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公开(公告)号：CN109042297B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN201810951406.6
申请日：2018-08-21
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，具体涉及一种玉米自交系SL1303幼胚转化方法，包括如下步骤：1）愈伤组织诱导：在无菌操作台中剥取幼胚，用镊子将玉米种子固定住，将玉米的胚挑出，沿胚轴纵切成两半，然后置于诱导培养基上进行诱导培养；2）继代培养：将诱导产生的愈伤切去内生芽，接种至继代培养基中25℃暗培养7天，继代两次，统计产生胚性愈伤组织；3）分化培养：将长出胚性愈伤组织转入再生培养基中，25℃光照培养至长芽；4）生根培养：待长出完整的再生苗后转入生根培养基中，进行生根壮苗，根长至4cm左右，进行炼苗移栽。本发明建立了一个高效的玉米自交系SL1303幼胚转化方法，为今后利用该体系进行玉米自交系SL1303的转基因提供了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN107119069B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201710324843.0
申请日：2017-05-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，涉及一种玉米自交系SL1303茎尖活体转化方法，该方法是以玉米自交系SL1303为受体材料进行农杆菌介导的茎尖活体转化转入外源基因，获得转基因玉米。该方法与传统的农杆菌介导转基因方法相比，具有许多不可比拟的优势：成本低，操作简便，不受季节、植物发育时期等因素的限制，而且当代即可获得转基因的种子，T2代可获得纯合的转基因株系，无需组培再生阶段，对于保持主栽品种的生产力而改善其某一性状具有特殊的优势，有望发展为玉米转基因的常规技术，在提高玉米的品质性状和抗逆性能等方面的品种改良中发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN109042297A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201810951406.6
申请日：2018-08-21
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，具体涉及一种玉米自交系SL1303幼胚转化方法，包括如下步骤：1）愈伤组织诱导：在无菌操作台中剥取幼胚，用镊子将玉米种子固定住，将玉米的胚挑出，沿胚轴纵切成两半，然后置于诱导培养基上进行诱导培养；2）继代培养：将诱导产生的愈伤切去内生芽，接种至继代培养基中25℃暗培养7天，继代两次，统计产生胚性愈伤组织；3）分化培养：将长出胚性愈伤组织转入再生培养基中，25℃光照培养至长芽；4）生根培养：待长出完整的再生苗后转入生根培养基中，进行生根壮苗，根长至4cm左右，进行炼苗移栽。本发明建立了一个高效的玉米自交系SL1303幼胚转化方法，为今后利用该体系进行玉米自交系SL1303的转基因提供了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN104513823B
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201410680035.4
申请日：2014-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种耐旱耐盐的转基因植物的制备方法，包括下述步骤：(1)获得玉米转录因子基因ZmPIF3核苷酸序列及氨基酸序列；(2)用RT‑PCR获得玉米ZmPIF3基因片段；(3)用荧光定量PCR的方法分析玉米转录因子基因ZmPIF3在逆境胁迫时的表达谱，将ZmPIF3基因片段构建到质粒载体中；(4)利用电击法将步骤(3)得到的带有ZmPIF3的质粒转化农杆菌；(5)将带有转化质粒的农杆菌转化目标植物；(6)目标植物转基因阳性苗的鉴定；(7)目标植物转基因T2代阳性纯合植株的筛选；(8)转基因纯合植株的抗逆分析。本发明玉米PIFs家族转录因子基因ZmPIF3提高了转基因植物的耐旱及耐盐能力。
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公开(公告)号：CN105838789A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610247580.3
申请日：2016-04-20
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q2600/13
Abstract: 本发明公开了玉米转录因子ZmPIF1转基因水稻的分子标记及其应用，属于作物遗传育种领域。已获得的玉米转录因子ZmPIF1转基因水稻材料具有明显的节水耐旱表型，本发明根据玉米转录因子ZmPIF1基因的核苷酸序列，在CDS内设计分子标记的引物，运用PCR技术获得ZmPIF1的DNA片段并对该DNA片段进行测序，依据ZmPIF1的特异性片段筛选得到本发明分子标记的引物，从而获得玉米转录因子ZmPIF1转基因水稻特异的分子标记。本发明的分子标记重复性好、扩增稳定、操作简便、成本低廉，可以用来检测水稻背景中的玉米ZmPIF1基因，为今后利用ZmPIF1基因转基因水稻进行分子标记辅助选择提供坚实的基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105830763A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610223325.5
