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公开(公告)号：CN106831957B
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201710248387.6
申请日：2017-04-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01
Abstract: 本发明涉及一种源于鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)VP1‑aa 1‑19多肽作为高效细胞穿膜肽的应用。所述VP1‑aa 1‑19多肽序列如SEQ ID NO.2所示。该多肽可以携带FITC在30min内进入293T细胞、HCT‑116细胞、3T3细胞、MDCK细胞、MSB1细胞，而且穿膜效率与穿膜肽浓度呈正相关性，关键特点其可高效进入悬浮培养细胞。结合激光共聚焦显微镜和流式细胞术结果显示，鸡传染性贫血病毒VP1‑aa 1‑19多肽的穿膜效率明显高于TAT短肽。
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公开(公告)号：CN106520809A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610889152.0
申请日：2016-10-12
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C07K2319/00 , C12N2750/10022 , C12N2800/101
Abstract: 一种GyV3新型环形病毒VP3融合蛋白的制备方法，涉及GyV3新型环形病毒的诊断用融合蛋白的制备技术领域。本发明设计了扩增出pGEX-6p-1线性化载体以及GyV3病毒VP3基因片段的两对引物，利用商品化的重组酶ExnaseTM II，不经酶切连接反应，直接在体外快速重组取得阳性克隆体，并转化BL21细菌，经IPTG诱导下即获得GyV3新型环形病毒VP3融合蛋白。本发明简化了克隆过程，实现VP3基因快速克隆表达。
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公开(公告)号：CN106443015A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610837860.X
申请日：2016-09-21
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/6857 , G01N33/535 , G01N33/56983 , G01N2333/075
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于hexon蛋白N端保守区的检测禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒。该试剂盒包括包被有hexon蛋白N端保守区表达产物的ELISA酶标板，HRP标记的兔抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液；所述的hexon蛋白N端保守区序列如SEQ ID NO.5所示。本发明建立的禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒能特异性的检测出抗禽腺病毒抗体，而不能检测出抗其它病原的抗体。因此，该试剂盒具有良好禽腺病毒的特异性，能用于禽腺病毒感染状况流行病学调查。
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公开(公告)号：CN105037503A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510357985.8
申请日：2015-06-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种AGV2型环形病毒VP3可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP3基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP3，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP3可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN107607717A
公开(公告)日：2018-01-19
申请号：CN201710669646.2
申请日：2017-08-08
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , C07K14/075 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种基于F2蛋白的检测血清4型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒，包括包被有纤突蛋白基因F2表达产物的ELISA酶标板，阳性阴性对照，HRP标记的兔抗鸡二抗，样品稀释液、显色液以及洗涤液。本发明建立的FAdV-4抗体的间接ELISA试剂盒能特异性的检测出FAdV-4抗体，而与抗流感病毒血清(AIV)、抗马立克病毒血清(MDV)、抗新城疫病毒血清(NDV)、抗禽网状内皮组织增生症病毒血清(REV)以及SPF鸡血清不反应(图6)。因此，该试剂盒具有良好FAdV-4的特异性，能用于FAdV-4感染及免疫状况流行病学调查。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106995487A
公开(公告)日：2017-08-01
申请号：CN201710248386.1
申请日：2017-04-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01
Abstract: 本发明涉及一种源于鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)VP1‑aa 23‑43多肽作为高效细胞穿膜肽的应用。所述VP1‑aa 23‑43多肽序列如SEQ ID NO.2所示。该多肽可以携带FITC在30min内进入293T细胞、HCT‑116细胞、3T3细胞、MDCK细胞、MSB1细胞，而且穿膜效率与穿膜肽浓度呈正相关性，关键特点其可高效进入悬浮培养细胞。结合激光共聚焦显微镜和流式细胞术结果显示，鸡传染性贫血病毒VP1‑aa 23‑43多肽在10μM时具有比TAT短肽的穿膜效率高2倍多。
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公开(公告)号：CN106349348A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201610937104.4
申请日：2016-11-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2750/10022 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效，获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN105037504A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510359309.4
申请日：2015-06-25
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/01 , C07K2319/23 , C12N2750/10011
Abstract: 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP2，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN109970851B
公开(公告)日：2022-12-06
申请号：CN201910257290.0
申请日：2019-04-01
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/52
Abstract: 本发明涉及一种CCV病毒M蛋白的单抗及其制备方法、免疫胶体金试纸条的制备方法，具体涉及CCV病毒M蛋白的单抗，包括CCV M蛋白特异单克隆抗体2H11、2G3。其制备方法；以分离纯化的CCV灭活病毒为免疫抗原，用单克隆抗体技术制备出CCV单抗；经western‑blot试验鉴定单抗针对M蛋白，再用重组酶ExnaseTM II技术对CCV病毒M蛋白的基因克隆进线性化的pCDNA3.1载体，转染293T细胞进行M蛋白表达，IFA试验验证，获得2株CCV病毒M蛋白特异单抗2H11、2G3。本发明还公开了犬冠状病毒胶体金检测试纸条的制备方法。本发明特异性强、敏感性高、操作简单、成本低，适用于临床及田间检测，用于CCV病原学诊断、流行病学调查和动物医院快速诊断。
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公开(公告)号：CN108107208B
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201711372077.1
申请日：2017-12-19
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/075 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于F蛋白的检测血清8型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒，包括包被有血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F的表达蛋白的ELISA酶标板，阳性、阴性对照，HRP标记的兔抗鸡二抗，稀释液、显色液、洗涤液、终止液。本发明的ELISA试剂盒能特异性的检测出FAdV‑8抗体，而与抗流感病毒血清、抗马立克病毒血清、抗新城疫病毒血清、抗鸡传染性贫血病病毒血清、网状内皮细胞增生病病毒、抗血清4型禽腺病毒血清、抗减蛋综合征病毒血清以及SPF鸡血清不反应。因此，该试剂盒具有良好FAdV‑8的特异性，能用于FAdV‑8感染及免疫状况流行病学调查。
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