公开(公告)号：CN106995486A

公开(公告)日：2017-08-01

申请号：CN201710248360.7

申请日：2017-04-17

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  刘敏 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  季星妤 ,  施洋洋 ,  韦芊含

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C07K16/08 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种GyV8新型环形病毒VP3可溶性蛋白的制备方法。该方法是用pGEX‑6p‑1线性化载体以及GyV8病毒VP3基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP3，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现GyV8的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明不依赖于酶切位点及限制性内切酶的重组酶ExnaseTM II体外重组技术克隆GyV8病毒VP3基因，简化克隆过程，实现VP3基因快速克隆表达。

公开(公告)号：CN105037504B

公开(公告)日：2016-11-30

申请号：CN201510359309.4

申请日：2015-06-25

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  田晓彦 ,  施洋洋 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  谢泉 ,  夏驰超 ,  周晓祥 ,  范中雷

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX‑6p‑1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP2，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。

公开(公告)号：CN105037503B

公开(公告)日：2016-12-21

申请号：CN201510357985.8

申请日：2015-06-25

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  田晓彦 ,  施洋洋 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  谢泉 ,  夏驰超 ,  周晓祥 ,  范中雷

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/70 ,  C12P21/02 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种AGV2型环形病毒VP3可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP3基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP3，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP3可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。

公开(公告)号：CN105037503A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510357985.8

申请日：2015-06-25

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  田晓彦 ,  施洋洋 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  谢泉 ,  夏驰超 ,  周晓祥 ,  范中雷

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/70 ,  C12P21/02 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种AGV2型环形病毒VP3可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP3基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP3，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP3可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。

公开(公告)号：CN105037504A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510359309.4

申请日：2015-06-25

申请人： 扬州大学

发明人： 叶建强 ,  田晓彦 ,  施洋洋 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  谢泉 ,  夏驰超 ,  周晓祥 ,  范中雷

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

CPC分类号： C07K14/01 ,  C07K2319/23 ,  C12N2750/10011

摘要： 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP2，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。