申请日：2016-04-12
Applicant: 扬州大学
IPC: A01G7/06
CPC classification number: A01G7/06
Abstract: 本发明公开了小麦转化中用潮霉素作为筛选剂的应用，其受体材料为含有潮霉素筛选标记的转基因扬麦14的T3代纯合株系，潮霉素溶液的最适筛选浓度为250mg/L；当潮霉素溶液的筛选剂量为250mg/L时，受体材料的植株存活率为60％，对照材料的植株存活率为20％。本发明将已转化的含有潮霉素筛选标记的转基因T3代纯合株系为材料，配置不同浓度的潮霉素，通过浸种、土培的方法，摸索出潮霉素最适筛选浓度(250mg/L)，提高了小麦遗传转化的工作效率，节约实验成本。
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公开(公告)号：CN105594598A
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201610188353.8
申请日：2016-03-29
Applicant: 扬州大学
IPC: A01H4/00
CPC classification number: A01H4/005
Abstract: 本发明涉及一种扬麦14成熟胚的胚性愈伤组织培养方法，该方法以扬麦14成熟胚为材料，在诱导培养基中，25±1℃，暗培养，10天为继代周期的条件下，继代1-3次获得具有较高再生率的胚性愈伤组织。本发明以扬麦14成熟胚为实验对象，诱导培养基(MS+500mg/L酪蛋白水解物+2mg/L 2，4-D+30g/L蔗糖+2.6g/L植物凝胶，PH5.8)为培养条件，25±1℃，10天为继代周期，对扬麦14成熟胚诱导继代培养。结果发现继代1-3次胚性愈伤组织生成率和再生率均保持上升趋势；继代次数超过5次则抑制扬麦14成熟胚胚性愈伤组织的再生能力。
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公开(公告)号：CN104585018A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510019098.X
申请日：2015-01-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及小麦-长穗偃麦草7E染色体长臂抗赤霉病易位系的培育方法。本研究利用60Co辐射处理小麦-长穗偃麦草7E代换系与扬麦16杂交的F2代种子，在辐射后代的繁殖过程中，首先进行田间赤霉病抗性筛选，选择赤霉病抗性高又具有长穗偃麦草相关特征的植株单株种植。在此基础上利用长穗偃麦草7E染色体长臂特异标记对获选单株进行检测，最后通过细胞学进行小麦-长穗偃麦草抗赤霉病易位系确认。利用田间表现型筛选、分子标记鉴定和细胞学确认三种方法相结合，创建了小麦-长穗偃麦草7E染色体长臂抗赤霉病易位系；所获抗赤霉病易位系为小麦品种改良和遗传研究提供新种质或基础材料，可作为亲本参与抗赤霉病小麦的培育。
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公开(公告)号：CN104263753A
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201410576583.2
申请日：2014-10-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域。具体涉及一种提高农杆菌介导法转化小麦的转化率的方法。该方法是通过农杆菌介导法转化小麦，侵染过程中控制农杆菌菌液浓度在OD600＝0.5。本发明发现侵染时菌液的OD600的值为0.5时转化效率明显最高，相对于目前使用的OD600的值为0.6至0.8之间侵染效率最高有所不同。这一发现有助于提高我们在使用农杆菌介导法转化小麦时的转化效率，为培育出新的抗性品种提供一种高效率的实验方法，为提高小麦产量解决粮食问题提供方便。
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公开(公告)号：CN102888400B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210444430.3
申请日：2012-11-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，具体为根据基于新一代测序技术和生物信息学原理而发展的特异性长度扩增片段测序技术，对普通小麦和普通小麦-长穗偃麦草附加系的特异片段进行测序，获得海量普通小麦、长穗偃麦草序列，利用计算机软件进行序列数据比对分析，获得大量长穗偃麦草7E染色体特异片段序列，从而开发出10个长穗偃麦草7E染色体特异分子标记。这些标记不仅可用于长穗偃麦草7E染色体的检测，还可为小麦抗性育种中的分子标记辅助选择。此外，基于SLAF-seq技术开发长穗偃麦草染色体特异分子标记的成功，也为该技术应用于其它物种的分子标记开发提供了重要借鉴，为分子育种、系统进化、种质资源鉴定提供重要的应用基础。
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