/630值，判定结果；与其商品化ELISA检测盒比符合率均达到95％以上。本检测盒也适用于反刍动物血清和血浆中的犬新孢子虫抗体的酶联免疫检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103725796A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310516849.X
申请日：2013-10-29
Applicant: 新疆农业大学 , 新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2545/101 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开一种牛病毒性腹泻病毒内标分型荧光PCR检测试剂盒及其制备。通过引物设计，用单重PCR扩增，获得了BVDV I、BVDV II和监控内标的PCR模板，通过引物设计和PCR扩增，并对反应条件进行了优化，建立了BVDV内标分型荧光PCR检测检测体系，实现了对BVDV I和BVDV II单独检测或同步检测，并可对检测结果进行质量监测。制备的检测试剂盒由cDNA合成体系和SYBR荧光PCR反应扩增体系两部分组成。该试剂盒对三种基因的最低检测限为102拷贝，且具有较好的特异性和可重复性，确保检测质量，具有较好的应用价值。
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公开(公告)号：CN107907680B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201710936059.5
申请日：2017-09-30
Applicant: 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 , 新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532
Abstract: 本发明公开检测蜜蜂幼虫芽孢杆菌的胶体金免疫试纸及其制备与应用，具体包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板，其中金标垫上含有胶体金标记的PLMP蛋白多克隆抗体，硝酸纤维素膜上有用PLMP蛋白多克隆抗体预包被的检测线，用羊抗兔IgG溶液预包被的质控线，制备的胶体金免疫试纸特异性强，对阴性菌液均无检出情况，特异度可达100%，灵敏性较好，对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL，检测重复性好，性能稳定，保存期达到3个月。
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公开(公告)号：CN107907680A
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201710936059.5
申请日：2017-09-30
Applicant: 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 , 新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532
Abstract: 本发明公开检测蜜蜂幼虫芽孢杆菌的胶体金免疫试纸及其制备与应用，具体包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板，其中金标垫上含有胶体金标记的PLMP蛋白多克隆抗体，硝酸纤维素膜上有用PLMP蛋白多克隆抗体预包被的检测线，用羊抗兔IgG溶液预包被的质控线，制备的胶体金免疫试纸特异性强，对阴性菌液均无检出情况，特异度可达100%，灵敏性较好，对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL，检测重复性好，性能稳定，保存期达到3个月。
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公开(公告)号：CN103725796B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201310516849.X
申请日：2013-10-29
Applicant: 新疆农业大学 , 新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
Abstract: 本发明公开一种牛病毒性腹泻病毒内标分型荧光PCR检测试剂盒及其制备。通过引物设计，用单重PCR扩增，获得了BVDV I、BVDV II和监控内标的PCR模板，通过引物设计和PCR扩增，并对反应条件进行了优化，建立了BVDV内标分型荧光PCR检测检测体系，实现了对BVDV I和BVDV II单独检测或同步检测，并可对检测结果进行质量监测。制备的检测试剂盒由cDNA合成体系和SYBR荧光PCR反应扩增体系两部分组成。该试剂盒对三种基因的最低检测限为102拷贝，且具有较好的特异性和可重复性，确保检测质量，具有较好的应用价值。
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公开(公告)号：CN102455360A
公开(公告)日：2012-05-16
申请号：CN201010512487.3
申请日：2010-10-20
Applicant: 新疆农业大学
IPC: G01N33/569 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K19/00
Abstract: 本发明提供的一种新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒，根据GenBank中的新孢子虫NcSRS2基因序列设计一对引物，引入酶切位点，截去NcSRS2蛋白的信号肽区，从新疆地方奶牛阳性血清中提取DNA；通过PCR扩增了长约975bp的tNcSRS2基因片段，克隆到pMD-18-T载体上，酶切并测序鉴定；然后将目的片段进一步定向连接到pGEX-4T-2表达载体，转化到大肠杆菌中，诱导表达、纯化；表达融合蛋白的分子量约为62kDa；用于ELISA包被抗原，获取rELISA抗体检测试剂盒；其使用步骤：将包被好的酶标反应板取出，经洗涤、封闭、再洗涤，加检测样品；再经第三次洗涤，加二抗；经第四次洗涤，显色、终止反应；读板OD450/630值，判定结果；与其商品化ELISA检测盒比符合率均达到95％以上。本检测盒也适用于反刍动物血清和血浆中的犬新孢子虫抗体的酶联免疫检测。
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