共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞及其制备方法

    公开(公告)号:CN101988049A

    公开(公告)日:2011-03-23

    申请号:CN201010534375.8

    申请日:2010-11-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及涉及一种共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞及其制备方法。所说的转基因细胞能稳定共表达膜型IL-15和Rae-1ε蛋白的转基因细胞BaF3细胞。它可通过下述方法制备:利用PCR技术扩增了小鼠Rae-1ε基因和小鼠膜表达型的IL-15基因,将它们分别插入到真核表达载体pVITRO2-mcs的两个多克隆位点,获得重组载体,将重组载体转染小鼠肿瘤细胞株BaF3,经抗生素筛选和流式细胞仪分选后,获得转基因细胞。该转基因细胞可为IKDC提供三重的刺激信号,作为体外高效扩增和活化IKDC的工具。此外,该转基因细胞还可以用于抗肿瘤的免疫治疗研究。

    人工抗原递呈细胞及其制备方法

    公开(公告)号:CN101041816A

    公开(公告)日:2007-09-26

    申请号:CN200610098087.6

    申请日:2006-12-01

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 人工抗原递呈细胞及其制备方法,涉及一种新型抗原递呈细胞的制备方法。以人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞为载体,转染表达CD32a的真核表达载体,通过G418筛选,流式细胞仪分选将CD32分子稳定表达在K562细胞表面,形成K32细胞;制备双表达CD86和4-1BBL共刺激信号的真核表达载体;将真核表达载体转染K32细胞,通过潮霉素筛选,流式细胞仪分选得到稳定表达CD86和4-1BBL分子的K32细胞,即为人工抗原递呈细胞。本发明易于大量制备、成本低、重复性好、刺激CTL细胞活化效应高,同时递呈CTL活化的双重信号,能有效抑制凋亡。

    凌霄花黄酮在制备抗肝纤维化药物中的应用

    公开(公告)号:CN117547563A

    公开(公告)日:2024-02-13

    申请号:CN202311829948.3

    申请日:2023-12-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种凌霄花黄酮在制备抗肝纤维化药物中的应用,所述凌霄花黄酮的提取方法包括:采用乙醇对凌霄花进行回流提取,得到提取液;对提取液进行减压回收乙醇至无醇味,得到凌霄花提取液;将凌霄花提取液过树脂柱,然后依次采用蒸馏水和乙醇溶液洗脱,回收乙醇,蒸干,得到凌霄花黄酮。本发明所提出的凌霄花黄酮具有改善肝纤维化的作用,随着药物浓度增加,小鼠肝损伤相关指标显著降低,高剂量凌霄花黄酮可以达到与阳性药秋水仙碱相似效果;并且体外实验表明凌霄花黄酮能够诱导肝星状细胞线粒体氧化应激,抑制肝星状细胞活化,并降低肝脏胶原沉积,减轻血清肝损伤指标,为肝纤维化治疗提供新的药物选择。

    一种FcγRIIb基因敲除的MDSC及其作为抗肿瘤药物的应用

    公开(公告)号:CN107217035B

    公开(公告)日:2025-03-11

    申请号:CN201710472475.4

    申请日:2017-06-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于免疫学领域,具体涉及一种FcγRIIb基因敲除的MDSC及其作为抗肿瘤药物的应用。本发明所述FcγRIIb基因敲除(FcγIIRb‑/‑)的MDSC的制备方法,包括如下步骤:给FcγRIIb基因敲除(FcγIIRb‑/‑)小鼠皮下注射1×106个肺癌细胞株3LL细胞或黑色素瘤细胞株B16F10细胞,3周后无菌分离获取小鼠脾脏,用无菌针芯将脾脏磨碎,经400目钢网滤过并收集单细胞,Tris‑NH4Cl裂解红细胞,PBS洗涤2遍,CD11b磁珠4℃标记15min后,过分选柱阳性选择CD11b+细胞,即可制备得到FcγRIIb基因敲除的MDSC。

    一种FcγRIIb基因敲除的MDSC及其作为抗肿瘤药物的应用

    公开(公告)号:CN107217035A

    公开(公告)日:2017-09-29

    申请号:CN201710472475.4

    申请日:2017-06-20

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12N5/0634 A61K35/14

    Abstract: 本发明属于免疫学领域,具体涉及一种FcγRIIb基因敲除的MDSC及其作为抗肿瘤药物的应用。本发明所述FcγRIIb基因敲除(FcγIIRb‑/‑)的MDSC的制备方法,包括如下步骤:给FcγRIIb基因敲除(FcγIIRb‑/‑)小鼠皮下注射1×106个肺癌细胞株3LL细胞或黑色素瘤细胞株B16F10细胞,3周后无菌分离获取小鼠脾脏,用无菌针芯将脾脏磨碎,经400目钢网滤过并收集单细胞,Tris‑NH4Cl裂解红细胞,PBS洗涤2遍,CD11b磁珠4℃标记15min后,过分选柱阳性选择CD11b+细胞,即可制备得到FcγRIIb基因敲除的MDSC。

    人工抗原递呈细胞及其制备方法

    公开(公告)号:CN101041816B

    公开(公告)日:2010-08-25

    申请号:CN200610098087.6

    申请日:2006-12-01

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 人工抗原递呈细胞及其制备方法,涉及一种新型抗原递呈细胞的制备方法。以人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞为载体,转染表达CD32a的真核表达载体,通过G418筛选,流式细胞仪分选将CD32分子稳定表达在K562细胞表面,形成K32细胞;制备双表达CD86和4-1BBL共刺激信号的真核表达载体;将真核表达载体转染K32细胞,通过潮霉素筛选,流式细胞仪分选得到稳定表达CD86和4-1BBL分子的K32细胞,即为人工抗原递呈细胞。本发明易于大量制备、成本低、重复性好、刺激CTL细胞活化效应高,同时递呈CTL活化的双重信号,能有效抑制凋亡。

    共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞及其制备方法

    公开(公告)号:CN101988049B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201010534375.8

    申请日:2010-11-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及涉及一种共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞及其制备方法。所说的转基因细胞能稳定共表达膜型IL-15和Rae-1ε蛋白的转基因细胞BaF3细胞。它可通过下述方法制备:利用PCR技术扩增了小鼠Rae-1ε基因和小鼠膜表达型的IL-15基因,将它们分别插入到真核表达载体pVITRO2-mcs的两个多克隆位点,获得重组载体,将重组载体转染小鼠肿瘤细胞株BaF3,经抗生素筛选和流式细胞仪分选后,获得转基因细胞。该转基因细胞可为IKDC提供三重的刺激信号,作为体外高效扩增和活化IKDC的工具。此外,该转基因细胞还可以用于抗肿瘤的免疫治疗研究。

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