公开(公告)号：CN102382844B

公开(公告)日：2012-11-21

申请号：CN201110293170.X

申请日：2011-10-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李国才 ,  解如山 ,  汪静 ,  杜庆辉 ,  焦红梅 ,  严华 ,  潘兴元 ,  陈红菊 ,  龚卫娟 ,  钱莉 ,  季明春

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及医学微生物学领域，具体涉及一种淋病奈瑟菌免疫阻遏基因Δrmp及突变方法。所述淋病奈瑟菌免疫阻遏突变基因Δrmp，它的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示。该突变基因通过下述方法获得：是以淋病奈瑟菌基因组DNA为模板，PCR扩增rmp基因，并连接到T载体pMD19中，以连接产物pMD19rmp为模板，扩增包含rmp基因下游侧翼区、pMD19载体骨架和rmp基因上游侧翼区的线性DNA片段，与相同酶切处理的卡那霉素抗性基因Kanr连接，得到的突变基因Δrmp。

公开(公告)号：CN102382844A

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN201110293170.X

申请日：2011-10-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李国才 ,  解如山 ,  汪静 ,  杜庆辉 ,  焦红梅 ,  严华 ,  潘兴元 ,  陈红菊 ,  龚卫娟 ,  钱莉 ,  季明春

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及医学微生物学领域，具体涉及一种淋病奈瑟菌免疫阻遏基因Δrmp及突变方法。所述淋病奈瑟菌免疫阻遏突变基因Δrmp，它的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。该突变基因通过下述方法和得：是以淋病奈瑟菌基因组DNA为模板，PCR扩增rmp基因，并连接到T载体pMD19中，以连接产物pMD19rmp为模板，扩增包含rmp基因下游侧翼区、pMD19载体骨架和rmp基因上游侧翼区的线性DNA片段，与相同酶切处理的卡那霉素抗性基因Kanr连接，得到的突变基因Δrmp。

公开(公告)号：CN103060363A

公开(公告)日：2013-04-24

申请号：CN201310031718.2

申请日：2013-01-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 焦红梅 ,  贺丽 ,  陈瑾 ,  李国才 ,  陈红菊 ,  潘兴元 ,  田芳 ,  季明春

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/36

Abstract: 本发明涉及医学微生物学领域，具体涉及一种淋病奈瑟菌的转化方法。该方法是将淋病奈瑟菌分别经液体及固体培养基培养后，收集细菌于离心管中；细菌经冰浴静置、充分洗涤和悬浮后制得淋病奈瑟菌感受态作为转化用受体菌备用；通过电转化方法将原核表达载体转入到上述备用的淋病奈瑟菌感受态中，用酶切和PCR方法筛选鉴定重组淋病奈瑟菌。本发明通过优化淋病奈瑟菌的培养条件，制备了淋病奈瑟菌感受态，建立了淋病奈瑟菌的转化方法，此转化方法简便易行，获得的重组菌性质稳定，为今后淋病奈瑟菌感染机制和疫苗效果的研究奠定了基础。同时，该转化方法的建立进一步拓宽了淋病奈瑟菌的研究领域。